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人鼻咽癌細(xì)胞株 貼壁細(xì)胞消化方法2016/01/05
人鼻咽癌細(xì)胞株貼壁細(xì)胞消化方法一、酶消化法。1、胰酶。這是用得zui多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含鈣、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。二、離子螯合劑
IOSE80細(xì)胞 傳代和換液2016/01/05
貼壁生長的IOSE80細(xì)胞是用彎口培養(yǎng)瓶培養(yǎng),培養(yǎng)瓶平放(瓶口向上翹),細(xì)胞就貼在瓶底內(nèi)壁一層生長。瓶底空間有限,當(dāng)細(xì)胞在瓶底生長鋪滿一層時(shí),由于接觸抑制,細(xì)胞會停止分裂而進(jìn)入老化凋亡的狀態(tài)。理論上將瓶底平面空間擴(kuò)大,就能讓細(xì)胞有更大的空間繼續(xù)生長。在實(shí)際操作上,就是把一個(gè)瓶的貼壁細(xì)胞從瓶底內(nèi)壁“取下來”,再稀釋分裝到X個(gè)新的培養(yǎng)瓶,這就相當(dāng)于把原來的面積擴(kuò)大了X倍。就是我們習(xí)慣上說的“1傳X”。所謂“傳代”就是這個(gè)意思,以細(xì)胞分裂來說,這樣的“傳代”并不是指細(xì)胞由一個(gè)變成兩個(gè),而是已經(jīng)經(jīng)過了很
細(xì)胞培養(yǎng) 支原體污染問題2016/01/05
細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染問題細(xì)胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45um)的原核生物,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,而細(xì)胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響,因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺。支原體污染的后果:細(xì)胞株若受到細(xì)菌、真菌、支原體、或是特定病毒等之污染時(shí),會嚴(yán)重的影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。而細(xì)菌、真菌等之微生物污染時(shí),較易自培養(yǎng)基等的外觀變化察覺。但是若受
特級胎牛血清與優(yōu)級胎牛血清比較2015/12/29
特級胎牛血清1.無溶血、無異物。凍結(jié)后為橙黃色固體,融化后為橙黃色液體。2.蛋白含量3.5%4.5%(ω/V)3.血紅蛋白含量0.015(ω/V)4.無雜菌生長5.無支原體污染6.細(xì)菌內(nèi)毒素<5Eμ/ml7.無牛腹瀉病毒污染8.無大腸桿菌噬菌體污染9.細(xì)胞zui大濃度>1.4×106/mlSP2/0細(xì)胞倍增時(shí)間≤16hs克隆率>85%適合:嬌貴細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞珠保存。對雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合及單抗制備效果*。適應(yīng)范圍:細(xì)胞珠的保藏、胚胎細(xì)胞、細(xì)胞融合組織器官培養(yǎng)及單抗制備。優(yōu)級胎牛血清1、凍結(jié)后
16000044 16000044胎牛血清 使用常見問題2015/12/29
1600004416000044胎牛血清使用常見問題16000044胎牛血清是Gibco公司一款適用于胚胎干細(xì)胞、神經(jīng)類細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、組織細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、嬌貴細(xì)胞等一起細(xì)胞的福星。試劑銷售庫存常備GIBCO美國血源,特級類胎牛血清,貨號:16000044,規(guī)格:500ML,貨源充足,包裝。我們來談?wù)?600004416000044胎牛血清使用常見問題1、如何儲存和解凍16000044胎牛血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意
10099141 10099141胎牛血清 如何儲存2015/12/29
1009914110099141胎牛血清如何儲存1009914110099141胎牛血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):(1)需要長期保存的10099141血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作
血清都有哪些作用2015/12/16
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護(hù)作用。主要作用1、提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。2、提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板
SERANA胎牛血清儲存事項(xiàng)2015/12/03
SERANA胎牛血清儲存事項(xiàng)目前上海試劑銷售科技有限公司已獲得德國SERABA動物血清、BSA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑的一級代理權(quán),現(xiàn)在我們談?wù)凷ERANA胎牛血清儲存事項(xiàng),也是適合于所有血清的儲存。1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中
收到胎牛血清后如何應(yīng)對沉淀現(xiàn)象2015/12/01
收到胎牛血清后如何應(yīng)對沉淀現(xiàn)象本人做銷售6年多了,已經(jīng)賣了將近3萬多瓶的血清了,囊括:Gibco胎牛血清、Hyclone胎牛血清、德國SERANA胎牛血清、活性炭處理血清、超低IgG血清、透析胎牛血清、熱滅活血清等,有很多老師收到血清使用時(shí)發(fā)現(xiàn)有沉淀想象,像頭皮屑有的甚者在纖維鏡下看到像成團(tuán)棉花一樣,因此懷疑產(chǎn)品的質(zhì)量問題,其實(shí)這是沒有根據(jù)的。它是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好
血清滅活的處理步驟2015/11/27
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護(hù)作用。血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長達(dá)30分鐘是*沒有必要的。血清滅活處理步驟:1.選用與血清瓶同規(guī)格的對照瓶一個(gè)。2.對照瓶內(nèi)放入與血清等體積的水中。3.溫度預(yù)試。4.
胎牛血清,小牛血清和新生牛血清有何區(qū)別2015/11/21
胎牛血清,小牛血清和新生牛血清有何區(qū)別1、來源不同:胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃
serana血清如何化凍、滅活、分裝2015/11/21
serana血清如何化凍、滅活、分裝客戶收到serana血清后如何化凍、滅活、分裝問:Serana血清如何化凍?答:將血清從-20度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需要30分鐘至2小時(shí),也可放于4度冰箱化凍隔夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時(shí)保存)問:serana血清如何滅活?答:(1)放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱(同時(shí)放入一個(gè)空的血清瓶,內(nèi)裝100ml自來水,插入一根溫度計(jì),溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn))(2)當(dāng)溫度計(jì)顯示56度時(shí),停止加熱,改為間斷加熱,維持56度(±0.5度)30分
Gibco|serana血清使用中常見問題2015/11/21
Gibco|serana血清使用中常見問題問:如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?答:將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時(shí)間儲存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放
Hyclone|serana血清中的懸浮物問題2015/11/21
Hyclone|serana血清中的懸浮物問題1、問:發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞瓶中背景有許多的小黑點(diǎn),培養(yǎng)液中也有一些漂浮的物??戳酥暗奶詾槭悄z原蟲。本打算換液,換液前特意看了下前些天配的培養(yǎng)液,肉眼發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中有懸浮的顆粒狀物質(zhì)(不多),于是放在鏡下觀察,新鮮培養(yǎng)液中有一些懸浮的小顆粒,不多。(培養(yǎng)液是R1640+20%牛血清+1%雙抗)于是又將分裝在4℃保存的小牛血清拿出觀察,肉眼可見5、6個(gè)白色小小球狀的物質(zhì),在血清瓶稍靠下的部位懸浮。鏡下觀察,也有少量的不知什么物質(zhì)的東西漂浮。小牛血清是Hyc
培養(yǎng)細(xì)胞的十個(gè)訣竅2015/11/18
細(xì)胞可是許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主角。如果細(xì)胞長不好,那么實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也不會好到哪兒去。在此我公司技術(shù)人員介紹了讓細(xì)胞快樂的十個(gè)訣竅。細(xì)胞可是許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主角。在此介紹了讓細(xì)胞快樂的十個(gè)訣竅。1.確保所有實(shí)驗(yàn)室材料都無菌交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。即使是zui輕微的污染,也可能毀了幾個(gè)星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕,真菌極易生長,因此必須注意定期清潔。此外,在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前,應(yīng)用酒精擦拭干凈,以避免污染。2.小心處理您的培養(yǎng)物細(xì)胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強(qiáng)調(diào)也不為過。劇烈搖晃,或
抗血清制備的注意事項(xiàng)2015/11/10
抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價(jià)的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應(yīng),一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(Antigenicdeterminant),另一方面取決于機(jī)體的免疫狀態(tài),當(dāng)具備以上兩個(gè)條件后,抗體生成將遵循抗體生成的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)??乖姆N類繁多,包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細(xì)胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般*抗原免疫動物需
紫外線照射HyClone胎牛血清是否有影響2015/11/07
HyClone胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料,經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成。本產(chǎn)品無支原體、無牛病毒、無噬毒體、內(nèi)毒素含量低于1EU/ml,適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制,是醫(yī)院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。把胎牛血清放到超凈工作臺里用紫外燈照射,會對胎牛血清有影響嗎?對于這個(gè)問題有兩種不同的說法:一種是沒有問題的,因?yàn)樽贤饩€的穿透力非常弱,他僅能穿透她自己的玻璃管(與普通玻璃材質(zhì)不一樣),對于我們平常用的那些玻璃和塑料是沒有穿透力的。也就
結(jié)腸癌細(xì)胞MC38說明書2015/10/30
結(jié)腸癌細(xì)胞MC38說明書細(xì)胞名稱結(jié)腸癌細(xì)胞MC38種屬小鼠生長狀態(tài)貼壁生長培養(yǎng)條件培養(yǎng)基類型:1640培養(yǎng)基FBS(Serana胎牛血清(貨號:S-FBS-SA-015)):10%抗生素:雙抗培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5%傳代方法收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài):如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。貼壁細(xì)胞傳代方法:1棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。2加1ml0.25%的胰酶(含
G-401細(xì)胞培養(yǎng)說明書2015/10/30
G-401細(xì)胞培養(yǎng)說明書試劑銷售供應(yīng)G401細(xì)胞,稱為:人腎癌Wilms細(xì)胞;人腎胚瘤細(xì)胞細(xì)胞介紹G-401細(xì)胞來源于韋爾姆斯氏瘤,該細(xì)胞表達(dá)成腎細(xì)胞生長因子。細(xì)胞特性1)來源:腎臟2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長3)含量:1x106個(gè)/mL4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性5)規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝運(yùn)輸和保存:使用T25瓶充液發(fā)送活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,請先在顯微鏡下檢查細(xì)胞生長狀態(tài),并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或隔夜后,再次檢查細(xì)胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好,可按照以下細(xì)胞培養(yǎng)步驟進(jìn)行
血清您需要哪些步驟檢測把關(guān)呢?2015/10/27
血清需經(jīng)過多層檢測把關(guān)。1.滲透壓:使用凝固點(diǎn)降低的方法檢測滲透壓,我們每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對我們的滲透壓檢測儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。2.測定pH值:同樣每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。3.電泳圖譜:鑒定血清的整體性質(zhì),樣品被加到醋酸纖維素介質(zhì)中并在緩沖體系內(nèi)遷移。條帶經(jīng)染色,清潔,干燥后用密度儀進(jìn)行掃描以檢測白蛋白和球蛋白組分的相對濃度。4.氧合血紅蛋白檢測:為證實(shí)是否在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行采血和處理,使用修飾的Fleming方法對血紅蛋白進(jìn)行分光光度檢
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