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細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及其解決2015/08/24
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及其解決1、如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊琈EM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始。2、何時須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存
原代細(xì)胞鑒定方法2015/08/12
原代細(xì)胞鑒定動物組織是由多種類型的細(xì)胞組成的，包括表皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。分離出的細(xì)胞是否是實驗所需類型的細(xì)胞則需要進(jìn)行鑒定，除了基本的形態(tài)學(xué)觀察外zui常用的就是免疫組織化學(xué)檢測。操作步驟：1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。2.用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。3.0.5%TritonX-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。4.3%H2
生物試劑銷售中心教您細(xì)胞活力如何檢測2015/08/12
生物試劑銷售中心教您細(xì)胞活力如何檢測在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力。由組織中分離細(xì)胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細(xì)胞是否有損傷作用；復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。細(xì)胞懸液制備后，zui常用活體染料臺盼藍(lán)對細(xì)胞染色，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。正常細(xì)胞胞膜完整，臺盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞胞膜通透性增加，臺盼藍(lán)能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色（藍(lán)色）。操作步驟：1.配制4%臺盼藍(lán)母液：稱取
Invitrogen脂質(zhì)體2000的操作流程及注意事項2015/08/07
Invitrogen脂質(zhì)體2000的操作流程及注意事項Invitrogen脂質(zhì)體2000的操作流程及注意事項*，Invitrogen脂質(zhì)體2000是廣大老師所熟知的轉(zhuǎn)染試劑，其特點：轉(zhuǎn)染步驟快速簡便（1）DNA-陽離子脂質(zhì)體試劑的復(fù)合體可以直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中，有血清也不怕。（2）轉(zhuǎn)染后不需要除去Lipofectamine2000試劑，無需換培養(yǎng)基。我們介紹一下Invitrogen脂質(zhì)體2000的操作流程、注意事項等。一、操作流程事實上Lipofectamine系列產(chǎn)品操作流程都是又快又簡單：
NK-92細(xì)胞培養(yǎng)說明2015/07/29
NK-92細(xì)胞NK-92細(xì)胞；中文名稱：人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞GeneralInformation:Organism:Homosapiens,humanTissue:peripheralbloodCultureProperties:Suspension，multicellaggregatesMorphology:lymphoblastBiosafetyLevel:2CultureMethod:CompleteGrowthMedium:MEMα(Gibco11900-024)+10
如何辨別胎牛血清真假！2015/07/02
如何辨別胎牛血清真假！市場上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，很多科研工作者，特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人，難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。生物試劑銷售中心（上海）生物科技有限公司為您總結(jié)如下：一、外觀拿到血清，zui先接觸的是血清外觀，對于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說，外觀的判斷尤為重要。1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶
復(fù)蘇細(xì)胞注意事項2015/06/18
復(fù)蘇細(xì)胞注意事項：1.收到細(xì)胞后當(dāng)天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基，放進(jìn)培養(yǎng)箱，第二天再消化。2.邊觀察邊消化，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化?？蛻裘?消化時間。3.隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書，請客戶仔細(xì)查看。4.記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。5.售后時間為一周，于細(xì)胞本身的質(zhì)量問題，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作，消化過度，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問題不在售后范疇。6.收到細(xì)胞后，如細(xì)胞狀態(tài)
胎牛血清功能、參數(shù)以及儲存2015/06/02
胎牛血清主要功能：1）提供維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素2）酸堿緩沖液作用3）提供蛋白酶抑制劑，使細(xì)胞傳代時細(xì)胞不受傷害4）細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料基質(zhì)上所需因子來源5）提供結(jié)合蛋白，結(jié)合或調(diào)控維生素、脂類、金屬和其他激素的結(jié)合物質(zhì)的活力；與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，解毒作用。胎牛血清標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)：1）內(nèi)毒素：標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml，含量*預(yù)示著已經(jīng)污染2）總蛋白含量：胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml3）血紅蛋白：標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl血清種類：1）胎牛血清（FBS）：八月齡胎牛心臟穿刺取血分離血清2）
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項2015/05/26
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項1.實驗進(jìn)行前，超凈臺用紫外燈照射30~60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風(fēng)機運轉(zhuǎn)20min左右再開始實驗操作。2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。3.每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。4.操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，
細(xì)胞計數(shù)2015/05/26
細(xì)胞計數(shù)原理：當(dāng)待測細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時，通過測定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目即可換算出每mL細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量。操作步驟：1.將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上。2.輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞均勻分布。吸出少許細(xì)胞懸液滴在細(xì)胞入口，使細(xì)胞懸液充滿蓋玻片和計數(shù)板之間，靜置1~2min，使細(xì)胞沉降。注意蓋玻片下不要有氣泡，也避免細(xì)胞懸液進(jìn)入旁邊的槽中。3.在顯微鏡下對A/B/C/D四個大格內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，壓在大格四周邊線上的細(xì)胞只計數(shù)壓在2條邊線上的細(xì)胞（如右側(cè)和下方）。若鏡下有
細(xì)胞活力檢測2015/05/26
細(xì)胞活力檢測在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力。由組織中分離細(xì)胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細(xì)胞是否有損傷作用；復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。細(xì)胞懸液制備后，zui常用活體染料臺盼藍(lán)對細(xì)胞染色，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。正常細(xì)胞胞膜完整，臺盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞胞膜通透性增加，臺盼藍(lán)能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色（藍(lán)色）。操作步驟：1.配制4%臺盼藍(lán)母液：稱取4g臺盼藍(lán)，加少量蒸餾水
原代細(xì)胞鑒定2015/05/26
原代細(xì)胞鑒定動物組織是由多種類型的細(xì)胞組成的，包括表皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。分離出的細(xì)胞是否是實驗所需類型的細(xì)胞則需要進(jìn)行鑒定，除了基本的形態(tài)學(xué)觀察外zui常用的就是免疫組織化學(xué)檢測。操作步驟：1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。2.用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。3.0.5%TritonX-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。4.3%H2
HT-22細(xì)胞復(fù)蘇注意事項2015/05/26
HT-22細(xì)胞，即為小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞，試劑銷售提供高品質(zhì)HT-22細(xì)胞，培養(yǎng)條件：GIBCO(高糖DMEM+10%胎牛血清)。HT-22細(xì)胞復(fù)蘇注意事項：1.收到細(xì)胞后當(dāng)天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基，放進(jìn)培養(yǎng)箱，第二天再消化。2.邊觀察邊消化，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化。客戶摸索*消化時間。3.隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書，請客戶仔細(xì)查看。4.記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。5.售后時間為一周，于細(xì)
胃癌細(xì)胞系A(chǔ)GS培養(yǎng)說明2015/05/07
胃癌細(xì)胞系A(chǔ)GS培養(yǎng)說明細(xì)胞名稱胃癌細(xì)胞系A(chǔ)GS種屬人組織來源胃生長狀態(tài)貼壁生長細(xì)胞形態(tài)上皮樣培養(yǎng)條件培養(yǎng)基類型：RPMI1640（HycloneSH30809.01B)培養(yǎng)基FBS（BOVOGEN胎牛血清貨號：SFBS-B):10%抗生素：雙抗培養(yǎng)條件：37℃，CO2:5%傳代方法收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)：如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。貼壁細(xì)胞傳代方法：1棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂
細(xì)胞換液、復(fù)蘇及凍存2015/04/17
細(xì)胞換液、復(fù)蘇及凍存用10％胎牛DMEM培養(yǎng)液，37℃下置于5％CO2培養(yǎng)箱中。待細(xì)胞融合至80％，用0．25％胰酶消化傳代后接種(細(xì)胞密度5XlO4)于培養(yǎng)瓶或孔板，待細(xì)胞融合至約70％后用于實驗。細(xì)胞株培養(yǎng)方法如下：1.貼壁細(xì)胞換液：1）吸光培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液。2）用1xD-hank`s洗一次。3）加入適量的新鮮培養(yǎng)液，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。2.懸浮細(xì)胞換液1)吸光培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液放入15ml離心管中離心1500rpm5min。2)細(xì)胞沉淀用1xD-hank`s洗一次。3)加入
TPC-1人乳頭瘤狀甲狀腺癌細(xì)胞說明書2015/04/02
Designations:BiosafetyLevel:MediumSerum:Organism:Source:Homosapiens(human)Organ:thyroidDisease:papillomaMorphology:GrowthProperties:Propagation:epithelialadherent&SeePropagationTPC-11細(xì)胞庫ThebasemediumforthiscelllineisformulatedRPMI-1640Medium.Tomaketh
試劑銷售細(xì)胞產(chǎn)品目錄2015/04/01
如您有細(xì)胞株需求，請來電/:：王HTCC編號細(xì)胞名稱種屬正常細(xì)胞系：1L-02(人肝細(xì)胞)人2QSG-7701(人胚肝細(xì)胞,進(jìn)口胎牛血清)人3ChangLiver(CCL13，張氏肝細(xì)胞)人4LX-2(肝星形細(xì)胞,進(jìn)口胎牛血清培養(yǎng))人5HSC-T6(鼠肝星形細(xì)胞,進(jìn)口胎牛血清)大鼠6CFSC-8B(鼠肝星形細(xì)胞,進(jìn)口胎牛血清)大鼠7CFSC-2G(鼠肝星形細(xì)胞,進(jìn)口胎牛血清)大鼠8WB-F344(肝上皮樣干細(xì)胞,進(jìn)口胎牛血清)大鼠9Min6(胰島?細(xì)胞,進(jìn)口胎牛血清培養(yǎng))小鼠10C2C12(鼠肌
293細(xì)胞和293T細(xì)胞的區(qū)別2015/03/30
細(xì)胞名稱293和293T種屬人組織來源293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系，293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生，同時表達(dá)SV40大T抗原，含有SV40復(fù)制起始點與啟動子區(qū)的質(zhì)?？梢詮?fù)制。用Ca3(PO4)2轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50%。蛋白表達(dá)水平高，轉(zhuǎn)染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達(dá)的蛋白。瞬時轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞是過表達(dá)蛋白并獲得細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。形態(tài)特點上皮細(xì)胞致瘤性+產(chǎn)物或抗原大T抗原染色體核型亞三倍體人細(xì)胞系。染色體眾數(shù)為64，30%的細(xì)胞有64條染
人結(jié)腸癌細(xì)胞系 信息表2015/03/25
細(xì)胞信息表細(xì)胞名稱結(jié)腸癌細(xì)胞種屬人生長狀態(tài)貼壁生長培養(yǎng)條件培養(yǎng)基類型：DMEM（HycloneSH30243.01)培養(yǎng)基FBS（SCL澳洲胎牛血清(貨號:S20100A)):10%抗生素：雙抗培養(yǎng)條件：37℃，CO2:5%傳代方法收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)：如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。貼壁細(xì)胞傳代方法：1棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。2加1ml0.25%的胰酶（
人淋巴細(xì)胞分離液使用說明2015/03/23
人淋巴細(xì)胞分離液使用說明本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是葡聚糖與泛影酸葡甲胺。適用于從血液及組織勻漿中分離所需細(xì)胞，在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物中廣泛應(yīng)用。其他人及動物多種比重細(xì)胞分離液。注：因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同，所以用戶應(yīng)提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細(xì)胞的名稱。使用方法例：取抗凝血1ml，與Hank’s液1:1混勻后，小心加于2ml的細(xì)胞分離液之液面上，以2000轉(zhuǎn)/分離心(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子)15分鐘，收集界面上的細(xì)胞，放入含Hank’s液4-
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