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2018
01-10分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
1.分子生物學(xué)的概述分子生物學(xué)(molecularbiology)是在分子水平研究生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的一門(mén)生命學(xué)科,是生物學(xué)的一個(gè)分支。分子生物學(xué)技術(shù)問(wèn)世于20世紀(jì)80年代中期。這種以核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子為研究對(duì)象的新技術(shù)自發(fā)現(xiàn)以來(lái),已經(jīng)逐步成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域*的診療手段之一[1]。分子生物學(xué)的發(fā)展為人類認(rèn)識(shí)生命帶來(lái)了新的機(jī)會(huì),也為人類利用和改造世界開(kāi)創(chuàng)了廣闊前景。20世紀(jì)末數(shù)理科學(xué)在生物學(xué)領(lǐng)域廣泛滲透,在結(jié)構(gòu)基因組學(xué),功能基因組學(xué)和環(huán)境基因組學(xué)逢勃發(fā)展形勢(shì)下,分子診斷學(xué)技術(shù)將會(huì)2018
01-102018
01-10親和色譜法及其在我國(guó)的研究發(fā)展?fàn)顩r
親和色譜也稱為親和層析,是一種利用固定相的結(jié)合特性來(lái)分離分子的色譜方法。技術(shù)蓬勃發(fā)展,中國(guó)色譜專家同時(shí)也非常注重間色譜技術(shù)的交流。隨著間交流加深,中國(guó)的色譜技術(shù)已經(jīng)跟上了世界的步伐。色譜與生命科學(xué)的交叉研究、色譜與其它分析技術(shù)的聯(lián)用表現(xiàn)得異?;钴S。1.親和色譜1.1色譜概述20世紀(jì)初,俄植物學(xué)家茨維特提出色譜法。他把碳酸鈣粉末裝到玻璃管中,將植物葉子的石油醚萃取液作為樣品倒入管內(nèi),然后再用石油醚自上而下洗脫。隨著洗脫的進(jìn)行,植物葉子中的各種色素向下移動(dòng)逐漸形成一圈圈的色帶,茨維特將這種色帶分離過(guò)2018
01-092018
01-092018
01-09COD標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法:國(guó)標(biāo)GB11914-89化學(xué)需氧量的測(cè)定
1應(yīng)用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水中化學(xué)需氧量的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種類型的含COD值大于30mg/L的水樣,對(duì)未經(jīng)稀釋的水樣的測(cè)定上限為700mg/L。超過(guò)水樣稀釋測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于含氯化物濃度大于1000mg/L(稀釋后)的含鹽水。2定義在一定條件下,經(jīng)重鉻酸鉀氧化處理時(shí),水樣中的溶解性物質(zhì)和懸浮物所消耗的重鉻酸鉀鹽相對(duì)應(yīng)的氧的質(zhì)量濃度。3原理在水樣中加入已知量的重鉻酸鉀溶液,并在強(qiáng)酸介質(zhì)下以銀鹽作催化劑,經(jīng)沸騰回流后,以試亞鐵靈為指示劑,用硫酸亞鐵銨滴定水樣中未被還原的重鉻酸鉀有西歐愛(ài)好的硫酸2018
01-08生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則
一、前言穩(wěn)定性研究是貫穿于整個(gè)藥品研發(fā)階段和支持藥品上市及上市后研究的重要內(nèi)容,是產(chǎn)品有效期設(shè)定的依據(jù),可以用于對(duì)產(chǎn)品生產(chǎn)工藝、制劑處方、包裝材料選擇合理性的判斷,同時(shí)也是產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂的基礎(chǔ)。為規(guī)范生物制品穩(wěn)定性研究,制定本技術(shù)指導(dǎo)原則。本技術(shù)指導(dǎo)原則適用于生物制品的原液、成品或中間產(chǎn)物等的穩(wěn)定性研究設(shè)計(jì)、結(jié)果的分析等。對(duì)于一些特殊品種,如基因治療和細(xì)胞治療類產(chǎn)品等,還應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的特點(diǎn)開(kāi)展相應(yīng)的研究。生物制品穩(wěn)定性研究與評(píng)價(jià)應(yīng)當(dāng)遵循本指導(dǎo)原則,并應(yīng)符合國(guó)家藥品管理相關(guān)規(guī)定的要求。二、研究?jī)?nèi)容2018
01-082018
01-08農(nóng)藥殘留的危害及相關(guān)檢測(cè)方法和檢測(cè)項(xiàng)目
農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展使農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來(lái)越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。我國(guó)農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品的用量居高不下,而這些物質(zhì)的不合理使用必將導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo),影響消費(fèi)者食用安全,嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成消費(fèi)者致病、發(fā)育不正常,甚至直接導(dǎo)致中毒死亡。農(nóng)藥殘留超標(biāo)也會(huì)影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易,世界各國(guó)對(duì)農(nóng)藥殘留問(wèn)題高度重視,對(duì)各種農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留都規(guī)定了越來(lái)越嚴(yán)格的*,使中國(guó)農(nóng)產(chǎn)品出口面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。目前農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法種類繁多,究其原理來(lái)說(shuō)主要分為兩大類:生化測(cè)定法和色譜檢測(cè)法。其中生化測(cè)定法中的酶抑制率法由于2018
01-082018
01-05miRNA靶基因預(yù)測(cè)與驗(yàn)證相關(guān)問(wèn)題解答
miRNA主要通過(guò)與靶mRNA的結(jié)合,或促使mRNA降解,或阻礙其翻譯,從而抑制目的基因的表達(dá)。用生物信息學(xué)方法準(zhǔn)確快速地預(yù)測(cè)miRNA的靶基因,可以為研究miRNA功能提供線索。下面總結(jié)一些熒光素酶實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的問(wèn)題。1轉(zhuǎn)染成功如何判斷?共轉(zhuǎn)染的幾個(gè)質(zhì)粒中,3'UTR質(zhì)粒及Renilla質(zhì)??赏ㄟ^(guò)zui終的luc讀值判斷是否轉(zhuǎn)染成功,而miRNA質(zhì)?;騧imic的轉(zhuǎn)染情況無(wú)法從zui終的luc讀值做出判斷,因而針對(duì)miRNA,轉(zhuǎn)染是否成功可用以下方法進(jìn)行:i.如轉(zhuǎn)入的miRNA帶熒光標(biāo)記如GFP2018
01-042018
01-04ELISA 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集、處理和保存
一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存1、真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無(wú)菌試管中2、采血后室溫靜置1小時(shí)3、將采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下,可放置保存24-48小時(shí);-20℃下,可放置保存1個(gè)月;-70℃下,可放置保存6個(gè)月5、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶2018
01-032018
01-032018
01-03實(shí)用哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)(下)
細(xì)胞培養(yǎng)所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒清洗在組織細(xì)胞培養(yǎng)中,體外細(xì)胞對(duì)任何有害物質(zhì)都非常敏感。微生物產(chǎn)品附帶雜物,上次細(xì)胞殘留物及非營(yíng)養(yǎng)成分的化學(xué)物質(zhì),均能影響培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)。因此對(duì)新使用玻璃器皿和重新使用的培養(yǎng)器皿都要嚴(yán)格*的清洗,且要根據(jù)器皿的組成材料不同,選擇不同的清洗方法。玻璃器皿的清洗組織細(xì)胞培養(yǎng)中,使用量zui大的是玻璃器皿,故工作zuizui大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和沖洗四個(gè)步驟。清洗后的玻璃器皿不僅要求干凈透明無(wú)油跡,而且不能殘liu任何物質(zhì)。2018
01-03實(shí)用哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)(中)
細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境1、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)是一種無(wú)菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無(wú)煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無(wú)菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。2、常用設(shè)施及設(shè)備(1)超凈工作臺(tái):也稱凈化工作臺(tái),分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。(2)無(wú)菌操作間:一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺(tái)及二氧化碳培養(yǎng)箱、2018
01-03實(shí)用哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)(上)
細(xì)胞培養(yǎng)基本概念細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下,使其生長(zhǎng)繁殖,并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個(gè)細(xì)胞,也可以是細(xì)胞群。細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途1、科學(xué)研究:藥物研究開(kāi)發(fā)與基礎(chǔ)研究藥物研究與開(kāi)發(fā)(1)新藥篩選:如化學(xué)合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。(2)疫苗研究與開(kāi)發(fā):如病毒性疫苗的研究與開(kāi)發(fā)(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。(3)基因工程藥物研究與開(kāi)發(fā):如干擾素研究與開(kāi)發(fā),細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究與開(kāi)發(fā)等。(4)細(xì)胞工程藥物研究與2018
01-02細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題解答
1.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊?,MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開(kāi)始。2.何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可3.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活。4.可否使用與原先培養(yǎng)2018
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