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上海遠慕生物科技有限公司
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無血清細胞培養(yǎng)基與血清細胞培養(yǎng)基哪個性價比高?2023/08/18
無血清細胞培養(yǎng)基與血清細胞培養(yǎng)基哪個好?很難用一句話來說。但可以從幾個方面分別比較。跟著遠慕生物一起了解一下吧。1.產(chǎn)品性能方面無血清培養(yǎng)基更好。血清并不是生來就為養(yǎng)細胞而來的。血清是全血的一部分,組分很復(fù)雜,有150多種已知組分組分,多種未知組分。這些組分中,有些對細胞生長是有利的,有些對細胞生長是無作用的,有些對細胞生長反而是有害的。另外,不同的牛,由于其體質(zhì)不同,其血清中各種組分的差異很大。比如血清中的EGF,有的含量為10ug/ml,有的僅為2ug/ml,相差了5倍。有時你用的血清不好用
配制培養(yǎng)基需要遵循的原則2023/08/18
微生物的培養(yǎng)基通常指人工配制的適合微生物生長繁殖,或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。廣義上說,凡是支持微生物生長繁殖的介質(zhì)或材料,均可作為微生物的培養(yǎng)基。一個適當?shù)呐囵B(yǎng)基配方,對發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量有著極大的影響。針對不同微生物,不同的營養(yǎng)要求,可以有不同的培養(yǎng)基。但它們的配制必須遵循一定原則。①營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)滿足微生物的需要。不同營養(yǎng)類型的微生物對營養(yǎng)的需求差異很大,應(yīng)根據(jù)菌種對各營養(yǎng)要素的不同要求進行配制。②營養(yǎng)物的濃度及配比應(yīng)恰當。營養(yǎng)物濃度太低,不能滿足微生物生長的需要;濃度太高,又會抑制微生物生長
細胞融合的三種方法介紹2023/08/17
細胞融合的方法有三種:生物方法、化學方法、物理方法。一、細胞融合也稱細胞雜交,是指細胞通過介導(dǎo)和培養(yǎng),在離體條件下用人工方法將不同種的細胞通過無性方式融合(合并)成一個核或多核的雜合細胞的過程。體細胞融合后可形成四倍體或多倍體細胞,由此形成的雜交細胞,其特性會有很大的變化。二、化學誘導(dǎo)融合1.鹽類融合法。此法是應(yīng)用最早的誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法。鹽類融合劑對原生質(zhì)體的破壞小。今后研究應(yīng)提高其融合率,使其對液泡化發(fā)達的原生質(zhì)體能夠誘發(fā)融合。2.高鈣和高pH值融合法。高Ca2+和高pH值可以誘發(fā)融合。
實驗室細胞株的構(gòu)建問題解答!2023/08/17
1、什么是瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染?瞬時轉(zhuǎn)染:外源片段的表達時間短暫。這主要是因為外源導(dǎo)入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低,所以以染色體外(episomal)形式存在,不能隨細胞分裂而一同復(fù)制導(dǎo)致最后拷貝數(shù)被稀釋導(dǎo)致的。而且考慮到細胞分裂會稀釋質(zhì)粒的量,所以起初轉(zhuǎn)染的質(zhì)??截悢?shù)極ji高。這就導(dǎo)致瞬時轉(zhuǎn)染呈現(xiàn)一個高拷貝到低拷貝迅速降低的過程,且無法在這個系統(tǒng)上實現(xiàn)可誘導(dǎo)表達。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染:是相對瞬時轉(zhuǎn)染而言,進入細胞的質(zhì)粒整合入細胞基因組中,并能隨細胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。在這個系統(tǒng)中,質(zhì)粒表達穩(wěn)定,拷貝數(shù)
蛋白標準品(Marker)知識匯總2023/08/16
蛋白Marker可分為:一、未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;二、預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。在westernblot過程中,分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節(jié),然而就是這樣一個小細節(jié)對實驗結(jié)果有著不可忽視的作用。這個WesternBlot參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應(yīng)的分子量大小,只有標準量精確無誤了,實驗結(jié)果才有說服力,除此之外,蛋白標準還有表示轉(zhuǎn)移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用,所以選擇正確
標準物質(zhì)的作用與定義介紹2023/08/16
標準物質(zhì)的定義1.標準物質(zhì):具有一種或多種足夠均勻和很好地確定了的特性值,用以校準設(shè)備,評價測量方法或給材料賦值的材料或物質(zhì)。標準物質(zhì)是一種計量標準,都具有標準物質(zhì)證書,對每個標準值都具有給定置信水平的不確定度。2.一級純度標準物質(zhì):代號為GBW,是指采用絕對測量方法或其它準確、可靠的方法測量其特性值,測量準確度達到國內(nèi)外最gao水平的有證標準物質(zhì),主要用于研究與評價標準方法,對二級標準物質(zhì)定值。3.二級純度標準物質(zhì):代號為GBW(E),是指采用準確可靠的方法、或直接與一級標準物質(zhì)相比較的方法定
【實驗操作】少量標準品的稱量和溶解2023/08/15
請根據(jù)已有的方法或者物質(zhì)的相關(guān)理化性質(zhì)選擇合適溶劑。不適當?shù)娜軇┛赡茉斐蔁o法溶解或者產(chǎn)品降解。一、當樣品量非常少時,如何從瓶子中獲取所有的純物質(zhì)呢?有些標準品非常昂貴,廠商只能以非常小的包裝提供給客戶,如1mg5mg10mg等,拿到產(chǎn)品時可能會覺得瓶子是空的,這種情況是由于粉末狀的物質(zhì)會分散在瓶壁和蓋子上,而液體狀物質(zhì)會在瓶壁形成一層可能看不見的液層。可根據(jù)具體的實際情況,按照以下操作來獲取瓶內(nèi)所有產(chǎn)品:1、擦拭瓶外壁和蓋子,等其晾干。2、稱量整個瓶子,記錄數(shù)據(jù),精確至0.1mg。3、用合適的溶
校準品、標準品和質(zhì)控品的區(qū)別分析2023/08/15
一、定義上的區(qū)別1、校準品:用于定量檢測時對檢測項目的校準,是具有在校準函數(shù)中用作獨立變量值的參考物質(zhì)。一般包含2個到多個濃度水平。2、質(zhì)控品:用于檢查分析儀器或方法的性能,是一種穩(wěn)定的物質(zhì),用于驗證分析儀器或方法的性能。3、標準品:具有確定特性量值,用于評價測定方法的物質(zhì)。包括國家參考品和企業(yè)內(nèi)部參考品,可用于主要原材料的質(zhì)量控制、生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的確定研究、產(chǎn)品放行、注冊檢驗、監(jiān)督抽驗等。二、是否都需要注冊1、校準品:一般可與配合試劑合并申請注冊,也可單獨申請注冊;2、質(zhì)控品:一般可與配合
瓊脂糖凝膠中DNA的回收(DEAE-纖維素膜電泳)2023/08/14
實驗方法原理從瓊脂糖凝膠回收DNA是通過電泳至帶正電荷的DEAE-纖維素膜上完成的。這種方法首先利用適當濃度的瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段,然后緊靠目的DNA片段條帶前方切一裂縫。將一長條DEAE纖維素膜插入裂縫。實驗材料限制性內(nèi)切核酸酶DNA樣品DNA標準RNA試劑、試劑盒乙酸銨DEAE高鹽洗脫緩沖液DEAE低鹽洗脫緩沖液EDTA乙醇凝膠載樣緩沖液NaOH酚氯/仿醋酸鈉TE儀器、耗材瓊脂糖凝膠DEAE纖維素膜手提式長波紫外燈水浴實驗步驟一、材料1.緩沖液和溶液乙酸銨(10mol/L)DEAE高
纖維素酶的基本信息和功能特點2023/08/14
纖維素酶(英文:cellulase)是酶的一種,在分解纖維素時起生物催化作用。是可以將纖維素分解成寡糖或單糖的蛋白質(zhì)。纖維素酶廣泛存在于自然界的生物體中。細菌、真菌、動物體內(nèi)等都能產(chǎn)生纖維素酶。一般用于生產(chǎn)的纖維素酶來自于真菌,比較典型的有木霉屬(Trichoderma)、曲霉屬(Aspergillus)和青霉屬(Penicillium)。產(chǎn)生纖維素酶的菌種容易退化,導(dǎo)致產(chǎn)酶能力降低。細菌產(chǎn)纖維素酶的產(chǎn)量較少,主要是葡聚糖內(nèi)切酶,大多數(shù)對結(jié)晶纖維素無降解活性,且所產(chǎn)生的酶多是胞內(nèi)酶或吸附在細胞壁
菌落總數(shù)的常規(guī)檢驗方法2023/08/11
菌落總數(shù)的常規(guī)檢驗基本操作一般包括:樣品的稀釋——傾注平皿——培養(yǎng)48(24)小時——計數(shù)報告。(一)樣品的處理和稀釋1、操作方法(1)以無菌操作取檢樣25g(或25mlL),放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)預(yù)置適當數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振要或研磨制成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后,最好置滅菌均質(zhì)器中以8000~10000r/min的速度處理1min,制成1:10的均勻稀釋液。(2)用1ml滅菌吸管或吸頭吸取1:10稀釋液1mL,沿管壁徐徐注入
微生物實驗室廢棄物處理流程2023/08/11
1.目的規(guī)范實驗室的消毒滅菌工作,確保實驗器材和廢棄物品的安全處理,避免實驗室污染物對實驗室工作人員、環(huán)境和公眾造成危害。2.適用范圍適用于從事微生物實驗活動的實驗室,實驗器材和廢棄物品處理的控制。3.消毒程序及方法3.1室內(nèi)空氣的消毒使用潔凈室/陽性菌前后用紫外線燈照射對室內(nèi)空氣消毒,照射時間≥30鐘,并填寫《潔凈室/陽性菌使用記錄表》。3.2表面的消毒3.2.1地面消毒實驗室地面可用0.2%~0.5%的消毒劑噴灑,噴灑消毒劑的用量不得100ml/m2。3.2.2物體表面消毒實驗室臺面、桌椅、
緩沖溶液的意義與作用原理2023/08/10
什么是緩沖溶液能夠抵抗少量外加強酸強堿或稀釋的影響,而保持溶液本身的pH值相對穩(wěn)定的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液通常由濃度較大的'共軛酸堿對的混合物組成,組成緩沖溶液的共軛酸堿對又稱為緩沖對。緩沖溶液的意義分析測試中,在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個范圍內(nèi),以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等,這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達到的,所以緩沖溶液是分析測試中經(jīng)常需要的一種試劑。緩沖溶液對維持著人體正常的血液pH范圍。其中碳酸-碳酸氫鈉是血漿中最主要的緩沖對,此對緩沖
蛋白酶抑制劑混合物使用方法2023/08/10
蛋白酶抑制劑混合物(100×,哺乳動物樣品提取用)規(guī)格:1ml/5×1ml儲存條件:-20℃保存,有效期一年。產(chǎn)品簡介蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用,100×)(Proteaseinhibitorcocktailformammaliancellandtissueextracts,100×)是一種用于哺乳動物細胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物(100mMAEBSF,80μMAprotinin,5mMBestatin,1.5mME64,2mMLeupeptinand1mMPepstati
幾種常用的免疫學技術(shù)知識簡介2023/08/09
免疫學技術(shù):是指在免疫學長期發(fā)展過程中形成的一套獨du特的研究手段和計數(shù),包括人工免疫防治技術(shù)(疫苗和血清)和免疫檢測技術(shù)(抗原抗體檢測和機體免疫功能檢測)免疫學研究涉及到的重要技術(shù)包括:單克隆抗體技術(shù)、T細胞克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)基因及基因編輯技術(shù)、分子雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)等。常用的免疫學技術(shù):1.免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)是利用熒光素標記的抗體(或抗原)檢測組織、細胞或血清中的相應(yīng)抗原(或抗體)的方法.由于熒光抗體具有安全、靈敏的特點,因此已廣泛應(yīng)用在免疫熒光檢測和流式細胞計數(shù)領(lǐng)域.根據(jù)熒光素標記
選用標準物質(zhì),這些問題要注意!2023/08/09
標準物質(zhì)對于實驗室的小伙伴來說都不陌生,幾乎是每天的必bi用物質(zhì)。它在實驗中起到的作用自是無須贅述,是準確定性定量的關(guān)鍵。那么,如何選擇合適、純度高的標準物質(zhì)呢?在選擇過程中都會遇到哪些問題呢?首先,什么標準物質(zhì)?標準物質(zhì)referencematerial:是一種已經(jīng)確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料,作為分析測量行業(yè)中的"量具",在校準測量儀器和裝置、評價測量分析方法、測量物質(zhì)或材料特性值和考核分析人員的操作技術(shù)水平,以及在生產(chǎn)過程中產(chǎn)品的質(zhì)量控制等領(lǐng)域起著不可ke或缺的作用。Q
滴定分析法之溶液制備要求2023/08/08
滴定分析用標準溶液的制備,一般要求的內(nèi)容,依據(jù)GB/601-2002中的12條規(guī)定:1.試劑純度:分析純以上:2.實驗用水:至少應(yīng)符合GB/T6682中三級水的規(guī)格;3.配制標準物質(zhì)時的溫度:是指20℃時的溫度;4.分析天平、滴定管、容量瓶和移液管,均需定期校正;5.標定使用時的滴定速度,一般應(yīng)保持在6~8ml/min;6.稱量基準試劑的質(zhì)量:質(zhì)量小于0.5g,按精確至0.01mg稱量;質(zhì)量大于0.5g,按精確至0.1mg稱量;7.制備時的濃度值范圍:應(yīng)在規(guī)定濃度值的±5%范圍以內(nèi);8.標定標準
總磷、有機磷、無機磷的區(qū)別介紹2023/08/08
1.總磷a)指水體中磷元素的總含量,一般包涵正磷酸鹽、焦磷酸鹽、偏磷酸鹽、亞磷酸鹽和有機團結(jié)合的磷酸鹽等。b)主要來源為生活污水、化肥、有機磷農(nóng)藥及近代洗滌劑所用的磷酸鹽增潔劑等。2.有機磷a)指含有碳-磷鍵的有機化合物,有機磷化學即是研究有機磷化合物性質(zhì)和反應(yīng)的有機化學分支。磷元素與氮同族,具有類似的價電子層結(jié)構(gòu),因此有機磷化合物的性質(zhì)與有機含氮化合物有些相似。b)通俗理解,有機一般如下:焦磷酸鹽、偏磷酸鹽、亞磷酸鹽、次ci磷酸鹽。除磷劑無法去除有機磷,需要做強氧化等預(yù)處理等工序,目前是行業(yè)內(nèi)
免疫組化常見問題的解決方法2023/08/07
當免疫組化染色沒有出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果時,應(yīng)系統(tǒng)地查找原因,而每一次只能排除一種可能的原因。對照/標本無染色①確認是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②確認所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時間。③對照抗體的標簽確認是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點是非常重要的。比如,如果一抗是兔來源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。④檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。⑤檢查
微生物培養(yǎng)基中蛋白胨的應(yīng)用方法2023/08/07
蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑,濃縮干燥而成的淺黃色粉末,具有色淺、易溶、透明、無沉淀等良好物理性狀??膳渲聘鞣N微生物培養(yǎng)基。一般來說,用于蛋白胨生產(chǎn)的蛋白包括動物蛋白(酪蛋白、肉類)和植物蛋白(豆類)兩種。蛋白胨當中不僅含有豐富的氨基酸,特別是含硫氨基酸較多,而且含有更多的細菌生長需要的維生素和其它生長因子。是生物制藥發(fā)酵及各種培養(yǎng)基制備的基礎(chǔ)原材料。在培養(yǎng)基當中它起的主要作用是提供氮源。蛋白胨的用途:實驗室用作培養(yǎng)基,培養(yǎng)細菌。食品中用作提高蛋白含量。用于飼料中顯著降低了飼料廠的生產(chǎn)成本,是
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