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試劑純、分析純、色譜純有什么區(qū)別2022/10/14

實驗室試劑--中國國家標準（GB）中一般試劑劃分標準在中國國家標準(GB)中,將一般試劑劃分為3個等級:一級試劑為優(yōu)級純,二級試劑為分析純,三級試劑為化學(xué)純。定級的根據(jù)是試劑的純度(即含量)、雜質(zhì)含量、提純的難易,以及各項物理性質(zhì)。有時也根據(jù)用途來定級,例如光譜純試劑、色譜純試劑,以及pH標準試劑等等。試劑純、分析純、色譜純有什么區(qū)別區(qū)別在于色譜純的試劑雜質(zhì)比分析純的更少，分析純比色譜純的少。試劑純：是指一般化學(xué)試驗用的，有較少的雜質(zhì)，不妨礙實驗要求。分析純：是指做分析測定用的試劑，雜質(zhì)更少，不

標準物質(zhì)定義、分級、編號及量值的溯源體系2022/10/13

標準物質(zhì)是保證準確量值和量值溯源的計量標準，它廣泛應(yīng)用于校準測量儀器、評價測量方法、賦予材料特性量值。在質(zhì)量管理、質(zhì)量保證、技術(shù)仲裁等方面起著重要作用。標準物質(zhì)定義、分級、編號及量值的溯源體系⑴定義有證標準物質(zhì)是經(jīng)權(quán)/威部門認證的標準物質(zhì)，其一種或多種特性量值通過建立了溯源性的程序確定，并可溯源到準確復(fù)現(xiàn)表示該特性量值的計量單位。我國有證標準物質(zhì)由國家標準計量主管部門批準、頒布并授權(quán)生產(chǎn)。⑵分級我國將標準物質(zhì)分為一級和二級，它們都符合有證標準物質(zhì)的定義。一級標準物質(zhì)(PrimaryReferen

遠慕解析高純試劑以及高純試劑分類2022/10/13

純度遠高于優(yōu)級純的試劑叫做高純試劑。是在通用試劑基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，是為了專門的使用目的而用特殊方法生產(chǎn)的純度最高的試劑。高純試劑控制的是雜質(zhì)項含量，基準試劑控制的是主含量，基準試劑可用標準溶液的配制，但高純試劑不能用于標準溶液的配制（單質(zhì)氧化物除外）。目前在國際上也無統(tǒng)一的明確規(guī)格，我國除對少數(shù)產(chǎn)品制定了國家標準外，大部分高純試劑的質(zhì)量標準還很不統(tǒng)一，在名稱上也有高純、超純、特純、光譜純、電子純等不同叫法。一般以9來表示產(chǎn)品的純度。故在規(guī)格欄中標以2個9、3個9、4個9以此類推，根據(jù)這個原則可將

定量Western Blot內(nèi)參質(zhì)控的掌握技巧2022/10/13

WesternBlot是生物修煉的一大實驗，現(xiàn)在不做定量WesternBlot，都不敢自詡學(xué)霸的了，暗暗擦汗的有沒有？在討論如何從WesternBlot中獲得定量數(shù)據(jù)之前，先定義一下我們所說的“定量”是什么意思是非常有用的，何為定量，必須符合下列準則：使用一個定義的過程進行檢測，即WesternBlot。這個過程產(chǎn)生一個可重復(fù)的結(jié)果，即是精確度。測量反映了一個“真實”的結(jié)果，即是準確度。定量WesternBlot除了需要進行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上樣電泳、轉(zhuǎn)膜、靶蛋白抗體孵育、顯色等步驟以

如何分辨抗體是磷酸化還是非磷酸化2022/10/13

磷酸化和非磷酸化的抗體主要區(qū)別有：1.磷酸化抗體的檢測的是出于活性狀態(tài)（磷酸化）的蛋白。2.磷酸化抗體只針對磷酸化位點設(shè)計，是一種位點特異性的多抗，這到有些單抗的特性。3.普通抗體的合成（多抗）：原核表達蛋白-〉純化-〉免疫動物-〉收獲抗體。4.磷酸化抗體合成：人工合成含磷酸化位點的多肽-〉人工體外磷酸化-〉鏈接半抗原-〉免疫動物-〉收獲抗體。5.磷酸化的蛋白很大部分是轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子。因此使用磷酸化抗體和普通抗體。檢測同一個蛋白，原位檢測可能具有不同的細胞定位。轉(zhuǎn)錄因子磷酸化后由細胞質(zhì)進入細胞核。

菌落繁殖為何會連成一片？2022/10/12

菌落總數(shù)檢測1、為什么平板計數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH？由于大部分細菌是嗜中性的，培養(yǎng)基為符合細菌生長要求，需要調(diào)節(jié)pH至7.0±0.2，盡量保證較適宜的環(huán)境，確保檢測結(jié)果的準確性。2、如何保證檢測結(jié)果的有效性？設(shè)計空白對照（1）檢驗過程中需要做空白對照，用來判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染，完/美的空白試驗平板上應(yīng)該無細菌生長。實驗環(huán)境要求（2）定期檢測空氣潔凈度，判斷實驗環(huán)境是否符合標準要求。滅菌處理（3）細菌檢測過程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經(jīng)過滅菌程序。3、如何提高檢測結(jié)果的準確性

多重疫情下實驗室生物安全如何保證？2022/10/12

生物安全長期存在于人類發(fā)展的歷史長河中。無論是瘋牛病、埃博拉、新冠等重大疫情給我們帶來的健康威脅，還是一場非洲豬瘟對肉價和市場供應(yīng)的影響，亦或于20世紀戰(zhàn)爭中出現(xiàn)的細菌戰(zhàn)，都與生物安全息息相關(guān)。生物安全是國家安全的重要組成部分，其中實驗室生物安全是生物安全的重要內(nèi)容之一，是從事檢驗工作的相關(guān)機構(gòu)或單位實行實驗室管理的重中之重。什么是實驗室生物安全？根據(jù)《病原微生物實驗室生物安全通用準則》的定義，實驗室生物安全是指實驗室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實驗室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到

微生物操作中常見問題的討論與分析2022/10/12

微生物操作中常見問題的討論與分析1、劃線獲得單個菌落的方法。劃不出單個菌落的原因：(1)平板上有過多的水分；(2)劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒；(3)多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線。2、涂布和傾注的區(qū)別：涂布利于觀察，但由于涂布棒上會帶有少量的菌液，可能影響計數(shù)的準確性；傾注更為準確，但不利于觀察菌落的狀態(tài)。3、培養(yǎng)基配制時應(yīng)注意的問題：(1)滅菌溫度要嚴格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過高會導(dǎo)致糖分焦化，影響質(zhì)量；(2)瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分；

直接免疫熒光法和間接免疫熒光法簡介2022/10/12

免疫熒光技術(shù)是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)與相應(yīng)抗體（或抗原）以化學(xué)的方法結(jié)合，將熒光標記抗體（或抗原）與標本中相應(yīng)的抗原結(jié)合形成熒光標記的抗體-抗原復(fù)合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復(fù)合物的存在，根據(jù)已知的抗體（或抗原）即可推知另一個未知抗原（或抗體）的存在。1.直接免疫熒光法直接免疫熒光法是利用熒光色素標記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合，以鑒定未知抗原。本法具有操作簡單、時程短、特異性高的優(yōu)點，但也存在

冷凍樣本真的不適合做單細胞測序嗎？2022/10/11

“單細胞測序”可以說是這幾年的一個熱門詞匯，越來越多的研究者在自己的研究中用到這項技術(shù)，大家都知道目前單細胞測序不管是哪個平臺，基本還是需要新鮮的活體組織樣本，這對于很多研究者來說是難以做到的，雖然目前也有單細胞核測序技術(shù)來解決新鮮組織難以獲取，或者是一些特殊組織樣本難以用活細胞上機的困境，但是很多老師還是擔(dān)心：冷凍樣本會不會不適合單細胞測序呢？冷凍樣本獲得的數(shù)據(jù)質(zhì)量會不會不如新鮮樣本呢？真相來了，新的文章研究表明：人類癌癥樣本的冷凍保存可保留腫瘤異質(zhì)性，用于單細胞多組學(xué)分析。高通量單細胞RNA

什么是引物？如何溶解和保存引物？2022/10/11

什么是引物？引物（primer），是一小段單鏈DNA或RNA，作為DNA復(fù)制的起始點，在核酸合成反應(yīng)時，作為每個多核苷酸鏈進行延伸的出發(fā)點而起作用的多核苷酸鏈，在引物的3′-OH上，核苷酸以二酯鏈形式進行合成，因此引物的3′-OH，必須是游離的。如何溶解引物？干燥后的引物質(zhì)地非常疏松，開蓋前最好瞬時離心一下，或管垂直向上在桌面上敲敲，將引物粉末收集到管底。根據(jù)計算出的體積加入去離子無菌水或TE(pH8.0)緩沖液，室溫放置幾分鐘，振蕩助溶，離心將溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸餾水，因

ELISA、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項2022/10/11

ELISA取樣及運輸注意事項一、血清提取方法：1.全血促凝管取血，輕輕顛倒兩三次，放置片刻讓全血凝固，凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。2.全血普通EP管取血，室溫放置2h左右，讓其凝固，凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。特別注意：取血清避免震蕩，以防止溶血，溶血會對結(jié)果有影響。二、樣本取量及運輸每個指標做單孔檢測，一個樣本需取血清30ul，3個復(fù)孔需90ul，冰盒-20度中短時運輸（小鼠建議采取摘眼球取血，如果血樣有限在試驗方案允許的前提下可以取多只小鼠血樣混合）。三、樣本

各種血液樣品的保存方法和保存期2022/10/11

1、全血儲存溫度：2℃～6℃。保存期：含ACD-B、CPD血液/保存液的全血保存期為21d；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液/保存液的全血保存期35d。使用其他血液/保存液時，按其說明書規(guī)定的保存期執(zhí)行。2、去白細胞全血儲存溫度：2℃～6℃。保存期：同1去白細胞全血應(yīng)在血液采集后48h內(nèi)去除白細胞。3、濃縮紅細胞儲存溫度：2℃～6℃。存期：同14、去白細胞濃縮紅細胞儲存溫度：2℃～6℃。保存期：同15、懸浮紅細胞儲存溫度：2℃～6℃。保存期：紅細胞/保存液為ACD-B、CPD的懸浮紅細胞保存期為2

了解這些知識，養(yǎng)好細胞不是事兒！2022/10/10

抗體藥物是目前生物技術(shù)藥物研究中活躍的領(lǐng)域，特別是在腫瘤和自身免疫性疾病等方面的臨床應(yīng)用，更是大放異彩。隨著臨床需求的增加，單克隆抗體藥物發(fā)展迅速，F(xiàn)DA已批準的抗體藥物多達70多個，抗體藥物銷售量年增長率基本在10%以上，大大高于制藥行業(yè)平均水平，其市場規(guī)模已經(jīng)達到千億美元。我國針對單克隆抗體藥物的研究與開發(fā)也是如火如荼，行業(yè)內(nèi)競爭異常激烈。據(jù)統(tǒng)計我國生物類似藥研發(fā)占全球在研類似藥總數(shù)的36%。目前，我國約有600家企業(yè)在抗體藥物領(lǐng)域布局，約有200家企業(yè)已提交抗體藥物臨床試驗申請，且靶點比較

提取RNA時如何去除DNA的污染2022/10/10

提取RNA時如何去除DNA的污染的方法：注意實驗室的標準化問題，注意污染的存在，同時嚴格按照說明書上的操作應(yīng)該沒有問題。發(fā)現(xiàn)DNA污染，用DNAseI消化1小時，37度離心取上清的時候，一定要小心不要取到中間的膜和下面的液體。直接加NaOH溶液與提取液混合攪拌,然后離心就可以了.因為RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,離心后的上清液就不含有DNA了。RNA提取步驟：1.勻漿處理：①組織將組織在液氮中磨碎，每50-100mg組織加入1mlTRIzol，用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過T

細胞轉(zhuǎn)染如何提高實驗效率？2022/10/10

【組織培養(yǎng)試劑】一般提示：優(yōu)化您的細胞生長條件。只使用新鮮配制的培養(yǎng)基和添加劑，并經(jīng)可能減少所用試劑的變更。基礎(chǔ)培養(yǎng)基—目前所使用的各種市售培養(yǎng)基(如，RPMI1640和DMEM)。培養(yǎng)基的成分包括營養(yǎng)物質(zhì)(氨基酸，葡萄糖)，維生素，無機鹽，和緩沖物質(zhì)。有些成分非常不穩(wěn)定，因此如果不在使用時新鮮加入就可能會產(chǎn)生問題。務(wù)必要使培養(yǎng)基避光保存。因為已知有一些組分和緩沖物質(zhì)，如HEPES，當暴露于光照下就會分解產(chǎn)生細胞毒性物質(zhì)。酚紅試劑可保護細胞免受一些HEPES降解所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)，但在使用未加酚紅

分不清轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)化？遠慕解析轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)化區(qū)別！2022/10/10

轉(zhuǎn)染的定義是“將具生物功能的核酸轉(zhuǎn)移或運送到細胞內(nèi)并使核酸在細胞內(nèi)維持其生物功能”。其中，核酸包括DNA（質(zhì)粒和線性雙鏈DNA），反義寡核苷酸及RNAi（RNAinterference）?；蜣D(zhuǎn)染技術(shù)已廣泛應(yīng)用于基因組功能研究（基因表達調(diào)控，基因功能，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和藥物篩選研究）和基因治療研究?；蜣D(zhuǎn)染需要一定的轉(zhuǎn)染試劑將帶有目的基因的載體運送到細胞內(nèi)。早期的磷酸鈣轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染效率很低，且對很多細胞株無效，因此不能滿足很多科研工作的需要。目前，最/常用的轉(zhuǎn)染試劑是陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物，它們在克服

胰酶的使用注意事項以及配置方法2022/10/10

胰酶使用注意：1、在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。2、胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。貼壁細胞的消化：1、吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清2、加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細胞消化時間有所不同）3、顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細胞發(fā)

蛋白酶抑制劑混合物使用注意事項2022/10/09

蛋白酶抑制劑混合物（100×，哺乳動物樣品提取用）儲存條件：-20℃保存，有效期一年。蛋白酶抑制劑混合物產(chǎn)品簡介蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用,100×)(Proteaseinhibitorcocktailformammaliancellａndtissueextracts,100×)是一種用于哺乳動物細胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物(100mMAEBSF,80μMAprotinin,5mMBestatin,1.5mME64,2mMLeupeptinand1mMPepstatinAi

如何區(qū)別動物細胞培養(yǎng)基？培養(yǎng)基的分類了解一下！2022/10/09

細胞培養(yǎng)基（cellculturemedium）是人工模擬動物細胞的體內(nèi)生長環(huán)境，維持體外細胞存活和增殖的營養(yǎng)物質(zhì)基礎(chǔ)，其主要功能是為細胞提供適宜的pH和滲透壓，以及細胞本身不能合成的各種營養(yǎng)物質(zhì)。本文將對細胞培養(yǎng)基的種類、成分及理化性質(zhì)，以及相關(guān)問題等方面進行介紹。細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡/鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。1.1平衡/鹽溶液（balancedsaltsolution，BSS）B