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上海遠慕生物科技有限公司
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血清沉淀怎么辦?遠慕教你正確處理方法!2022/06/27
明明是一瓶優(yōu)質(zhì)的血清偏偏出現(xiàn)沉淀,和血清質(zhì)量有關(guān)嗎?會影響細胞培養(yǎng)嗎?如何避免沉淀?出現(xiàn)沉淀如何處理?血清沉淀,其實屬于常見現(xiàn)象,并不會影響血清的品質(zhì),大家不必驚慌!但很多人對這一現(xiàn)象還不是很了解。我們對“血清沉淀”的幾個常見問題進行了總結(jié),供廣大科研青年參考。血清沉淀是什么?血清中經(jīng)常會出現(xiàn)肉眼可見的沉淀,其成分有多種類型,產(chǎn)生的原因有很多,主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。1.纖維蛋白(Fibrin)血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產(chǎn)過程中,血清采集、過濾(3次0.1μ
實驗室分析方法--定量分析方法的對比分析2022/06/24
1)標(biāo)準(zhǔn)曲線法要求:①A與c是一條直線或近似一條直線關(guān)系②測量過程中,要求儀器的工作狀態(tài)及測量條件保持一致。③樣品濃度cx應(yīng)落在線性范圍內(nèi)④標(biāo)準(zhǔn)溶液與試樣組成相似2)標(biāo)準(zhǔn)對照法要求:①A與c是一條過原點或近似過原點的直線關(guān)系:A=a+bc要求a=0②測量過程中,要求儀器的工作狀態(tài)及測量條件保持一致。③樣品濃度cx應(yīng)落在線性范圍內(nèi),c樣與c標(biāo)盡量接近④標(biāo)準(zhǔn)溶液與試樣組成相似。3)吸光系數(shù)法要求:①A與C是一條過原點或近似過原點的直線關(guān)系②要測量或能查到百分吸收系數(shù)或吸收系數(shù)③要求單色光,對儀器要求
什么是定性分析與定量分析?2022/06/24
一、定性分析定性分析就是對研究對象進行“質(zhì)”的方面的分析。具體地說是運用歸納和演繹、分析與綜合以及抽象與概括等方法,對獲得的各種材料進行思維加工,從而能去粗取精、去偽存真、由此及彼、由表及里,達到認(rèn)識事物本質(zhì)、揭示內(nèi)在規(guī)律。定性分析主要是解決研究對象“有沒有”“是不是”的問題,定性研究分為三個過程:1、分析綜合2、比較3、抽象和概括二、定量分析定量分析:對社會現(xiàn)象的數(shù)量特征、數(shù)量關(guān)系與數(shù)量變化的分析。其功能在于揭示和描述社會現(xiàn)象的相互作用和發(fā)展趨勢。定性——用文字語言進行相關(guān)描述;定量——用數(shù)學(xué)
遠慕為大家介紹檢測抗原的三種方法2022/06/24
1.雙抗體夾心法:屬于非競爭結(jié)合,檢測抗原最/常用的方法,檢測含有至少兩個抗原決定簇的多價抗原。原理是先將特異性抗體與固相載體連接;加入待測標(biāo)本,形成固相抗原抗體復(fù)合物;再加入酶標(biāo)抗體形成雙抗體夾心,洗滌;加底物顯色,根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行該抗原的定性或定量檢測。如血清標(biāo)本中有類風(fēng)濕因子(RF)存在,則可出現(xiàn)假陽性反應(yīng),因為RF是一種抗變性IgG的自身抗體,它能與多種動物的變性IgG的Fc部分結(jié)合,因此RF就可作為固相抗體和酶標(biāo)抗體之間的橋接抗原。雙抗體夾心法只適用于二價或以上的較大分子抗原的測
超抗原與普通抗原有何區(qū)別?2022/06/24
超抗原(superantigen,SAg)是一類只需極低濃度(≤10-9M)即可激活大量的T細胞克隆,產(chǎn)生極/強免疫應(yīng)答的物質(zhì)。超抗原與普通抗原相比,不需要常規(guī)的細胞內(nèi)抗原提呈,無MHC限制性。超抗原一端與APC表面的MHC-Ⅱ類分子抗原結(jié)合槽外的非多態(tài)區(qū)結(jié)合,一端與TCR的Vβ外側(cè)區(qū)結(jié)合,通過這兩種結(jié)合,活化T細胞。超抗原分類SAg為一類多克隆激活劑。目前超抗原按照活化細胞的不同,可分為T細胞超抗原和B細胞超抗原,又按照其來源不同分別將T、B細胞超抗原分為內(nèi)源性超(病毒型)抗原和外源性(細菌型
做HPLC分析時,遇到溶劑效應(yīng)現(xiàn)象咋辦?2022/06/23
做過HPLC的朋友都知道一句話:用流動相溶解樣品(等度洗脫),或者是用初始流動相比例溶解樣品(梯度洗脫)。為什么要這么做呢?我們先來看一個列子:當(dāng)用100%的乙腈來溶解樣品上機時,峰1出現(xiàn)分叉、展寬,峰2未分叉。當(dāng)換成用流動相來溶解樣品時,峰1和峰2的峰形都不分叉,峰形較好。是什么原因?qū)е逻@種現(xiàn)象發(fā)生的呢?那就是溶解效應(yīng)造成的。溶劑效應(yīng):就是指樣品溶液的溶劑強度強于流動相溶劑強度時可能會造成的峰展寬、峰分叉現(xiàn)象。通常表現(xiàn)為色譜圖上較早洗脫的峰前沿或者開叉,與此同時較晚洗脫的峰則較為正常的現(xiàn)象。例
原料藥含量測定選擇HPLC法or滴定法?2022/06/23
看到有關(guān)于兩種方法用于含量測定的些許疑問,今天遠慕摘錄了很多網(wǎng)友的不同意見。一般建議依照方法的便利性、可重復(fù)性來選擇適合的方法。再具體點呢?到底如何選擇,哪種方法優(yōu)勢更甚?都分別有哪些劣勢?大家都更傾向于哪種?一起來看看下文各位實驗人的七嘴八舌,你心中是否能夠得到一份答案呢!網(wǎng)友A:現(xiàn)在看來,大家普遍認(rèn)為滴定法精密度高,專屬性差;HPLC法精密度和專屬性均可,但需要好的對照品。各有優(yōu)劣。網(wǎng)友B:如果從準(zhǔn)確度的角度來說,我選HPLC。就算雜質(zhì)不多,大部分都保留著滴定基團,比如高氯酸滴定時的胺基,但
有機溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的主要原因2022/06/23
1)蛋白質(zhì)沉淀原因:加入高濃度的中性鹽、加入有機溶劑、加入重金屬、加入生物堿或酸類、熱變性少量的鹽(如硫酸銨、硫酸鈉等)能促進蛋白質(zhì)的溶解。如果向蛋白質(zhì)水溶液中加入濃的無機鹽溶液,可使蛋白質(zhì)的溶解度降低,而從溶液中析出,這種作用叫做鹽析.這樣鹽析出的蛋白質(zhì)仍舊可以溶解在水中,而不影響原來蛋白質(zhì)的性質(zhì),因此鹽析是個可逆過程.利用這個性質(zhì),采用分段鹽析方法可以分離提純蛋白質(zhì).2)蛋白質(zhì)的變性在熱、酸、堿、重金屬鹽、紫外線等作作用下,蛋白質(zhì)會發(fā)生性質(zhì)上的改變而凝結(jié)起來.這種凝結(jié)是不可逆的,不能再使它們
酵母菌和霉菌觀察實驗分析2022/06/23
在生物學(xué)中,有很多各種各樣的菌體,它們具有不同的特點和生存環(huán)境,當(dāng)然,這些菌體通常都是人體肉眼所看不見的,只有利用顯微鏡才能看到它們的存在。今天遠慕生物就以霉菌和酵母菌為例,帶大家一起來觀察酵母菌和霉菌實驗。實驗材料:酵母菌、霉菌、碘液;實驗儀器:光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、滴管。1、觀察酵母菌實驗在看實驗之前,我們先來了解一下什么是酵母菌?酵母菌是一種單細胞真菌,在有氧和無氧環(huán)境下都能生存,屬于兼性厭氧菌。其主要生殖方式是出芽生殖。成熟的酵母菌細胞,先長出一個小芽,芽細胞長到一定程度,脫
菌種管理的相關(guān)流程,實驗人了解一下!2022/06/22
⒈菌株的采集實驗室用菌種:一是到國家法定機構(gòu)采購,二是購買商業(yè)派生菌種,三是科研中菌種交流。不管是哪種來源,均統(tǒng)一采集。采集中嚴(yán)格按照規(guī)范執(zhí)行。要求包裝可靠,采集迅速,不泄漏不污染。保證菌種合格和環(huán)境安全。采集中要有菌種傳代標(biāo)識。選擇有資質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)菌株的合格供應(yīng)商,每批標(biāo)準(zhǔn)菌株必須附帶有供應(yīng)商的合格證或檢測報告或說明書,來證明所采購的標(biāo)準(zhǔn)菌株是合格的。⒉標(biāo)準(zhǔn)菌株和驗收實驗室收到標(biāo)準(zhǔn)菌株,首先應(yīng)進行符合性感官檢查,記錄菌株號和標(biāo)準(zhǔn)菌株來源途徑信息,確保溯源性清楚。同時還應(yīng)記錄標(biāo)準(zhǔn)菌株名稱和數(shù)量、生產(chǎn)
核酸檢測樣品試管里的的液體是什么?2022/06/22
粉紅色液體是病毒保存液:包括非滅活型和滅活型。滅活型:病毒保存液滅活型,這種混合溶液介質(zhì)中含有高效病毒裂解液,采樣后可迅速滅活病毒,有效防止二次感染風(fēng)險,同時釋放出病毒核酸,便于檢測。VTM液中含核酸酶Rnase抑制劑,可防止樣本中破裂細胞降解后細胞質(zhì)中的核酸酶降解病毒核酸,更大化程度保護病毒核酸穩(wěn)定,大幅提高核酸提取效率。非滅活型病毒:保存液中并不含裂解液,而是多種利于病毒宿主細胞培養(yǎng)的溶液成分,這種VTM可以保證病毒的完整性,有助于增加病毒的生存時間和感染穩(wěn)定性,因此對病毒檢測的保護工作和采
考馬斯亮蘭法(Bradford法)測定蛋白濃度實驗原理2022/06/22
雙縮脲法(Biuret法)和Folin―酚試劑法(Lowry法)的明顯缺點和許多限制,促使科學(xué)家們?nèi)ふ腋玫牡鞍踪|(zhì)溶液測定的方法。1976年由Bradford建立的考馬斯亮蘭法(Bradford法),是根據(jù)蛋白質(zhì)與染料相結(jié)合的原理設(shè)計的。這種蛋白質(zhì)測定法具有超過其他幾種方法的突出優(yōu)點,因而正在得到廣泛的應(yīng)用。這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質(zhì)測定法??捡R斯亮蘭G-250染料,在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm變?yōu)?95nm,溶液的顏色也由棕黑色變?yōu)樘m色。
微生物細胞大小測定實驗方法2022/06/22
(一)微生物細胞大小的測定1、目鏡測微尺的校正把目鏡的上透鏡旋下,將目鏡測微尺的刻度朝下輕輕地裝入目鏡的隔板上,把鏡臺測微尺置于載物臺上,刻度朝上。先用低倍鏡觀察,對準(zhǔn)焦距,視野中看清鏡臺測微尺的刻度后,轉(zhuǎn)動目鏡,使目鏡測微盡與鏡臺測微尺的刻度平行,移動推動器,使兩尺重迭,再使兩尺的“0”刻度*重合,定位后,仔細尋找兩尺第二個*重合的刻度(圖示),計數(shù)兩重合刻度之間目鏡測微尺的格數(shù)和鏡臺測微尺的格數(shù)。因為鏡臺測微尺的刻度每格長10?m,所以由下列公式可以算出目鏡測微尺每格所代表的實際長度。目鏡測
誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有哪些2022/06/21
在體外培養(yǎng)條件下,動物細胞會自發(fā)融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導(dǎo)細胞融合效應(yīng)的生物或化學(xué)藥劑,或者采用電融合技術(shù),人為地促進細胞融合。病毒誘導(dǎo)融合病毒是最/早采用的融合劑。常用于誘導(dǎo)動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最/常用。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內(nèi)酯滅活,使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性。用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)細胞融合的優(yōu)點:融合率較高,對各種動物細胞都適宜,且仙臺病毒能在雞胚中大量繁殖,容易培養(yǎng);缺點:仙臺病毒不穩(wěn)定,
微生物細胞、植物細胞與動物細胞培養(yǎng)區(qū)別2022/06/21
微生物細胞培養(yǎng),簡稱微生物培養(yǎng),包括原核細胞培養(yǎng)(細菌培養(yǎng))和真核細胞培養(yǎng)(霉菌培養(yǎng)和酵母培養(yǎng))。這些細胞小、且具有細胞壁,細胞周期非常短,如細菌每20-30min增殖1次。植物細胞培養(yǎng)指原生質(zhì)體培養(yǎng)。未考慮分離出原生質(zhì)體的植物細胞培養(yǎng),無論是游離的單細胞或組織塊,都稱作植物組織培養(yǎng)。動物組織細胞培養(yǎng)包括接種單細胞懸液進行的培養(yǎng)、接種組織塊進行的培養(yǎng)。傳代細胞如細胞株、細胞系,通常采用接種單細胞懸液進行的培養(yǎng),是動物細胞培養(yǎng)常見的方式。原代細胞是指來源于動物組織的細胞團塊,往往包含多種細胞類型,
培養(yǎng)細胞都要注意哪些小細節(jié)?2022/06/21
培養(yǎng)細胞就像養(yǎng)育孩子一樣,要精心照料,用心呵護。最好每天都去看看它們,滿足它們所需要的物質(zhì)需求,防止出現(xiàn)培養(yǎng)箱缺水、二氧化碳不足、溫度不夠等各種小意外,還要注意很多小細節(jié),以免開展重復(fù)的實驗導(dǎo)致不必要的人力物力浪費。那培養(yǎng)細胞都要注意哪些小細節(jié)呢?就讓我們一起來看看吧!1.細胞生長的營養(yǎng)來源不同的細胞的培養(yǎng)基是不相同的,對于大多數(shù)腫瘤細胞來說,營養(yǎng)配方一般為:90%合成培養(yǎng)基(DMEM、RPMI1640、MEM等)和10%胎牛血清(FBS);為了防止污染,可以適時加1%雙抗,抗生素的使用應(yīng)為短期
胰/酶使用注意及貼壁細胞2022/06/20
胰/酶使用注意:1、在使用胰/酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。2、胰/酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。貼壁細胞的消化:1、吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清2、加入少量胰/酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,根據(jù)胰/酶效率差異可以增加惑減少胰/酶用量。室溫放置30秒至2分鐘(不同的細胞消化時間有所不同)3、顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用
固定化α-淀粉酶及活性測定方法2022/06/20
一、實驗?zāi)康暮驮砟康模簩W(xué)會交聯(lián)法制備固定化酶的操作技術(shù)內(nèi)容:制備固定化酶的方法很多,利用雙功能試劑或多功能試劑在酶分子間,酶分子與惰性蛋白間,或酶分子與載體間進行交聯(lián)反應(yīng),以共價鍵制備固定化酶的方法稱為交聯(lián)法,本實驗即采用這種方法。交聯(lián)劑為戊二醛,載體為甲殼素。二、實驗器材1.恒溫水浴鍋2.恒溫振搖儀三、實驗試劑1.5%戊2醛2.甲殼素3.碘原液:稱取碘1.1g。碘化鉀2.2g,置于小燒杯中,加10ml蒸餾水使之溶解,然后轉(zhuǎn)入容量瓶中。再加少量的蒸餾水洗滌燒杯數(shù)次,洗滌液均轉(zhuǎn)入容量瓶中,最后定
溶菌酶純度鑒定與分子量測定2022/06/20
一、實驗?zāi)康暮蛢?nèi)容目的:1.通過本次實驗的學(xué)習(xí)與操作,使學(xué)生在實驗過程更好的理解SDS-聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)測定蛋白質(zhì)純度與分子量的原理與依據(jù);2.要求學(xué)生掌握電泳原理以及SDS-PAGE垂直板電泳分離蛋白質(zhì)技術(shù);3.熟悉垂直板電泳操作原理和方法,凝膠染色與脫色方法,凝膠圖譜的繪制與計算;4.了解在電泳中分子量標(biāo)準(zhǔn)物的使用。內(nèi)容:1.SDS-PAGE電泳的原理:SDS使蛋白質(zhì)的變性作用,以及此實驗中采用的使不連續(xù)PAGE膠(分離膠和濃縮膠)的原理;2.SDS-PAGE電泳進行純度鑒定的原理
遠慕簡述酶免疫技術(shù)的技術(shù)原理2022/06/20
酶免疫技術(shù)的技術(shù)原理是什么?遠慕生物為大家整理匯總?cè)缦?,希望可以幫助大家。免疫酶技術(shù)是將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶的高效催化作用有機結(jié)合的一種方法。它以酶作為標(biāo)記物,與抗體或抗原聯(lián)結(jié),與相應(yīng)的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應(yīng)作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學(xué)技術(shù)。為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯制成的小管、小盤或小孔)上,然后加被測溶液,倘樣品中有相應(yīng)抗原,則與抗體在載體表面形成復(fù)合物。洗滌后加入酶標(biāo)記的特異性抗體,后者通過
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