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最常見的載體蛋白及其偶聯(lián)方式2022/06/13

載體蛋白KLH,BSA,OVA偶聯(lián)-多肽修飾肽-載體蛋白偶聯(lián)多用于制備抗多肽類抗體，單獨的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反應，而帶有很多抗原表位的載體蛋白有利于刺激輔助性T細胞，進一步誘導B細胞免疫反應。請記住，免疫系統(tǒng)是將肽-蛋白作為一個整體來激起免疫反應的，因而產(chǎn)生的抗體中有針對多肽的，有針對鏈接劑的，也有針對載體蛋白的。其中最常見的載體蛋白有如下幾種:KLH(KeyholeLimpetHemocyanin)，即血藍蛋白，是在某些軟體動物、節(jié)肢動物(蜘蛛和甲殼蟲)的血淋巴中發(fā)現(xiàn)的一種游離的

免疫印跡（Western blotting）實驗原理、試劑和操作步驟2022/06/10

(一)原理Westernblot是一種在PVDF或硝酸纖維素（NC）膜上進行的抗原抗體反應。蛋白電泳后，將蛋白轉(zhuǎn)移至膜上，再與特異性抗體孵育，洗去游離的抗體，然后和酶標記的二抗孵育，再進行底物顯色。由于抗原抗體反應特異性好，親合力高，Westernblot檢測的靈敏度較高，尤其是采用酶促增強化學發(fā)光的方法（ECL）后，檢測的下限可達到pg水平。ECL是指酶催化底物發(fā)熒光，熒光可使X光片曝光。由于酶標記在二抗上，二抗與一抗結(jié)合，而一抗特異性結(jié)合在目的蛋白條帶處，因此顯影、定影后觀察到的條帶即為目的

真菌毒素怎檢測方法了解一下2022/06/10

真菌毒素(mycotoxins)是由真菌寄生于谷物或水果等農(nóng)作物上，在適宜條件下產(chǎn)生的具有生物活性的一類物質(zhì)。真菌和真菌毒素的廣泛存在，嚴重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量，降低農(nóng)產(chǎn)品和飼料品質(zhì)，造成巨大經(jīng)濟損失。據(jù)悉，全/世界每年由于霉變污染真菌毒素引起的農(nóng)產(chǎn)品和工業(yè)原料的損失達數(shù)百億美元。我國谷物霉變主要發(fā)生在北緯31°線即長江以南地區(qū)，每年使糧食減產(chǎn)3～7％。據(jù)調(diào)查，除糧食、飼料以外，在油料作物、種子、水果、干果、蔬菜、調(diào)味品、煙草、麻類、乳和乳制品、魚蝦、肉類、發(fā)酵產(chǎn)品等都發(fā)現(xiàn)了不同程度的真菌毒素污染。

快速了解霉菌形態(tài)觀察中一般觀察法的步驟2022/06/10

（一）一般觀察法：1.點種培養(yǎng)：用接種針沾取斜面少許孢子在無菌的察氏培養(yǎng)基中央穿刺接種（倒置培養(yǎng)皿穿刺接種），30℃下培養(yǎng)7-10天，形成巨大菌落培養(yǎng)物。2.直接制片：在載玻片中央加一滴乳酸石炭酸棉藍染色液于潔凈，打開霉菌平板培養(yǎng)物，用解剖針從菌落的邊緣挑取少量帶有孢子的菌絲，放入載玻片的染液中，細心地把菌絲挑散開，加蓋玻片，注意不要產(chǎn)生氣泡，置于顯微鏡下觀察，菌絲呈蘭色，顏色的深度隨菌齡的增加而減弱。觀察根霉時，注意觀察其菌絲有無橫隔、假根、孢子囊柄、孢子囊、囊軸、囊托、孢子囊孢子及厚垣孢子。

淺談單抗與多抗的不同之處2022/06/10

多抗和單抗優(yōu)缺點比較多克隆抗體能識別任一抗原上的多個表位，而單克隆抗體僅檢測任一抗原上的一個表位。但是它們兩者有著屬于各自的優(yōu)點和缺點。多克隆抗體的優(yōu)點多克隆抗體可有助于放大低表達水平的靶蛋白信號，因為靶蛋白可在多個表位上結(jié)合不止一個抗體分子。但是這會給定量實驗造成不利影響，因為結(jié)果將變得不準確。由于能識別多個表位，多克隆抗體可在IP/ChIP中得到更好的結(jié)果。比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化。它們會識別出與免疫原蛋白質(zhì)具有高同源性的蛋白質(zhì)，或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白，例如當未

研制標準物質(zhì)、標準品的定值方法有哪些？2022/06/09

在我國標準物質(zhì)領域，標準物質(zhì)是通用術(shù)語，有國家標準物質(zhì)、國家標準樣品、參考品、國內(nèi)外廠家生產(chǎn)的標準樣品等多種形式。國家標準物質(zhì)經(jīng)全國標準物質(zhì)管委會審核，國家質(zhì)檢總局計量行政部門批準公布的國家標準樣品由全國標準樣品技術(shù)委員會實施、監(jiān)督、管理，經(jīng)國家標準管委會審核、批準、公布，標準物質(zhì)和標準樣品均為有證標準物質(zhì)。研制標準物質(zhì)、標準樣品的定值方法：標準物質(zhì)、標準樣品的定值方法可分為標準測定方法、參考方法和國內(nèi)外*的有效方法三種。基準測量方法是計量學特性高的方法，其操作*可描述和理解，能夠以SI為單位*

關(guān)于支原體標準品方法驗證了解一下2022/06/09

支原體標準品什么是支原體核酸法支原體核酸法包括PCR和qPCR，通過檢測支原體的特異核酸序列，以確定細胞上清或生物制品中是否存在支原體污染的一種方法。由于支原體核酸法具有檢測時間短（只需3-4h）、操作便捷等特點，越來越受到生物制品企業(yè)的青睞。支原體核酸法可作為藥典規(guī)定的培養(yǎng)法或DNA染色法的替代方法，或與以上方法相互補充。事實上，早在2011年，就有動物疫苗廠家在2011年第5期的《廣東農(nóng)業(yè)科學》上，報道了用德國MinervaBiolabs（簡稱MB）公司的支原體PCR試劑盒，用于檢測疫苗中是

標準物質(zhì)打開后怎么保存和維護？2022/06/09

標準物質(zhì)證書中有時會規(guī)定“一次性使用”，這些標準物質(zhì)通常不穩(wěn)定或具有較高的精度值。比如安瓿瓶包裝的國家1級溶液參考物質(zhì)，開包后就容易出現(xiàn)問題。超出不確定度范圍的變化應按要求盡快移取，不能留作重復使用;可一次性制備成中間標準儲備溶液保存、使用。對于可以多次使用的有證標準物質(zhì)，保證標準物質(zhì)包裝單元在開封后的妥善保存和包裝，以及證書的完整性是非常重要的。在某些情況下，需要根據(jù)證書的要求重新密封剩余的材料。.取樣時應采取防止污染的措施。在標準物質(zhì)的使用中如何進行維護，往往是用戶比較困惑的問題。國際計量學

關(guān)于中藥對照品，你知道哪些？2022/06/09

中醫(yī)藥應用在醫(yī)藥領域受到更多關(guān)注，特別是在屠呦呦女士因青蒿/素的發(fā)現(xiàn)而獲得諾貝爾獎后，中醫(yī)藥的研究被重新重視。而中藥新藥開發(fā)、老藥的評價，藥品生產(chǎn)的質(zhì)量控制等，都必須有中藥化學對照品的參與，這也是中藥標準化、現(xiàn)代化研究的關(guān)鍵。中藥化學對照品為什么重要？中藥化學對照品，亦稱標準品，是中藥質(zhì)量標準研究、質(zhì)量檢測和質(zhì)量控制的實物對照。目前我國相當部分中藥藥材及其制劑化學成分不明或無化學對照品，無法闡明其作用的化學物質(zhì)基礎，則無法進行有效的質(zhì)量控制，而不能被現(xiàn)代社會所接受，難以進入國/際藥品市場。因此，

細胞培養(yǎng)基常見成分及作用功能介紹2022/06/08

能量來源每一個生長培養(yǎng)基都需要碳源，以供細胞新陳代謝。碳源通常是葡萄糖，但也可以是其他糖類，如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸，谷氨/酰胺)。葡萄糖通常以終濃度為5.5mM的含量添加，大約等于人體血液中的葡萄糖水平。然而，你可以購買葡萄糖濃度變化范圍很廣的培養(yǎng)基來滿足你的具體需求。你甚至可以購買不含葡萄糖的培養(yǎng)基，然后自己定制濃度，模擬高糖的糖尿病狀況，或者研究低糖應激反應。緩沖液細胞需要一種特殊的pH值從7.2到7.4，否則它們無法最好地發(fā)揮細胞功能，以供生長和存活。在二氧化碳含量較高的

植物基因組DNA 快速提?。?0 次）實驗步驟2022/06/08

植物基因組DNA快速提?。?0次）概述：本方法可用于植物細胞DNA的快速提取，可提取107細胞，其質(zhì)量能夠滿足各種分子生物學要求。組成：1．溶液A1.2mlRNaseA10mg/ml。-20℃保存2．溶液B60ml3．溶液C180ml4．溶液D3mlResin用時充分混勻5.溶液E50ml洗液(用前加入75ml無水/酒精,充分混勻)6．溶液F25mlTEbuffer步驟：1.組織≤0.1g，液氮研磨，加入0.3ml溶液B，反復混勻，室溫5min。2.加入0.8ml溶液C，溶液A20μl，充分混勻

DNA的不同提取方法及比較2022/06/08

DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細胞的基礎上,多次苯/酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質(zhì)變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異/丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過程中殘留的有機溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應,最后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復合物,此復合物在高鹽(0.7mol/L)濃度下可溶,并穩(wěn)

各類免疫球蛋白的生物學活性2022/06/08

不同Ig其合成部位、合成時間、血清含量、分布、半衰期以及生物學活性有所差別。一、IgGIgG主要由脾、淋巴結(jié)中的漿細胞合成和分泌，以單體形式存在。在個體發(fā)育過程中機體合成IgG的年齡要晚于IgM，在出生后第3個月開始合成，3～5歲接近成年人水平。IgG是血清中主要的抗體成分，約占血清總Ig的75%。根據(jù)IgG分子中γ鏈抗原性差異，人IgG有4個亞類：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4（小鼠4個亞類是IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3)。其中IgG3γ3鉸鏈區(qū)含有62個氨基酸殘基，具有

關(guān)于PCR如何改進qPCR數(shù)據(jù)2022/06/07

關(guān)于實時熒光定量PCR技術(shù)，最常見的應用是通過RT-qPCR進行基因表達分析、疾病診斷和管理（如病毒定量）、食品檢測（如轉(zhuǎn)基因或過敏原分析）以及動物或植物育種等研究。這種方法非常靈敏，因此為了得到可靠的實驗數(shù)據(jù)，避免錯誤是十分重要的。RT和qPCR數(shù)據(jù)評估的整個工作流程包括以下幾點：1、實驗設計2、樣品的制備和提取/純化3、RT和qPCR4、數(shù)據(jù)評估在以上過程中，實驗人員有可能因為操作錯誤或失誤導致實驗數(shù)據(jù)的失真。但往往有些錯誤的來源又十分不明確，所以排除故障的第一步是需要再次檢查實驗流程并重復

遠慕實驗：菌體濃度測定方法/細菌計數(shù)方法2022/06/07

菌體濃度是指單位體積培養(yǎng)液中菌體的含量。常用的菌體濃度的測定方法（細菌計數(shù)方法）主要有以下幾種：1.直接計數(shù)法這是一種非常簡單的檢測方法，我們可以利用計數(shù)板或計數(shù)儀直接得出細菌數(shù)目。1.1細菌計數(shù)板首先制備細菌懸液，取一定體積的樣品細菌懸液置于細菌計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi)，用顯微鏡觀察計數(shù)。根據(jù)計數(shù)室刻度內(nèi)的細菌數(shù)，計算樣品中的含菌數(shù)。特點：所需設備簡單，測定結(jié)果較準確，可迅速得到結(jié)果，而且在計數(shù)的同時能觀察到所研究微生物的形態(tài)特征。不能區(qū)分是否為細菌，不能區(qū)分活細菌和死細菌。單位：個/mL計算方法：（

淺談血液樣本檢測微生物的取樣和保存2022/06/07

人體表面和體內(nèi)都生活著大量的微生物，包括真菌、細菌、古細菌和病毒，其總量甚至超過了人體自身細胞的數(shù)量。血液作為人體最為重要的一個組織，起到了輸送氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、傳導熱量以及防止微生物感染的作用。人類的血液由54.3%的血漿、45%的紅細胞、0.7%的白細胞和數(shù)量不定的血小板組成。過去曾普遍認為在健康人的血液中是不存在微生物的，只有在患有菌血癥等疾病的病人血液中才有可能檢測出微生物。但是近年來有越來越多的研究表明，在健康人的血液中也存在微生物，并且這些微生物與人體維持著微妙的共生關(guān)系。隨著高通量測

特定菌種分離培養(yǎng)了解一下2022/06/07

目前二代高通量測序已經(jīng)成為研究腸道菌群結(jié)構(gòu)常用的一種方法，該方法僅僅可以得到樣本中微生物的種類和相對豐度，但是無法拿到具體菌株。遠慕生物專注微生態(tài)研究和應用，不僅具有二代高通量測序平臺，而且還建立了腸道菌群需氧/厭氧分離培養(yǎng)平臺，為客戶提供高效的需氧/厭氧菌的靶向分離培養(yǎng)服務，幫助客戶獲得特定菌株。遠慕培養(yǎng)的樣本人或動物的糞便樣本土壤、淤泥等環(huán)境樣本目標菌株特定數(shù)量的特定菌株，比如一株或兩株菌樣本保存和寄送在客戶取樣之前，微基生物為客戶提供厭氧活菌保存液，客戶將采集的新鮮樣本放入?yún)捬趸罹４嬉褐?

關(guān)于巨噬細胞你了解多少？2022/06/06

巨噬細胞是先天免疫系統(tǒng)的一種特殊的、長壽命的吞噬細胞。巨噬細胞是三種吞噬細胞類型之一，還有粒細胞（中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞）和樹突狀細胞（DCs）。大多數(shù)病原體通過呼吸道、腸粘膜、皮膚病變或泌尿生殖道進入宿，NOI個遇到的就是在粘膜下組織中的巨噬細胞，它們通常是NOI個遇到病原體的防御細胞。一旦微生物進入宿主并開始復制，它就被其中一種吞噬細胞所識別，并被吞噬形成吞噬溶酶體，然后再經(jīng)過酸化和酶處理，產(chǎn)生高活性一氧化氮和超氧自由基來殺死病原體，這一過程稱為吞噬作用。一般來說，巨噬細胞可

遠慕生物為您分析胎牛血清給細胞提供的益處2022/06/06

胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用*的添加培養(yǎng)基。它營養(yǎng)豐富，大約含有三四百種不同成分，具有基礎培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。遠慕生物為您分析胎牛血清給細胞提供的六個益處。它給細胞提供的益處主要有六個方面1.提供細胞生長所需的天然激素或天然生長因子,如胰島素、IGFII等。2.提供天然的結(jié)合蛋白如胎球蛋白、白蛋白等，能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等，能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。胎球蛋白（Fetuin），具有多個鈣離子結(jié)合位點，能調(diào)節(jié)血清中的鈣離子濃度。3.提供細胞外基質(zhì)成分，便于細胞粘附、貼壁、鋪展。當然，有

細胞復蘇實驗操作步驟，實驗人必看！2022/06/06

細胞復蘇的原則：慢凍速融，必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。復蘇步驟一.實驗前準備：將水浴鍋預熱至37℃。細胞實驗室進行常規(guī)消毒，用75％酒精擦拭并且使用紫外線照射40min的超凈工作臺臺面。在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等。二．取出凍存管：根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。三．迅速解凍：迅速將凍存管投入到