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如何獲得更好的免疫熒光實驗結(jié)果2022/05/27

免疫熒光是標(biāo)記免疫技術(shù)發(fā)展最早的一種，它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù)，通過將抗體與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。免疫熒光步驟包括，細胞固定和通透，封閉，孵育一抗，二抗等。除了這些基本步驟，以下建議可以幫助您獲得更好的實驗結(jié)果。1、細胞固定和通透為達到最佳的檢測效果，細胞需要經(jīng)過固定和通透。這些步驟非常關(guān)鍵，細胞和抗原需要保證最佳的結(jié)構(gòu)，并利于抗體與抗原結(jié)合。通常情況下，需要通過以下步驟得以實現(xiàn)：細胞用2%-4%多聚甲醛固定，之后用

分子篩（凝膠過濾層析）的優(yōu)缺點2022/05/26

分子篩定義分子篩層析，又稱為凝膠過濾層析或體積排阻層析。分子篩層析是利用有一定孔徑范圍的多孔凝膠作為固定相，對混合物中各組分按分子大小進行分離的層析技術(shù)。具有分子篩作用的物質(zhì)很多，如浮石、瓊脂、瓊脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝膠等。避開原因一：工藝放大困難分子篩層析無法遵循線性放大原則，即使遵循柱床高度不變的原則，工藝流速如何進行調(diào)整，也是需要面臨的問題。為保證良好的分離效果，分子篩層析必須要求相對較高的裝填高度，然而裝填高度偏高，反壓也勢必會偏高。由于層析填料的耐壓有限，在保證不超壓的前

載體蛋白（KLH,BSA,OVA）偶聯(lián)-多肽修飾簡介2022/05/26

肽-載體蛋白偶聯(lián)多用于制備抗多肽類抗體，單獨的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反應(yīng)，而帶有很多抗原表位的載體蛋白有利于刺激輔助性T細胞，進一步誘導(dǎo)B細胞免疫反應(yīng)。請記住，免疫系統(tǒng)是將肽-蛋白作為一個整體來激起免疫反應(yīng)的，因而產(chǎn)生的抗體中有針對多肽的，有針對鏈接劑的，也有針對載體蛋白的。其中最常見的載體蛋白有如下幾種:KLH(KeyholeLimpetHemocyanin)，即血藍蛋白，是在某些軟體動物、節(jié)肢動物(蜘蛛和甲殼蟲)的血淋巴中發(fā)現(xiàn)的一種游離的藍色呼吸色素。血藍蛋白含兩個直接連接多肽鏈的

遠慕生物多肽純化十問十答！2022/05/26

1.多肽含量與多肽純度有什么區(qū)別?一條多肽產(chǎn)品中除了多肽本身還包括生產(chǎn)過程中帶入的水份及有機鹽分等雜質(zhì)，多肽純度僅指多肽本身所含肽產(chǎn)品的含量及雜質(zhì)的含量，不包括水份等雜質(zhì);而多肽含量則是指目標(biāo)多肽在產(chǎn)品中的凈含量，一般以N元素分析或氨基酸分子的方法來檢測;因此一條多肽即使純度達到99%，因為產(chǎn)品中還包含水份及有機鹽分等，它的含量可能也只有70-80%。2如何溶解多肽?多肽樣品在上制備柱前為什么需要進行前處理?有哪些前處理的方法?多數(shù)多肽都可以用超純水溶解，對于一些難溶的多肽，先要分析其氨基酸序列

蛋白質(zhì)的鹽析與透析實驗2022/05/26

一、實驗?zāi)康?1)掌握蛋白質(zhì)鹽析沉淀的基本原理與操作。(2)掌握蛋白質(zhì)透析分離的基本操作。二、實驗原理蛋白質(zhì)是親水膠體，借助水化膜和同性電荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白質(zhì)帶負電荷)相互排斥作用維持蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定，向蛋白質(zhì)溶液中加入中性鹽可破壞這些穩(wěn)定因素，使蛋白質(zhì)沉淀析出，稱為鹽析。鹽析所得到的蛋白質(zhì)沉淀經(jīng)透析或用水稀釋以減低或除去鹽后，蛋白質(zhì)能再次溶解并恢復(fù)其天然結(jié)構(gòu)和生物活性，稱為透析。由于蛋白質(zhì)分子量很大，其顆粒直徑范圍在1～100nm內(nèi)，不能透過半透膜。選用合適孔徑的半透膜可使小分子

檢驗檢測的分類與選擇2022/05/25

檢驗方法的選擇正確與否將直接影響到檢驗的結(jié)果和檢驗的效率,正是從這個意義上說：掌握檢驗的各種分類標(biāo)準(zhǔn)至關(guān)重要。一、按照檢驗數(shù)量分類1、免檢：免檢是指如果可以得到由有資格的單位進行過檢驗的可靠性資料、如合格證、檢驗報告等，就可以不需要檢驗。免檢的適用范圍—生產(chǎn)過程穩(wěn)定對后續(xù)生產(chǎn)無影響時可采用免檢長期檢驗證明質(zhì)量優(yōu)良信譽很高的產(chǎn)品在交接中可采用免檢、國家批準(zhǔn)的免檢產(chǎn)品或通過產(chǎn)品質(zhì)量認證的產(chǎn)品可采用免檢2、抽檢：抽檢是指按照一定的比例和取樣方法抽取樣品，通過逐個檢驗樣品品質(zhì)，判斷總體合格與否的檢驗。3

標(biāo)準(zhǔn)樣品的均勻性檢驗及判斷2022/05/25

標(biāo)準(zhǔn)樣品的均勻性是標(biāo)準(zhǔn)樣品的基本性質(zhì)。均勻性即是物質(zhì)的一種或幾種特性具有同組分或相同結(jié)構(gòu)的狀態(tài)。檢驗規(guī)定大小的樣樣品，若被測量的特性值在規(guī)定的不確定度范圍內(nèi)，則該標(biāo)準(zhǔn)樣品對這一特性值來說是均勻的。不論在制備標(biāo)準(zhǔn)樣品過程是是否經(jīng)過均勻性初驗，凡成批制備并分裝成最小包裝單元的標(biāo)準(zhǔn)樣品，必須進行均勻性檢驗。由大包裝分裝成最小包裝單元時，也需進行均勻性檢驗。這是制備標(biāo)準(zhǔn)樣品過程中*的程序，也是確保標(biāo)準(zhǔn)樣品定值準(zhǔn)確的最基本條件。1標(biāo)準(zhǔn)樣品的均勻性檢驗進行均勻性檢驗的目的是：一方面通過均勻性檢驗說明特性值在

檢驗方法的驗證和確認步驟2022/05/25

1、檢驗方法驗證的基本內(nèi)容檢驗方法驗證的基本內(nèi)容包括方案的起草及審批，檢測儀器的確認.適用性驗證(包括準(zhǔn)確度試驗、精密度測定.線性范圍試驗、專屬性試驗等)和結(jié)果評價及批準(zhǔn)四個欠的方面。它的基本內(nèi)容可以用下圖表示。2、檢驗方法驗證的基本步驟首先是制定驗證方案，然后對大型精密儀器進行確認，最關(guān)鍵的一步是檢驗方法的適用性試驗，最后是檢驗方法評價及批準(zhǔn)。1)驗證方案的制定檢驗方法的驗證方案通常由質(zhì)量驗證小組提出。根據(jù)產(chǎn)品的工藝條件、原輔料化學(xué)結(jié)構(gòu)、中間體、分解產(chǎn)物查閱有關(guān)資料，提出規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)，確定檢查項目

如何檢驗分析方法的準(zhǔn)確度2022/05/25

常用的檢驗方法有3種。但這些方法只能指示誤差的存在，而不能證明*。1.平行測定兩份結(jié)果若相差很大，差值超過了允許誤差范圍，這就表明結(jié)果中至少有一個有誤，應(yīng)重新分析。兩份結(jié)果如果很接近，可取平均值，但也不能說明結(jié)果正確無誤。2.用標(biāo)樣對照在一批分析中同時帶一個標(biāo)準(zhǔn)樣品，，如果操作無誤而標(biāo)樣分析結(jié)果與標(biāo)樣參考值一致，說明本批樣品分析結(jié)果沒有出現(xiàn)明顯誤差。3.用不同的分析方法對照這是比較可靠的檢驗方法。如兩種分析方法的分析結(jié)果取得一致，則證明此結(jié)果是可靠的；反之，說明兩種方法中至少有一種方法的測定結(jié)果

遠慕生物：血漿凝血酶調(diào)節(jié)蛋白抗原檢測2022/05/24

關(guān)鍵詞：血漿血清抗原檢測血漿凝血酶蛋白抗原遠慕生物試劑實驗原理以抗人血栓調(diào)節(jié)蛋白單克隆抗體（或抗血清）包被聚苯乙烯放免小杯，樣品中的TM結(jié)合于包被的放免小杯上，加入125I-抗人TM單抗，根據(jù)結(jié)合的125I-放射性強度計算出樣品中TM含量。主要試劑與器材1、抗人TM單克隆（或多克?。┛贵w包被液：將抗人TM單抗用0.1mol/L碳酸鹽緩沖液（pH9.5）稀釋至10μg/ml。2、緩沖液A：0.05mol/LTris-HCI，0.15mol/LNaCl，2.5mol/LCaCl2，肝素20U/ml，

液相使用小雷區(qū)，你避開了嗎？2022/05/24

液相操作中，有一些小細節(jié)上的誤操作在精益求精的實驗室人看來是要盡可能避免的，細節(jié)雖小，影響很大。這就帶各位小伙伴們看一看，這些錯誤你們有犯過嗎？犯過不怕，記得改正哦~加入有機相之后再測量流動相的PH值作為液相色譜的基礎(chǔ)，流動相的各項參數(shù)是保障實驗質(zhì)量的重中之重，特別是PH值。通常情況下對流動相PH值的測量是測量水相中的PH值參數(shù)，而在加入有機相后PH測量的PH值是會產(chǎn)生誤差的。因為每一次加入的有機相并不能保證*的同質(zhì)同量，從而影響實驗的準(zhǔn)確度。測量流動相的PH值，是測量水相中的PH值參數(shù)。有機相

菌落總數(shù)檢測的注意事項與快速檢測技術(shù)！2022/05/24

食品安全事件的頻頻發(fā)生，使得民眾對食品安全問題越來越關(guān)注。為了確保食品安全，政府部門除了要出臺相關(guān)法律法規(guī)外，更為重要的是要建立起更為科學(xué)的食品安全性的檢測技術(shù)。規(guī)范的檢測方法是有效保障食品安全的重要環(huán)節(jié)，它要求檢驗數(shù)據(jù)具有更高的準(zhǔn)確度和可信度。食品中菌落總數(shù)反映了食品在生產(chǎn)過程中的衛(wèi)生情況，體現(xiàn)食品被細菌污染的程度，是做出科學(xué)衛(wèi)生評價的重要指標(biāo)之一。本文主要對國標(biāo)法微生物檢測中菌落總數(shù)測定采用的傳統(tǒng)方法即平板計數(shù)法的注意事項進行相關(guān)的分析，并著重介紹了快速檢測技術(shù)在菌落總數(shù)檢測中的應(yīng)用。注意事

遠慕單抗制備常見問題分析2022/05/24

1.為什么免疫后沒有效價或免疫后效價低？答：可以從這幾個方面一一考慮：（1）設(shè)計的抗原與被免疫的動物內(nèi)源蛋白有*的同源性或者抗原是免疫原性極差的小分子物質(zhì)。對于前一種情況應(yīng)該重新設(shè)計抗原，設(shè)計抗原時盡量選取目標(biāo)蛋白特異性的序列，可以設(shè)計為短肽然后再與載體蛋白偶聯(lián)之后免疫；對于后一種情況，首先確認小分子物質(zhì)是否已經(jīng)正確地和載體蛋白偶聯(lián)，如果偶聯(lián)沒有問題，可以更換其它的載體蛋白，一般來說KLH是所有載體中較為優(yōu)先考慮的蛋白。（2）免疫的周期不正確。免疫周期過長或過短，各免疫步驟之間的間隔過長或過短都

實驗室化學(xué)品存放可沒想象的那么簡單！2022/05/24

化學(xué)品在存放時，常因周圍環(huán)境溫濕度變化結(jié)塊或者凍塊，而引起變質(zhì)，對其品質(zhì)產(chǎn)生影響，從而使成本變高。因此，必須根據(jù)試劑的不同物化性質(zhì)，分別采取相應(yīng)的控溫、控濕手段妥善保存。有些試劑容易吸濕而潮解或水解；有的容易跟空氣里的氧氣、二氧化碳或擴散在其中的其他氣體發(fā)生反應(yīng)，還有一些試劑受光照和環(huán)境溫度的影響會變質(zhì)。化學(xué)品性質(zhì)不相同，如何區(qū)別對待？1、低沸點的化合物、需要低溫保存的藥品須按要求放入所需的環(huán)境（低溫冰箱）；2、避光保存的藥品及其所配制的試劑，均應(yīng)按要求用棕色容器（瓶）保存，或用深色紙包裹；3、

培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)基你選對了嗎？2022/05/23

干細胞治療也被稱為再生醫(yī)學(xué)，是指利用干細胞及其衍生物來促進受損、病變或功能喪失的組織進行修復(fù)。如今，許多白血病等患者已經(jīng)受益于干細胞治療。未來，骨關(guān)節(jié)炎、腦癱、心臟衰竭、多發(fā)性硬化癥、甚至是聽力損失等都有望受益。干細胞治療處在生命科學(xué)的最/前沿，將會引起一場新的醫(yī)學(xué)革命。“10至20年后，干細胞將會成為一種基本的治療技術(shù)，幫助人們解決現(xiàn)在無法克服的疾病”，很多患者認為10年至20年太長，希望干細胞能夠早日幫助人類克服疾病帶來的痛苦。干細胞研究發(fā)展勢頭猛，間充質(zhì)干細胞成主流如今，干細胞治療市場已經(jīng)

淺談一下多樣的微生物菌落計數(shù)方法2022/05/23

菌落總數(shù)檢測儀主要用于計數(shù)培養(yǎng)基培養(yǎng)出來的菌落群，為壓力感應(yīng)式，適用各種計數(shù)筆，壓力敏感度可調(diào)。*的按鈕設(shè)計，計數(shù)錯誤時，可將數(shù)值往后退。配有可調(diào)節(jié)的培養(yǎng)皿支架以及非閃爍式圓形燈管，減少眼睛的疲勞。對于菌落總數(shù)的計數(shù)方法有很多，今天我們主要介紹幾種常見的：1.染色計數(shù)法為彌補一些微生物在油鏡下不易觀察計數(shù)，而直接用血球計數(shù)板法又無法區(qū)分死細胞和活細胞的不足，人們發(fā)明了染色計數(shù)法，借助不同的染料對菌體進行適當(dāng)?shù)娜旧?，可以更方便的在顯微鏡下進行活菌計數(shù)。如酵母活細胞計數(shù)可用美藍染色液，染色后在顯微鏡

GVC增菌液培養(yǎng)基配制方法2022/05/23

中文名：GVC增菌液培養(yǎng)基英文名：GVCEnrichmentBroth用途：培養(yǎng)基用于酵米面、變質(zhì)銀耳及其它淀粉類發(fā)酵食品引起的食物中毒樣品中椰毒伯克霍爾德氏菌的增菌培養(yǎng)。標(biāo)準(zhǔn)：GB/T4789.29-2003配方（g/L)成分含量（g/L）馬鈴薯300(從中提取浸出)粉葡萄糖20結(jié)晶紫0.01氯/霉素0.02最終pH5.6±0.2原理馬鈴薯提供各類氮源，碳源，維生素；葡萄糖提供能源；結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽性菌；氯/霉素抑制除椰毒伯克霍爾德氏菌的大部分細菌生長。用法取瓶內(nèi)GVC增菌液培養(yǎng)基干粉24.

如何使用生物素標(biāo)記抗體或蛋白？2022/05/23

生物素，是一個分子量只有244.31Da的小分子，經(jīng)活化后可與蛋白、抗體等生物大分子結(jié)合，不僅可以很好地保持大分子的生物活性，而且與親和素結(jié)合使用時具有多級放大作用，使其廣泛應(yīng)用于微量抗原、抗體定性、定量檢測及定位觀察研究。那么如何使用生物素標(biāo)記抗體或蛋白呢？下面遠慕給大家分享一下。工具/原料1.10ul，50ul，200ul，1000ul可調(diào)高精度移液器2.恒溫箱（37℃）3.離心機（離心力可達到12,000×g）4.生物素標(biāo)記試劑盒（Cata.No:EBLK0002,Elabscience)

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)保證色譜的安全性和可靠性2022/05/20

許多實驗室都制定了自己的參考標(biāo)準(zhǔn)-付出了很多努力，總是帶來錯誤風(fēng)險。根據(jù)ISO指南34和ISO17025質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)始終能夠保證最/高級別的色譜安全性和可靠性。參考物質(zhì)作為色譜參考是必不/可少的，以確保樣品成分的正確識別和分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。在確保測量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性時，它們是*的-為分析帶來信心。錯誤的閱讀可能會導(dǎo)致(有時是嚴重的)錯誤的決策，這不僅會帶來可觀的額外工作量，還可能意味著失去信心和經(jīng)濟損失。大量的工作與錯誤的風(fēng)險參考標(biāo)準(zhǔn)解決方案仍主要由研究實驗室自行生產(chǎn)，但制造本身就

實驗室常用微生物菌種的分離和純化方法2022/05/20

從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中，不僅需要通過分離純化技術(shù)從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物，而且還必須隨時注意保持微生物純培養(yǎng)物的“純潔”，防止其他微生物的混入。1、用固體培養(yǎng)基分離和純化單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞生長群體，稱為菌落。當(dāng)固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時，便成為菌苔。不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征，