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細(xì)胞凍存液的配方你知道嗎2022/06/06: 伴隨著科技進(jìn)步持續(xù)的發(fā)展趨勢(shì)，醫(yī)學(xué)技術(shù)也在持續(xù)提高。前兩年冷凍人的惡性事件讓眼前一亮，原先不僅是食材能夠冷藏儲(chǔ)存，就連身體也可以冷藏儲(chǔ)存。假如要想做到那樣的目地，那麼就需要體細(xì)胞冷凍液，這類東西如何配備呢?下邊就來實(shí)際的了解一下，細(xì)胞凍存液的秘方是啥？細(xì)胞凍存液的配方是什么？(一)細(xì)胞凍存1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞，除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸

重點(diǎn)分析：實(shí)驗(yàn)試劑應(yīng)用的常見問題2022/06/02: 1.測(cè)定范圍每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過此范圍，分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。2.底物耗盡使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法、兩點(diǎn)法測(cè)定酶活性時(shí)，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會(huì)超過某一吸光度變化范圍，監(jiān)測(cè)期的吸光度將偏離線性，使測(cè)定結(jié)果不可靠。3.試劑空白每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì)。而試劑空白吸光度限值，常作為程序參數(shù)輸入儀器，如經(jīng)核查超限，儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警，提示更換試劑。需要指出的是，

使用分光光度計(jì)測(cè)定蔗糖含量2022/06/02: 使用分光光度計(jì)測(cè)定蔗糖含量酶是非常有用的助手，憑借其*的專一性和重現(xiàn)性能夠檢測(cè)到所需的分子。正是因?yàn)橛写颂匦裕麄兛芍谱鞒蓹z測(cè)試劑盒，用來檢測(cè)果汁、紅酒、啤酒、雞蛋和肉類等各類食品的各種底物如糖和其它碳水化合物、酸和醇等。酶試劑盒受歡迎還因?yàn)樗腥缦聝?yōu)點(diǎn)：首先，和其它測(cè)試方法比起來它的樣品制備快速且簡(jiǎn)單。其次，每次測(cè)試的成本非常低測(cè)試不需要任何危險(xiǎn)試劑。酶試劑盒的原理是基于輔酶系統(tǒng)煙/酰胺-腺嘌呤二核苷酸（NAD/NADH）的顏色變化進(jìn)行檢測(cè)–還原態(tài)(NADH)在340nm有光譜吸收。我們通過檢

遠(yuǎn)慕教你如何合理存放化學(xué)試劑2022/06/02: 要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑，試劑不僅有各種狀態(tài)，而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑，有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆，有的香氣濃烈，有的則劇毒……。如果不能合理的存放實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑，不僅使實(shí)驗(yàn)室人員工作起來增添了很多繁瑣的程序，在一定程度上也造成了對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染，從而影響實(shí)驗(yàn)人員的身心健康。只有合理的存放實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑，才能安全、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)到預(yù)期實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，又可消除?duì)環(huán)境的污染。合理的存放試劑，能夠有效的減少揮發(fā)性氣體，去除實(shí)驗(yàn)室內(nèi)彌散的揮發(fā)性

實(shí)驗(yàn)室溶液、溶劑的有效期到底是多少？2022/06/02: 化學(xué)試劑不像食品和藥品有著嚴(yán)格的保質(zhì)期，化學(xué)試劑一般沒有保質(zhì)期的具體要求和界限，這化學(xué)試劑的保質(zhì)期受到多方面因素影響有關(guān)；要根據(jù)化學(xué)性質(zhì)、保存條件等，在結(jié)合工作的實(shí)際情況判斷試劑是否出現(xiàn)變質(zhì)、能否繼續(xù)使用。不同化學(xué)溶液使用期限的不同：1.磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液3個(gè)月2.標(biāo)準(zhǔn)緩沖液3個(gè)月3.醋酸鹽緩沖液3個(gè)月4.磷酸鹽緩沖液3個(gè)月5.醋酸--醋酸銨緩沖液3個(gè)月6.磷酸鹽緩沖液3個(gè)月7.草酸氰鉀緩沖液3個(gè)月8.氫氧化鈉試液6個(gè)月9.碘試液6個(gè)月10.硝/酸銀試液6個(gè)月11.硝/酸汞試液本液應(yīng)置棕色瓶?jī)?nèi)，密

你了解生物大分子的類型嗎?2022/06/01: 什么是生物大分子（biomacromolecules）？有的教科書認(rèn)為生物大分子包括核酸、蛋白質(zhì)、糖類和脂質(zhì)等4類物質(zhì)，而有的教科書上只提到核酸、蛋白質(zhì)和糖類等3類物質(zhì)。那么究竟如何界定生物大分子的涵義呢？大分子（Macromolecule）這一術(shù)語(yǔ)最先是由德國(guó)化學(xué)家、諾貝爾獎(jiǎng)獲得HermannStaudinger在1920年首先提出的，專指超過1000個(gè)原子組成的化合物稱為大分子。不同的學(xué)科中，對(duì)大分子的理解也存在差異，根據(jù)國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(InternationalUnionofPu

遠(yuǎn)慕實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞制備流程及轉(zhuǎn)化方法2022/06/01: 細(xì)胞制備流程及轉(zhuǎn)化方法1.轉(zhuǎn)移0.2-1ml培養(yǎng)物至裝有500mlLB(或其他營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基)的1-2升搖瓶2.37°C下劇烈振蕩培養(yǎng)2-6小時(shí)3.定時(shí)監(jiān)控OD600值(培養(yǎng)1小時(shí)后每半小時(shí)測(cè)定一次)4。當(dāng)OD600值達(dá)到0.5-1.0時(shí)，從搖床中取出搖瓶，置于冰上冷卻至少15分鐘(需要的話這種方式可以存放培養(yǎng)液數(shù)小時(shí))5.細(xì)胞在4°C5000g下離心15分鐘，棄上清液(如需要，沉淀可在4°C的10%甘油中保存一兩天)6.用滅菌的冰水重懸浮細(xì)胞。先用渦旋儀或吸液管重懸浮細(xì)胞于少量體積中(幾毫升

新生牛血清蛋白檢測(cè)指標(biāo)有哪些？2022/06/01: 新生牛血清(NewbornCalfSerum)是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。經(jīng)大規(guī)模混合后除菌過濾制成成品，主要用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，是醫(yī)藥生物技術(shù)產(chǎn)品的重要原材料之一，其質(zhì)量好壞直接影響細(xì)胞生長(zhǎng)情況?？偟鞍缀渴切律Ｑ逍枰獧z查的指標(biāo)。它屬于化學(xué)成分的初步分析。有人統(tǒng)計(jì)過國(guó)產(chǎn)新生牛血清的蛋白含量1，在比較各產(chǎn)區(qū)各年份后，發(fā)現(xiàn)其含量在3.7%~4.4%之間。進(jìn)口新生牛血清并不與之*一致。因?yàn)閲?guó)內(nèi)的血清常采自奶牛，而國(guó)外的血清常采自肉牛。蛋白質(zhì)是新生牛血清的主要成分，在細(xì)胞培養(yǎng)中起著維

分子生物學(xué)技術(shù)都包括這些技術(shù)！2022/06/01: 分子生物學(xué)技術(shù)都包括這些技術(shù)：PCR、分子克隆、核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳測(cè)序、DNA，RNA提取、轉(zhuǎn)化外源DNA、體外轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、cDNA文庫(kù)構(gòu)建、原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交、藍(lán)白斑篩選、抗生素篩選基因工程技術(shù)大部分都是依據(jù)分子生物學(xué)原理設(shè)計(jì)出來的。分子生物學(xué)的基本含義分子生物學(xué)是從分子水平研究生命本質(zhì)為目的的一門新興邊緣學(xué)科，它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)及其在遺傳信息和細(xì)胞信息傳遞中的作用為研究對(duì)象，是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快并正在與其它學(xué)科廣泛交叉與滲透的重要前沿領(lǐng)域。分

細(xì)菌對(duì)于蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗(yàn)2022/05/31: 細(xì)菌對(duì)于蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝原理為：不同種類的細(xì)菌分解蛋白質(zhì)的能力不同。細(xì)菌對(duì)蛋白質(zhì)的分解，一般先由胞外酶將復(fù)雜的蛋白質(zhì)分解為短肽（或氨基酸），滲入菌體內(nèi)，然后再由胞內(nèi)酶將肽類分解為氨基酸。具體試驗(yàn)方法有：①明膠液化試驗(yàn)；②吲哚試驗(yàn)（靛基質(zhì)試驗(yàn)）；③硫化氫試驗(yàn)；④尿素酶試驗(yàn)；⑤苯丙/氨酸脫氨酶試驗(yàn)；⑥氨基酸脫羧酶試驗(yàn)。1.明膠液化試驗(yàn)（1）原理：某些細(xì)菌可產(chǎn)生一種胞外酶-明膠酶，能使明膠分解為氨基酸，從而失去凝固力，半固體的明膠培養(yǎng)基成為流動(dòng)的液體。（2）方法：將被檢菌穿刺接種于明膠培養(yǎng)基，于2

20種標(biāo)準(zhǔn)氨基酸（Standard amino acids）簡(jiǎn)介2022/05/31: 標(biāo)準(zhǔn)氨基酸（英語(yǔ)：Standardaminoacids）或稱蛋白氨基酸（proteinogenicaminoacids），是生物細(xì)胞中用來合成蛋白質(zhì)的共20種抗原肽氨基酸。下表中顯示抗原肽各中文名稱與英文名稱、三字母符號(hào)與單字母符號(hào)。除了以下標(biāo)示之外，有一些符號(hào)可用來表示未明確定義的縮寫，例如：Asx與B可同時(shí)代表天冬氨酸（Asp、D）或天冬酰胺（Asn、N）。Glx與Z可同時(shí)代表谷氨/酸（Glu、E）或谷氨/酰胺（Gln、Q）。Xle與J可同時(shí)代表亮氨/酸（Leu、L）或異亮氨/酸（Ile、I

為什么要用磷酸鹽校正pH計(jì)？2022/05/31: 一、酸度計(jì)的一點(diǎn)校準(zhǔn)任何一種pH計(jì)都必須經(jīng)過pH標(biāo)準(zhǔn)溶液的校準(zhǔn)后才可測(cè)量樣品的pH值，對(duì)于測(cè)量精度在0.lpH以下的樣品，可以采用一點(diǎn)極準(zhǔn)方法調(diào)整儀器，一般選用pH6.86或pH7.00標(biāo)準(zhǔn)緩沖液。有些儀器本身精度只有0.2pH或0.lpH，因此儀器只設(shè)有一個(gè)¨定位¨調(diào)節(jié)旋鈕。具體操作步驟如下：(1)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)緩沖液溫度，查表確定該溫度下的pHs值，將溫度補(bǔ)償旋鈕調(diào)節(jié)到該溫度下。(2)用純水沖洗電極并甩干。(3)將電極浸入緩沖溶液晃動(dòng)后靜止放置，待讀數(shù)穩(wěn)定后，調(diào)節(jié)定位旋鈕使儀器顯示該標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH

淺談各種血液樣品的保存方法和保存期2022/05/31: 1、全血儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：含ACD-B、CPD血液保存液的全血保存期為21d；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液保存液的全血保存期35d。使用其他血液保存液時(shí)，按其說明書規(guī)定的保存期執(zhí)行。2、去白細(xì)胞全血儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：同1去白細(xì)胞全血應(yīng)在血液采集后48h內(nèi)去除白細(xì)胞。3、濃縮紅細(xì)胞儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。存期：同14、去白細(xì)胞濃縮紅細(xì)胞儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：同15、懸浮紅細(xì)胞儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：紅細(xì)胞保存液為ACD-B、CPD的懸浮紅細(xì)胞保存期為21d。紅

ELISA載體的形狀主要有三種2022/05/30: 固相載體在ELISA測(cè)定過程中作為吸附劑和容器，不參與化學(xué)反應(yīng)?？勺鱁LISA中載體的材料很多，*常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性，加之它的價(jià)格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板最為常用，專用于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板，上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè)，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的，放入座架后，大小與

TLC顯色試劑及配方大全2022/05/30: 顯色劑可以分成兩大類：一類是檢查一般有機(jī)化合物的通用顯色劑；另一類是根據(jù)化合物分類或特殊官能團(tuán)設(shè)計(jì)的專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多，本文只能列舉一些常用的顯色劑。l．通用顯色劑①硫酸常用的有四種溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液與0.5-1.5mol／L硫酸銨溶液，噴后110oC烤15min，不同有機(jī)化合物顯不同顏色。②0.5％碘的氯仿溶液對(duì)很多化合物顯黃棕色。③中性0.05％高錳/酸鉀溶液易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。④堿性高錳/酸鉀試劑還

滴定液配制時(shí)有哪些注意事項(xiàng)2022/05/30: 一、滴定液的配制注意事項(xiàng)1.所用溶劑“水”，系指蒸餾水或去離子水，在未注明有其他要求時(shí)，應(yīng)符合中國(guó)藥典“純化水”項(xiàng)下的規(guī)定；2.采用間接配制法時(shí)，溶質(zhì)與溶劑的取用量均應(yīng)根據(jù)規(guī)定量進(jìn)行稱取或量取，并使制成后滴定液的濃度值應(yīng)為其名義值的0.95～1.05；3.采用直接配制法時(shí)，其溶質(zhì)應(yīng)采用“基準(zhǔn)試劑”，并按規(guī)定條件干燥至恒重后稱取，取用量應(yīng)精確至4～5位有效數(shù)字的精密稱定，并置1000mL量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻；4.配制濃度等于或低于0.02mol/L的滴定液時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)于臨用

分析工作試劑的提純方法2022/05/30: 在分析工作中遇到所用試劑純度和雜質(zhì)含量達(dá)不到要求時(shí),要采取對(duì)試劑進(jìn)行提純,尤其是用量較多的試劑如各種酸的提純。本節(jié)只介紹蒸餾法提純。①鹽酸的提純用硬質(zhì)玻璃或石英蒸餾器,用高純水(電阻率〉3MΩ?cm)將優(yōu)級(jí)純鹽酸(或分析純)按鹽酸:水=1:1的比例將1.5L放入2L蒸餾器中,用可調(diào)變壓器調(diào)節(jié)加熱,流速200mL/h,棄去前段150mL左右餾出液,取中段餾出液1L,蒸餾出鹽酸的濃度為6mol/L,雜質(zhì)含量很低,能滿足微量分析的要求,如需要更高純度,可進(jìn)行二次蒸餾。如果鹽酸中碑雜質(zhì)含量高,可以在蒸餾

細(xì)胞周期流式檢測(cè)步驟詳解2022/05/27: 材料與試劑：PBS乙醇，70-80%,提前放置-20°C預(yù)冷固定劑BDPharmingen™stainbuffer,orequivalent,1XPBS,2%FBS,0.1%NaN3(pH7.1–7.4)染色液BDPharmingen™PI/RNasestainingbuffer(forPI/Rnasestaining)PI/RNase染色液BDPharmingen™7-AAD(7-Amino-ActinomycinD)stainingsolution(for7-AADstaining)7-AA

什么是PBS緩沖液？遠(yuǎn)慕淺談一下PBS緩沖液！2022/05/27: PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na?HPO?、KH?PO?、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。由于Na?HPO?和KH?PO?它們有二級(jí)解離，緩沖的pH值范圍很廣；而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1mmol/LCaCl?和0.5mmol/LMgCl?，以提供雙價(jià)陽(yáng)離子。pbs緩沖液的配制方法含0.05%吐溫－20的pH7

PBS的清洗方式選擇、次數(shù)和時(shí)間的選擇2022/05/27: （1）單獨(dú)沖洗，防止交叉反應(yīng)造成污染。臨床上每天檢測(cè)的病例很多，所用的抗體種類及項(xiàng)目也多，如果在加入一抗孵育完后，將它們?cè)谝粋€(gè)缸內(nèi)洗，這樣就會(huì)造成交叉污染，影響最后的結(jié)果。正確的做法是單獨(dú)地進(jìn)行沖洗，沖洗的PBS為一次性，保證切片沒有相互交叉污染的機(jī)會(huì)。（2）溫柔沖洗，防止切片的脫落。沖洗切片，取出切片，將PBS從上輕輕地沖洗，讓PBS自上而下流下來，不要拿起切片將PBS對(duì)準(zhǔn)切片沖洗，這樣由于沖出的PBS有一定的沖擊力，很容易使切片周邊引起松動(dòng)，導(dǎo)致切片的脫落。（3）沖洗的時(shí)間要足夠，才能*洗去

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