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遠(yuǎn)慕生物淺談樣品提取溶劑解析2022/05/20

大多數(shù)化學(xué)農(nóng)藥物理和化學(xué)性質(zhì)接近，相對分子質(zhì)量大多在150~450之間，常用農(nóng)藥具有C1、P、N等功能元素。含有這些元素的溶劑使用時應(yīng)特別注意，有些必須在儀器測定進樣前去除。目前常用的提取溶劑主要有丙酮、乙腈、乙酸乙酯、石油醚或正己烷、甲醇和二氯甲烷等。為了適應(yīng)大量檢測樣品的挑戰(zhàn)，近40多年來各國開發(fā)了多種農(nóng)藥多殘留分析方法，其目的就是在一次分析中能夠同時測定多種農(nóng)藥。如果不使用多殘留方法，殘留分析工作者要面臨數(shù)百種單個農(nóng)藥的殘留分析，而且有些方法還很相似。目前國內(nèi)外已經(jīng)開發(fā)出多種可以測定數(shù)百種

掃描電鏡的微生物樣品制備方法2022/05/20

微生物樣品的掃描電鏡觀察廣泛地應(yīng)用于微生物學(xué)研究的各領(lǐng)域。為微生物資源的利用,微生物生物技術(shù)、遺傳工程、環(huán)境保護等提供了大量直觀的,有科研價值的形態(tài)學(xué)依據(jù)。大多數(shù)微生物樣品體積微小,使樣品制備,尤其是臨界點干燥,離子濺射等難于操作。積多年微生物制樣的經(jīng)驗,遠(yuǎn)慕為大家介紹微生物中有代表性的細(xì)菌,霉菌的制樣技術(shù),其他微生物樣品均可參照處理。1、細(xì)菌取液體或固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)20h左右、旺盛生長的菌體。(1)收集菌體:?液體培養(yǎng)基中的菌體,可取培養(yǎng)液8000rpm離心3~5min,棄上清,倒入215%戊

試劑瓶的使用方法和注意事項2022/05/19

通常有白色和棕色：棕色試劑瓶用于盛裝容易被光分離的試劑或溶液，如碘溶液、硝/酸銀、高錳/酸鉀、碘/化鉀等。試劑瓶有兩種，磨口和非磨口：一般來說，非研磨性試劑瓶用于盛裝堿液或濃鹽溶液等。橡膠塞或軟木塞用于防止試劑結(jié)晶或溶解玻璃，導(dǎo)致塞子和瓶口粘結(jié)在一起，不易打開。研磨瓶含有酸、非強堿性試劑或有機試劑溶液等。對玻璃的侵蝕較小。使用時，原瓶應(yīng)裝上原瓶塞，瓶與瓶塞的數(shù)量應(yīng)一致，便于密封，以免溶液蒸發(fā)，改變濃度。當(dāng)試劑玻璃瓶不使用時，應(yīng)將其清洗干凈，并在瓶口和塞子之間襯一張紙，以防止它們在長期使用后粘在一

實驗室常用有機試劑的回收利用2022/05/19

在環(huán)境監(jiān)測和實驗室分析測定時，常常使用三氯/甲烷、四氯化碳和石油醚等有機溶劑。這些試劑化學(xué)性質(zhì)不活潑、不助燃，與酸、堿不起作用，處理起來比較困難。其易揮發(fā)，具有一定的毒性，污染環(huán)境。本文根據(jù)實驗室試驗及使用試劑的要求，探討有機試劑的回收和循環(huán)利用。一、回收方法：1.活性碳吸附法活性碳吸附法回收有機廢液裝置，在長吸附柱底部裝入一層脫脂棉，起過濾作用，防止活性/碳粉末隨廢液流入回收瓶中，同時可以進一步除去廢液中剩余的水分；在吸附柱中部裝入顆粒狀活性碳(粉末狀活性碳過濾性能差，易堵塞吸附柱)，除去廢液

核酸鑒定方法之濃度/純度及完整性鑒定2022/05/19

核酸純化在分子生物學(xué)實驗室已經(jīng)廣泛應(yīng)用。怎樣獲得高質(zhì)量、高純度的DNA或RNA樣品對下游實驗的順利進行至關(guān)重要，因此，對純化后的核酸進行鑒定也是必不/可少的步驟。本文簡單的回顧學(xué)習(xí)一下核酸鑒定的方法。核酸鑒定包括：濃度/純度鑒定+完整性鑒定1.濃度/純度鑒定（1）紫外分光光度計：原理：由于核酸中的堿基都具有共軛雙鍵，所以具有紫外光吸收性質(zhì)。核酸在紫外光譜區(qū)有一條典型的吸收曲線，其吸收高峰在260nm處，吸收低谷在230nm處。蛋白質(zhì)在紫外區(qū)的吸收高峰在280nm處，所以核酸的紫外吸收光譜數(shù)據(jù)是鑒

遠(yuǎn)慕淺談分析試劑的常用規(guī)格2022/05/19

優(yōu)級純或一級品（GR，精密分析和科學(xué)研究工作）；分析純或二級品（AR，重要分析和一般研究工作）；化學(xué)純或三級品（CP，工礦及學(xué)校一般化學(xué)實驗）；實驗試劑(L.P.)?；鶞?zhǔn)試劑含量應(yīng)該是99.9%～100.2%。隨著科學(xué)技術(shù)和新興工業(yè)的發(fā)展，對化學(xué)試劑的純度、凈度以及精密度要求愈加嚴(yán)格和專門化。在分析化學(xué)中應(yīng)用極為廣泛。試劑的品級與規(guī)格應(yīng)根據(jù)具體要求和使用情況加以選擇。定級的根據(jù)是試劑的純度（即含量）、雜質(zhì)含量、提純的難易，以及各項物理性質(zhì)。有時也根據(jù)用途來定級，例如光譜純試劑、色譜純試劑，以及p

幾種常見的細(xì)胞因子抑制劑了解一下2022/05/18

1、抗細(xì)胞因子或其受體的抗體在正常人身上可以檢測到微量的抗細(xì)胞因子抗體。這些抗體的功能還有待進一步探索。其中有些抗體可以起到抑制細(xì)胞因子的作用，有些抗體則可以延長細(xì)胞因子的半衰期。用細(xì)胞因子或其受體作為免疫原對動物進行免疫而獲得的抗體，特別是某些單克隆抗體對細(xì)胞因子有很強的抑制作用，可用于治療由細(xì)胞因子引起的疾病。目前，一些抗細(xì)胞因子單克隆抗體已進入人體試驗階段，如治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的抗人IL-6單克隆抗體、治療急性移植物抗宿主反應(yīng)的抗人IL-2受體抗體或抗TNF抗體、治療多發(fā)性骨髓瘤的抗人IL-

遠(yuǎn)慕淺談細(xì)胞因子常見指標(biāo)2022/05/18

（一）根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞種類不同分類1.淋巴因子（lymphokine)于命名，主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，包括T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等。重要的淋巴因子有IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IFN-γ、TNF-β、GM-CSF和神經(jīng)白細(xì)胞素等。2.單核因子（monokine）主要由單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、G-CSF和M-CSF等。3.非淋巴細(xì)胞、非單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子

peprotech細(xì)胞因子的溶解方法2022/05/18

PeproTech細(xì)胞因子中不含載體蛋白（CarrierProtein）或其他添加劑（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以最少量的鹽來進行凍干處理，因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后，務(wù)必在開蓋前先離心，使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底（此時能否見到白色沉淀均屬正?，F(xiàn)象）。1．離心：高速離心(10,000rpm)20-30秒，或低速離心(2,000rpm)5分鐘。2．溶解（Reconstitution）：用去離子水或其它緩沖液（根據(jù)

流式CBA法用于細(xì)胞因子檢測的優(yōu)點及缺點2022/05/18

細(xì)胞因子在體內(nèi)具有重要的病理作用，在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態(tài)下，部分細(xì)胞因子會明顯變化，根據(jù)這些指標(biāo)可以判斷機體的免疫功能。血清、血漿或組織液中細(xì)胞因子檢測可以對疾病診斷和治療做出相應(yīng)評價,具有重要的應(yīng)用價值。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)以及腫瘤學(xué)等領(lǐng)域的流式細(xì)胞術(shù)是細(xì)胞因子檢測的一種方法。由于血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清、積液中的細(xì)胞因子含量低，不容易檢測，加上樣本數(shù)量少，傳統(tǒng)的方法無法滿足多因子檢測。流式微球捕獲芯片技術(shù)（CBA）微量樣本多重蛋白定量技術(shù)，是用流式細(xì)胞儀對多重蛋白進行

細(xì)胞因子溶解操作方法及注意事項2022/05/17

1．離心：高速離心(10,000rpm)20-30秒，或低速離心(2,000rpm)5分鐘。2．溶解（Reconstitution）：用去離子水或其它緩沖液（根據(jù)說明書要求進行選擇）溶解至說明書要求的濃度(一般為0.1-1.0mg/mL，如10ug的產(chǎn)品，需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。溶解時不可振蕩，避免因化學(xué)鍵的斷裂造成蛋白失活，可加入適當(dāng)?shù)娜軇┹p搖并靜置一段時間，待細(xì)胞因子*溶解后使用。溶劑的選擇：1）要求用去離子水溶解的產(chǎn)品，務(wù)必不可用鹽溶液，避免過高的鹽濃度造成蛋白不

TRIZOL提取RNA的詳細(xì)步驟2022/05/17

1、在提取組織RNA時，每50～100mg組織用1mlTrizol試劑對組織進行裂解；提取細(xì)胞RNA時，先離心沉淀細(xì)胞，每5-10╳106個細(xì)胞加1mlTrizol后，反復(fù)用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細(xì)胞。2、將組織或細(xì)胞的Trizol裂解液轉(zhuǎn)入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘；在EP管中，按照每1mlTRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿，蓋上EP管蓋子，在手中用力震蕩15秒，在室溫下（15℃～30℃）放置2～3分鐘后，12000g（2℃～8℃）離心15分鐘。3、取上層水相置于新EP管中

如何選擇牛血清白蛋白種類？2022/05/17

牛血清白蛋白(BSA)產(chǎn)品種類繁多，可滿足不同種的應(yīng)用。但是該怎么選擇呢，目前BSA大致分為標(biāo)準(zhǔn)級BSA、BSA第五組分、無IgG試劑級BSA、無蛋白酶BSA、無脂肪酸BSA、低內(nèi)毒素BSA、無蛋白酶/IgGBSA、診斷級BSA。我們一起來看一下他們的區(qū)別：標(biāo)準(zhǔn)級BSA經(jīng)熱處理的普通BSA產(chǎn)品，可作為組織細(xì)胞（微生物、動物及昆蟲細(xì)胞等）培養(yǎng)養(yǎng)料和培養(yǎng)成分以及蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)組份，為性價比較高的BSA產(chǎn)品，BSA第五組分BSA第五組分較普通的BSA純度更高。BSA第五組分使用Cohn方法純化而來，是

牛血清白蛋白的相關(guān)知識點！2022/05/17

牛血清白蛋白，稱牛血清蛋白，又稱第五組分，英文名稱為BovineSerumAlbumin，也稱Bovinealbumin，或CohnFractionV，簡稱BSA。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用，例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性。狀態(tài)：白色結(jié)晶或類白色冷凍干燥粉末;溶解性：溶于水，難

實驗動物血液標(biāo)本的選擇及處理2022/05/16

實驗動物血液標(biāo)本的處理-----系列一血液標(biāo)本的選擇一般血液標(biāo)本分為全血、血漿和血清。1、全血全血一般加入適當(dāng)?shù)目鼓齽?，使血液不產(chǎn)生凝固含有形成分的標(biāo)本，常用于碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白、硫血紅蛋白、細(xì)胞培養(yǎng)等的測定，及制備血中各種細(xì)胞和全血分析用。2、血漿血漿是全血去除細(xì)胞成分后剩余部分的標(biāo)本，比血清分離快且量多。多用于血液凝固機制等方面的檢驗。3、血清血清是血漿除去凝血因子纖維蛋白原的標(biāo)本。血液離體后由于激活一系列凝血因子，最終形成纖維蛋白而使血液凝固，析出的澄清黃色透明液體就是血清。血清成

ELISA檢測血清的詳細(xì)事項2022/05/16

大部分elisa檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集，應(yīng)留意防止溶血，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會添加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會發(fā)生假陽性反應(yīng)。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃。超越一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，弄清后再檢測。重復(fù)凍融會使抗體效價下跌，所

ELISA實驗怎么判斷結(jié)果的準(zhǔn)確性？2022/05/16

ELISA實驗已經(jīng)做完，做出來的數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確，有沒有達(dá)到自己的預(yù)期，這些都是有很多條件決定的，具體有哪些條件呢，今天就讓遠(yuǎn)慕生物為您介紹！首先要選擇優(yōu)質(zhì)的試劑優(yōu)質(zhì)的試劑是良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述

血清或(血漿)標(biāo)本的處理方法2022/05/16

檢驗科收到臨床標(biāo)本后，應(yīng)盡快低速離心分離血清或血漿進行測定。45℃水浴10分鐘，再3000r/min離心5分鐘，即可使LDH、K等顯著升高。對血液標(biāo)本外觀觀察是判斷標(biāo)本質(zhì)量的最直觀的方法，外觀異常有溶血、黃疸、脂血等情形，是引起測定誤差最常見的因素。(1)標(biāo)本的離心離心分離血清應(yīng)選擇相對離心力(RCF)為1000g～1200g，離心時間為5～10分鐘。增加相對離心力或增加離心時間，都易引起溶血。(2)溶血標(biāo)本的處理溶血可導(dǎo)致RBC內(nèi)多種成分的釋出，引起對測定方法的干擾，Hb≥0.2g/L，肉眼可

抗生素類藥物殘留介紹2022/05/13

1、β-內(nèi)酰胺類(β-lactams)內(nèi)酰胺類抗生素族包括了種類繁多的天然和半合成化合物,所有的這些物質(zhì)都含有基本的具抗生素活性的內(nèi)酰胺環(huán)。內(nèi)酰胺類抗生素(青/霉/素和頭孢/菌素類)主要是用于抗革蘭氏陽性細(xì)菌感染。然而,該類藥物中部分也能有效抑制革蘭氏陰性菌。至今已有9類β-內(nèi)酰胺類抗生素被認(rèn)可。盡管僅有少數(shù)的這類化合物被用來治療養(yǎng)殖動物,然而,這就有可能以殘留物形式出現(xiàn)在食品中。青/霉/素G因其價廉和廣譜,盡管它僅對革蘭氏陽性菌有效,仍被廣泛地用于治療養(yǎng)殖動物,并頻繁地超標(biāo)示劑量使用。在牛養(yǎng)殖

細(xì)胞培養(yǎng)中抗生素如何使用？2022/05/13

抗生素1.細(xì)胞庫之細(xì)胞培養(yǎng)基不加抗生素1.1.培養(yǎng)自ATCC引進之細(xì)胞株，培養(yǎng)基中不加抗生素1.2.培養(yǎng)自其它實驗室引進之細(xì)胞株，制作tokenfreeze前培養(yǎng)基須添加抗生素，待tokenfreeze通過污染測試后，大量培養(yǎng)時則不加抗生素。2.寄送活細(xì)胞時，須將培養(yǎng)液充滿整個flask時，則須添加抗生素(penicillin100units/ml+streptomycin100ug/ml)。3.若要檢測mycoplasma，則培養(yǎng)基內(nèi)不可添加gentamicin，因gentamicin會抑制m