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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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實驗室用水的等級標(biāo)準(zhǔn)|分類方式2022/05/13
一.評價水質(zhì)的常用指標(biāo)有哪些?1、電阻率(electricalresistivity):衡量實驗室用水導(dǎo)電性能的指標(biāo),單位為MΩ-cm,隨著水內(nèi)無機(jī)離子的減少電阻加大則數(shù)值逐漸變大,實驗室超純水的標(biāo)準(zhǔn):電阻率為18.2MΩ-cm。2、總有機(jī)碳(TotalOrganicCarbon,TOC):水中碳的濃度,反映水中氧化的有機(jī)化合物的含量,單位為ppm或ppb。3、內(nèi)毒素(Endotoxin):革蘭氏陰性細(xì)菌的脂多糖細(xì)胞壁碎片,又稱之為“熱原”,單位cuf/ml。二.按照用途進(jìn)行分類,實驗室用水可以
高純水/超純水水質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)是什么2022/05/13
純凈水,指的是不含雜質(zhì)的H2O。從學(xué)術(shù)角度講,純凈水又稱純水、高純水,是指化學(xué)純度*的水,其主要應(yīng)用在生物、化學(xué)化工、冶金、宇航、電力等領(lǐng)域,但其對水質(zhì)純度要求相當(dāng)高,所以一般應(yīng)用zui普遍的還是電子工業(yè)。純水和超純水一般都沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),通常水的純度是以其電阻率(或電導(dǎo)率)來表證;也有根據(jù)用戶的需求來規(guī)定。一般意義上講純水至少應(yīng)該是去離子水,即水中大部分陰陽離子是應(yīng)該被去除的。細(xì)菌、懸浮物等的含量也應(yīng)是相當(dāng)?shù)偷?。目前水質(zhì)要求zui高的超純水是半導(dǎo)體行業(yè),根據(jù)半導(dǎo)體芯片的大小和線徑的不同水質(zhì)要求
液體培養(yǎng)基中細(xì)菌培養(yǎng)實驗2022/05/12
儀器、耗材玻璃瓶燒瓶實驗步驟一、過夜培養(yǎng)1.將5ml預(yù)熱的液體培養(yǎng)基移入一無菌的16mm或18mm管中。2.用接種環(huán)挑一個單菌落,浸沒于培養(yǎng)液中并輕輕振動接種環(huán),使待接種的細(xì)菌分散在培養(yǎng)液中。3.蓋好試管,在搖床或轉(zhuǎn)鼓式培養(yǎng)裝置上以60r/min速度,于37°C培養(yǎng)至飽和(1X109~2X109細(xì)胞/ml,6h)。二、大體積培養(yǎng)1.在一無菌的Erlenmeyer或baffle瓶中,用新鮮預(yù)熱的培養(yǎng)液按I1:100的比例稀釋過夜培養(yǎng)物,燒瓶的體積應(yīng)該是培養(yǎng)液體積的5倍以上。如果不搖動培養(yǎng),所用燒瓶
生化培養(yǎng)箱與霉菌培養(yǎng)箱的區(qū)別2022/05/12
生化培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)菌、霉菌、微生物、組織細(xì)胞的培養(yǎng)保存以及水質(zhì)分析與BOD測試,適合育種試驗、植物栽培。是生物、遺傳工程、醫(yī)學(xué)、衛(wèi)生防疫、環(huán)境保護(hù)、農(nóng)林畜牧等行業(yè)的科研機(jī)構(gòu)、大專院校、生產(chǎn)單位或部門實驗室的重要試驗設(shè)備。1.生化培養(yǎng)箱也叫BOD培養(yǎng)箱,是一種集加熱、制冷功能于一體的實驗室常用設(shè)備,主要用于水體分析的BOD測定;細(xì)菌、血清、微生物的培養(yǎng)、保存,植物栽培及育種試驗;酶學(xué)及酶工程研究;生物、醫(yī)用制品、疫苗、血液及各種標(biāo)本的保存及老化試驗及其他用途的恒溫試驗。2.霉菌培養(yǎng)箱具有加熱、
微生物菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)技術(shù)2022/05/12
菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)是發(fā)酵生產(chǎn)的第一道工序,該工序又稱之為種子制備。種子制備不僅要使菌體數(shù)量增加,更重要的是,經(jīng)過種子制備培養(yǎng)出具有高質(zhì)量的生產(chǎn)種子供發(fā)酵生產(chǎn)使用。因此,如何提供發(fā)酵產(chǎn)量高、生產(chǎn)性能穩(wěn)定、數(shù)量足夠而且不被其他雜菌污染的生產(chǎn)菌種,是種子制備工藝的關(guān)鍵。種子擴(kuò)大培養(yǎng)的任務(wù)工業(yè)生產(chǎn)規(guī)模越大,每次發(fā)酵所需的種子就越多。要使小小的微生物在幾十小時的較短時間內(nèi),完成如此巨大的發(fā)酵轉(zhuǎn)化任務(wù),那就必須具備數(shù)量巨大的微生物細(xì)胞才行。菌種擴(kuò)大培養(yǎng)的目的就是要為每次發(fā)酵罐的投料提供相當(dāng)數(shù)量的代謝旺盛的種子。
遠(yuǎn)慕技術(shù):生物菌種凍干保存步驟2022/05/12
凍干機(jī)適用于大多數(shù)細(xì)菌、放線菌、病毒、噬菌體、立克次體、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏,但不適于霉菌的菌絲型、菇類、藻類和原蟲等。生物菌種凍干保存步驟,其操作流程如下:1、安瓿管準(zhǔn)備安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性,干燥后、貼上標(biāo)簽,標(biāo)上菌號及時間,加入脫脂棉塞后,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。2、保護(hù)劑的選擇和準(zhǔn)備保護(hù)劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護(hù)劑時,應(yīng)注意其濃度及pH值,以及滅菌方法。如血清,可用過濾滅菌
基因組DNA提取純化的注意事項2022/05/11
大多數(shù)動物組織可以用裂解緩沖液和蛋白酶/蛋白酶K進(jìn)行高效裂解。在加入裂解液之前需要將組織切成小塊,有條件的話建議使用TissueLyser或研缽等提前進(jìn)行均質(zhì)化。骨骼肌,心臟,皮膚等組織含有收縮蛋白,結(jié)締組織和膠原蛋白,所以利用蛋白酶/蛋白酶K進(jìn)行充分消化是必須的。FFPE樣本進(jìn)行DNA純化時需要預(yù)裂解。福爾馬林可由PBS洗滌除去,石蠟可由二甲苯和乙醇進(jìn)行去除。在蛋白酶消化后提高孵育的溫度有助于逆轉(zhuǎn)交聯(lián),以便更好的從FFPE組織中釋放DNA,從而有助于提高DNA產(chǎn)量和改善下游檢測性能。從FFPE
蛋白酶K的使用方法、作用及配制2022/05/11
蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強(qiáng)力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內(nèi)及高溫(50?70°C)均有活性,用于質(zhì)?;蚧蚪MDNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白,使DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進(jìn)行抽提,除去雜質(zhì),收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋白酶K貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。貯存于一20°C。蛋白酶K溶液為無色透明,如出現(xiàn)沉淀就不能再使用。蛋白酶K,是
蛋白示蹤上樣緩沖液(還原,5x)操作步驟2022/05/11
蛋白示蹤上樣緩沖液(還原,5×)適用于還原型SDS-PAGE電泳前的蛋白樣品處理。本產(chǎn)品含有兩種示蹤染料,分別是藍(lán)色的溴酚藍(lán)和紅色的派洛寧γ,可實時監(jiān)控蛋白樣品的電泳進(jìn)程。同時,在凝膠上顯現(xiàn)的紅色條帶可伴隨蛋白樣品轉(zhuǎn)移至印跡膜上,因此本產(chǎn)品具有檢測WesternBlotting轉(zhuǎn)膜效率的作用。使用本產(chǎn)品操作簡單,用法與普通上樣緩沖液相同。注意事項1.為避免產(chǎn)品的反復(fù)凍融,建議分裝后保存。產(chǎn)品在使用中,可保存在2-8℃條件下,時間不宜過久。2.本產(chǎn)品在不同的膠濃度中,紅色染料與溴酚藍(lán)泳動的
抗體和重組蛋白使用以及保存方法2022/05/11
無論是保存還是運輸,請避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融,冰晶會破壞抗體和重組蛋白的空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致蛋白變性形成多聚體和重組蛋白構(gòu)象改變,從而降低抗體的結(jié)合能力,也加快了抗體球蛋白和重組蛋白的降解速度。抗體和重組蛋白保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體和重組蛋白的活性使用效果,如果保存得當(dāng),抗體和重組蛋白活性大部分都可以維持?jǐn)?shù)年。1.收到抗體和重組蛋白后的操作收到抗體和重組蛋白后(大部分抗體和重組蛋白是溶液態(tài)),請務(wù)必在4℃,12000rpm,離心3分鐘,再打開管蓋進(jìn)行分裝、溶解和保存(如果抗體和重組蛋白體積小于50
生物大分子的色譜純化方法2022/05/10
一、生物大分子色譜純化方法的選擇思路通常在做純化前對自己的目標(biāo)物質(zhì)特性了解越多對純化將會越有利,如果不太了解,也可以通過電泳知道目標(biāo)物質(zhì)和雜質(zhì)的情況,找到一種簡單的鑒定方法,此外在純化前必須先建立可靠的活性測定的方法。如果是未知的蛋白,那么通??梢杂袔追N簡單的摸索:1.凝膠過濾色譜。這個方法很常用,但是效率不高,對低濃度的樣品沒有富集作用,上樣量小。2.離子交換色譜。此法很常用,但是樣品必須沒有高濃度的鹽。3.疏水色譜。此法較好,它分離效率高,上樣量大,特別適合分離鹽析沉淀的樣品。4.親和色譜。
瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA質(zhì)量2022/05/10
一.原理帶電荷的物質(zhì)在電場中的趨向運動稱為電泳。其中,凝膠電泳由于其操作簡便、快速、靈敏等優(yōu)點,使它成為分離、鑒定和提純核酸的首/選標(biāo)準(zhǔn)方法。與蛋白質(zhì)分子類似,核酸分子也是兩性解離分子。在pH3.5時,堿基上的氨基基團(tuán)解離,而三個磷酸基團(tuán)中只有第一個磷酸解離,整個分子帶正電荷,在電場中向負(fù)極泳動;在pH值為8.0-8.3時,堿基幾乎不解離,磷酸全部解離,核酸分子帶負(fù)電荷,向正極移動。不同大小和構(gòu)象的核酸分子的電荷密度大致相同,在自由泳動時,各核酸分子的遷移率區(qū)別很小,難以分開。所以采用適應(yīng)濃度的
關(guān)于電泳技術(shù)遠(yuǎn)慕生物有話要說~2022/05/10
一、基本知識和種類電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現(xiàn)象。例如蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì)。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液的pH在蛋白質(zhì)等電點的堿側(cè)時,該蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負(fù)極移動,只有蛋白質(zhì)溶液pH在蛋白質(zhì)的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。電泳現(xiàn)象早在1890年就被發(fā)現(xiàn),1907年有人曾在瓊脂中電泳,研究白喉毒素。1937年由Tiselius制成界面電泳儀,并開始用于蛋白質(zhì)的研究。從此,人們才逐漸認(rèn)識到電泳技術(shù)對于生物科學(xué)研究是一種重要工具。
遠(yuǎn)慕整理超全的微生物檢測注意事項!2022/05/10
培養(yǎng)基的滅菌及使用1.每次配置時,要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質(zhì),并且未吸潮。2.培養(yǎng)基配置時,稱量要準(zhǔn)確,包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確。3.一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌,未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長時間放置,更不可隔夜。4.滅菌時要保證恒溫、恒壓,同時要保證有效滅菌時間。5.滅菌過的培養(yǎng)基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過3天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。6.在使用時,要根據(jù)當(dāng)班次的使用量,用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),然后及時調(diào)低水域溫度(先化好的可
遠(yuǎn)慕技術(shù):全血DNA、RNA提取方法2022/05/09
從全血中提取DNA和RNA應(yīng)該說是最基本的工作了,提取的DNA和RNA質(zhì)量的好壞直接影響了下游的實驗和分析,可供選擇的方法非常多,亂花漸欲迷人眼,如何選擇最/適合的方法,成了很多人實驗開始前最難以抉擇的事情。我們從兩個方面,層層剝繭,分析最/佳的實驗方法。1、全血的采集保存和DNA的提取I.用含抗凝劑的采血管進(jìn)行采血,抗凝劑一般有EDTA和肝素,EDTA更好一些,不會影響下游的反應(yīng),如果沒有采血管,也可以自己添加抗凝劑EDTA,提前準(zhǔn)備0.04M的EDTA溶液,每5ml的血液中加入0.4ml配好
DNA的不同提取方法比較2022/05/09
DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上,多次苯/酚氯仿等有機(jī)溶劑抽提使蛋白質(zhì)變性沉淀于有機(jī)相,而核酸保留在水相,達(dá)到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過程中殘留的有機(jī)溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應(yīng),最后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復(fù)合物,此復(fù)合物在高鹽(0.7mol/L)濃度下可溶,并穩(wěn)定
細(xì)菌實驗室是細(xì)菌培養(yǎng)的基本條件2022/05/09
細(xì)菌培養(yǎng)的基本條件:細(xì)菌實驗室是檢驗主管技師考試輔導(dǎo)的部分內(nèi)容,以下是遠(yuǎn)慕生物的整理,希望對大家有所幫助:細(xì)菌實驗室是進(jìn)行細(xì)菌學(xué)實驗的場所。標(biāo)本的接種、培養(yǎng)、分離、鑒定及藥敏試驗等工作都要在此完成。所以細(xì)菌室應(yīng)該符合一定的條件。1.細(xì)菌室必須安裝嚴(yán)密的門窗,以防室內(nèi)環(huán)境受到外界的污染。且室內(nèi)禁用風(fēng)扇,避免細(xì)菌的播散。2.細(xì)菌室必須安裝供空氣消毒的紫外線燈,置于操作臺上面lm處,每天開始工作前照射20min.對其消毒效果要定期檢查,及時更換失效的燈管。3.室內(nèi)應(yīng)備有消毒劑,用于試驗中發(fā)生菌液灑濺時
細(xì)菌冷凍保存實驗方法2022/05/09
實驗概要速凍,是將樣品快速用干冰或液氮保存于-70°C或更低的溫度中。速凍能夠達(dá)到和緩慢控速冷凍相同的目的,效果大約為-10-1000°C/min,但達(dá)不到-1°C/分鐘。用CoolRack?液速凍樣本能夠保持樣本體積的穩(wěn)定、組織結(jié)構(gòu)完整、恒定的凍結(jié)參數(shù),快速免提樣本是能避免丟失或污染的樣品。在預(yù)冷CoolRack的前提下進(jìn)行速凍,這能確保傳熱快。這種方法可以提供優(yōu)良的標(biāo)本的完整性和各類分析選擇,包括在研究和診斷中蛋白質(zhì)、DNA和RNA的提取。本實驗提供長時間冷凍細(xì)菌的常規(guī)方法。主要試劑細(xì)菌樣品
金屬標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定2022/05/07
自行配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液必須具備8個基本要求1.應(yīng)采用具有高純度的溶質(zhì)或基準(zhǔn)物質(zhì)(如金屬、金屬氧化物或金屬化合物;酸、堿、金屬有機(jī)化合物、適宜的鹽類、有機(jī)溶劑等)。2.為確保配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的可靠性、準(zhǔn)確性,實驗室的設(shè)備、環(huán)境設(shè)施均應(yīng)滿足其要求,(應(yīng)有監(jiān)測、控制和記錄環(huán)境條件。特別對灰塵、電磁干擾、放射、溫度、濕度、供電等)。3.具有符合稱量要求器具、應(yīng)有正確稱量的電子分析天平,并通過周期性的檢定,有質(zhì)檢部門檢定的證書。4.要有配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的純度高的溶劑(采用雙重蒸餾去離子水、高純濃度的酸、堿或有機(jī)溶液)
常用標(biāo)準(zhǔn)溶液(水溶液)的配制和標(biāo)定2022/05/07
常用標(biāo)準(zhǔn)溶液(水溶液)的配制和標(biāo)定1標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定用優(yōu)級純以上的酸、堿或強(qiáng)溶解性的相應(yīng)鹽類等基準(zhǔn)物質(zhì),用雙重蒸餾去離子水溶解于容量瓶中,并定容至所需的貯備溶液,濃度為(mol/L),并按要求選取潔凈容器盛裝,貼好標(biāo)簽,按規(guī)范要求貯存。2標(biāo)定物質(zhì)應(yīng)選用基準(zhǔn)物質(zhì)的純試劑作為標(biāo)定物質(zhì),標(biāo)定前應(yīng)干燥至恒重,并準(zhǔn)確稱取。3標(biāo)定過程標(biāo)準(zhǔn)溶液在標(biāo)定過程中,嚴(yán)格執(zhí)行2人雙平行標(biāo)定,用精確的標(biāo)定物,對標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行標(biāo)定、計算,在誤差很小,數(shù)據(jù)又相當(dāng)接近的情況下,則取平均值為該標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。4標(biāo)定時間常溫下1.00
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