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實(shí)驗(yàn)耗材：離心管也有很多種類(lèi)2022/04/27: 根據(jù)其材質(zhì)的不同總體可以分為塑料和玻璃的，塑料的離心管用的較多，又可以分為PP、PC、PS等，根據(jù)不同需要，生產(chǎn)廠(chǎng)家會(huì)選擇不同的塑料材料來(lái)進(jìn)行制作。根據(jù)其大小，又分為1.5mL、2mL、5mL、10mL、15mL、50mL等，國(guó)產(chǎn)的離心管一般就是這幾個(gè)規(guī)格，用的較多的也就是10mL和50mL的。如果您的離心機(jī)是配30mL或者其他規(guī)格的離心管時(shí)，就要考慮進(jìn)口的了。另外，離心管還有圓底和尖底，以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度，插蓋的只有一個(gè)總體的容量標(biāo)示。實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料

淺談“內(nèi)標(biāo)法”知識(shí)，實(shí)驗(yàn)人收藏起來(lái)！2022/04/27: 內(nèi)標(biāo)法是結(jié)合了峰面積歸一法和外標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)的一種方法，它在加入內(nèi)標(biāo)物后，按峰面積歸一法的分析方法進(jìn)行分析，這就避免了由于進(jìn)樣的一致性及樣品歧視效應(yīng)導(dǎo)致的偶然誤差。因而，它的分析精密度也是比較高的，是一種比較理想的定量分析方法。內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)缺點(diǎn)內(nèi)標(biāo)法對(duì)進(jìn)樣量不嚴(yán)格要求，測(cè)定的結(jié)果也較為準(zhǔn)確，由于通過(guò)測(cè)量?jī)?nèi)標(biāo)物及被測(cè)組分的峰面積的相對(duì)值來(lái)進(jìn)行計(jì)算的，因而在一定程度上消除了進(jìn)樣量、儀器不穩(wěn)定等變化所引起的誤差，只對(duì)欲分析的組分峰做校正。不過(guò)內(nèi)標(biāo)法必須加一個(gè)組分進(jìn)到樣品，易增加面積測(cè)量誤差。操作程序較為麻煩

液相使用小雷區(qū)，趕緊來(lái)避開(kāi)！2022/04/27: 液相操作中，有一些小細(xì)節(jié)上的誤操作在精益求精的實(shí)驗(yàn)室人看來(lái)是要盡可能避免的，細(xì)節(jié)雖小，影響很大。遠(yuǎn)慕生物這就帶各位小伙伴們看一看，這些錯(cuò)誤你們有犯過(guò)嗎？犯過(guò)不怕，記得改正哦~加入有機(jī)相之后再測(cè)量流動(dòng)相的PH值作為液相色譜的基礎(chǔ)，流動(dòng)相的各項(xiàng)參數(shù)是保障實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的重中之重，特別是PH值。通常情況下對(duì)流動(dòng)相PH值的測(cè)量是測(cè)量水相中的PH值參數(shù)，而在加入有機(jī)相后PH測(cè)量的PH值是會(huì)產(chǎn)生誤差的。因?yàn)槊恳淮渭尤氲挠袡C(jī)相并不能保證*的同質(zhì)同量，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度。測(cè)量流動(dòng)相的PH值，是測(cè)量水相中的PH值參數(shù)

常見(jiàn)細(xì)胞裂解液及其組分2022/04/26: 在許多細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)、純化及蛋白-蛋白互作等免疫實(shí)驗(yàn)（如WB、IP、Co-IP、ChIP）中，細(xì)胞裂解是關(guān)鍵一步。基本介紹根據(jù)不同細(xì)胞類(lèi)型、蛋白定位及下游應(yīng)用，需要不同的細(xì)胞裂解液進(jìn)行細(xì)胞裂解及蛋白提?。ū?）。表1根據(jù)不同蛋白定位選擇裂解液蛋白定位裂解液全細(xì)胞NP-40、RIPA細(xì)胞質(zhì)（可溶性蛋白）Tris-HCl細(xì)胞質(zhì)（細(xì)胞骨架等不溶性蛋白）Tris-Triton細(xì)胞膜NP-40、RIPA細(xì)胞核RIPA線(xiàn)粒體RIPA差異化比較RIPA裂解液RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液，獲得的

分子構(gòu)建看這篇，從此邁向科研達(dá)人！2022/04/26: 做過(guò)分子實(shí)驗(yàn)的人都知道，要想做的有效率有質(zhì)量是很苦逼的，1個(gè)月做100個(gè)克隆那都是小case，沒(méi)點(diǎn)看家的本事怎么行。如果再遇到比較稀有的基因，周旋個(gè)把月，那也是家常便飯。下面遠(yuǎn)慕生物和大家分享一些載體構(gòu)建的經(jīng)驗(yàn)，從此邁向科研達(dá)人！1.準(zhǔn)備工作俗話(huà)說(shuō)：用欲善其事，必先利其器。建議大家在做構(gòu)建之前先找好工具，效果事半功倍哦。推薦兩個(gè)工具，一個(gè)是oligo軟件，常用于引物設(shè)計(jì)和酶切位點(diǎn)分析；另一個(gè)是DNAstar軟件，工具極/強(qiáng)大，一款全面的生物醫(yī)學(xué)軟件，用作DNA和蛋白質(zhì)序列分析、重疊群拼接和基因工

你真的了解 TA 克隆嗎？2022/04/26: 首先，TA克隆是用于PCR產(chǎn)物的克隆和測(cè)序。原理是利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個(gè)非模板依賴(lài)的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以快速地、一步到位地把PCR產(chǎn)物直接插入到質(zhì)粒載體的多克隆位點(diǎn)中。那么在你做TA克隆時(shí)，需要準(zhǔn)備的前期工作是什么呢？1、設(shè)計(jì)引物P出你的目的基因不管你是手動(dòng)設(shè)計(jì)還是軟件設(shè)計(jì)或是直接引用別人已經(jīng)發(fā)表文章用到的引物，只要能P出來(lái)目的片段就行，在PCR的結(jié)果中需要注重P出來(lái)的濃度，要達(dá)到濃度高的要求一方面是在前期的樣本準(zhǔn)備本身就得到高濃

藥敏試驗(yàn)（K-B法）的影響因素2022/04/26: 近年來(lái)，細(xì)菌感染性疾病嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的健康，抗生素的合理使用是治療和控制此類(lèi)疾病的有效手段，抗生素體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果的正確與否對(duì)抗生素的選擇至關(guān)重要，藥敏試驗(yàn)的結(jié)果受到諸多因素的影響，如培養(yǎng)基、試紙片以及菌液的濃度等。1、培養(yǎng)基細(xì)菌藥敏試驗(yàn)所用的培養(yǎng)基種類(lèi)較多，多數(shù)情況下，采用WHO組織統(tǒng)一要求的M-H培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基中含有的低胸腺嘧啶是與磺胺類(lèi)藥物競(jìng)爭(zhēng)的物質(zhì)，因此進(jìn)行的藥敏試驗(yàn)效果較好。此外，還有適量的Ca2+、Mg2+，在培養(yǎng)基中起到觸媒的作用。但是，有些細(xì)菌對(duì)培養(yǎng)基中的成分有特殊的要求，特

RNAi：制備siRNAs的方法2022/04/25: 越來(lái)越多的研究人員開(kāi)始采用小分子干擾RNA（smallinterferingRNAs，siRNAs)來(lái)抑制特定的哺乳動(dòng)物基因表達(dá)。siRNA是一種短片斷雙鏈RNA分子，能夠以同源互補(bǔ)序列的mRNA為靶目標(biāo)降解特定的mRNA，這個(gè)過(guò)程就是RNA干擾途徑（RNAinterferencepathway）。RNAi的應(yīng)用包括功能基因組學(xué)，藥物靶篩選，細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路分析等等。目前為止較為常用的5種制備siRNAs的方法包括·化學(xué)合成·體外轉(zhuǎn)錄·長(zhǎng)片斷dsRNAs經(jīng)RNaseIII類(lèi)降解(e.g.Dice

遠(yuǎn)慕實(shí)驗(yàn)：動(dòng)物組織中DNA的制備2022/04/25: （一）原理DNA是所有生物體的基本組成物質(zhì)。真核生物DNA主要存在于細(xì)胞核中。制備DNA時(shí)應(yīng)將細(xì)胞核膜打破方能釋放出來(lái)。細(xì)胞中的DNA和RNA分別與蛋白質(zhì)相結(jié)合，形成脫氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在細(xì)胞破碎后，這兩種核蛋白將混雜在一起。因此，要制備DNA首先要將這兩種核蛋白分開(kāi)。已知這兩種核蛋白在不同濃度的鹽溶液中具有不同的溶解度，如在0.15mol/LNaC1的稀鹽溶液中核糖核蛋白的溶解度最大，脫氧核糖核蛋白的溶解度則最?。▋H約為在純水中的1%）；而在lmol/LNaCl的濃鹽溶液中，脫氧核糖核

一文了解溶/菌酶的制備鑒定2022/04/25: 溶菌/酶,全稱(chēng)為1,4-β-N-溶/菌酶,又稱(chēng)粘肽N-乙?；邗Ｋ饷?屬于α-乳白蛋白家族。人們對(duì)溶/菌酶的研究始于上世紀(jì)初,英國(guó)細(xì)菌學(xué)家Fleming發(fā)現(xiàn)人的唾液、眼淚中存在有溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名為溶菌/酶；此后人們?cè)谖⑸?、植物、無(wú)脊椎動(dòng)物和高等動(dòng)物中也發(fā)現(xiàn)了溶/菌酶的存在。其中雞蛋清溶/菌酶的研究和應(yīng)用已相當(dāng)深入和廣泛。另外隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，通過(guò)人工合成基因，用微生物發(fā)酵生產(chǎn)人溶菌/酶的研究也正在深入進(jìn)行之中。雞蛋清溶/菌酶是由129個(gè)氨基酸殘基組成的堿性

如何搞定少量標(biāo)準(zhǔn)品的稱(chēng)量和溶解2022/04/25: 1mg或是幾mg的標(biāo)準(zhǔn)品怎么稱(chēng)量?有人說(shuō)，要用百萬(wàn)分之一天平，用十萬(wàn)分之一的達(dá)不到要求，誤差太大。還有人說(shuō)，在稱(chēng)幾個(gè)mg的標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，最好還是用減量法稱(chēng)量，減量法會(huì)更準(zhǔn)確。但是，少量標(biāo)準(zhǔn)品一般用分析天平稱(chēng)好溶解后，再一步步稀釋得到，而不用一步稱(chēng)到位，再溶解。我們都知道，有些標(biāo)準(zhǔn)品非常昂貴，廠(chǎng)商只能以非常小的包裝提供給客戶(hù)，如1mg\5mg\10mg等，所以，如何高效稱(chēng)量，需要好好判斷好再行動(dòng)哦。標(biāo)準(zhǔn)品的分級(jí)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)將標(biāo)準(zhǔn)品(參考物)的定義暫定為：它的一種或幾種物理或化學(xué)性質(zhì)已經(jīng)充分確定，被

淺談單克隆抗體的應(yīng)用方式2022/04/24: 單克隆抗體問(wèn)世以來(lái)，由于其獨(dú)/有的特征已迅速應(yīng)用于醫(yī)學(xué)很多領(lǐng)域。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。1．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑，單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用，很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于：①病原微生物抗原、抗體的檢測(cè)；②腫瘤抗原的檢測(cè)；③免疫細(xì)胞及其亞群的的檢測(cè)；④激素測(cè)定；⑤細(xì)胞因子的測(cè)定。單克隆抗體對(duì)抗原的識(shí)別，與多克隆抗體

pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液你真的了解嗎2022/04/24: 1.什么是pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液？它有哪些特點(diǎn)？pH緩沖溶液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿，或者在溶液中的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿，以及將溶液適當(dāng)稀釋?zhuān)@個(gè)溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變，這種能對(duì)抗少量酸堿或大或稀釋?zhuān)筽H值不變化的溶液就稱(chēng)為緩沖溶液。pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖液有以下特點(diǎn)：（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值是已知的，并達(dá)到規(guī)定的準(zhǔn)確度；（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值有良好的復(fù)現(xiàn)性和穩(wěn)定性，具有較大的緩沖容量，較小的稀釋值和較小的溫度系數(shù)；（3）溶液的制備方法簡(jiǎn)單；2.如何配制pH標(biāo)準(zhǔn)

遠(yuǎn)慕實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)要求總結(jié)2022/04/24: 一、無(wú)菌操作要求1.接種細(xì)菌時(shí)必須穿工作服、戴工作帽。2.進(jìn)行接種食品樣品時(shí)，必須穿專(zhuān)用的工作服、帽及拖鞋，應(yīng)放在無(wú)菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線(xiàn)消毒后使用。3.接種食品樣品時(shí)，應(yīng)在進(jìn)無(wú)菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟?.進(jìn)行接種所用的吸管，平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開(kāi)包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼三次后使用。5.從包裝中取出吸管時(shí)，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時(shí)，吸管尖不得觸及試管或平皿邊。6.接種樣品、

微生物活性檢測(cè)的幾大影響因素2022/04/24: 微生物活性檢測(cè)的技術(shù)原理是通過(guò)準(zhǔn)確測(cè)量微生物細(xì)胞內(nèi)的三磷酸腺苷（ATP）濃度，來(lái)判斷微生物的活性。微生物細(xì)胞內(nèi)的ATP和熒光酶混合后會(huì)反應(yīng)發(fā)光，通過(guò)測(cè)量發(fā)光的亮度RLU來(lái)計(jì)算ATP濃度，然后再根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式將ATP濃度轉(zhuǎn)化為微生物濃度。微生物活性檢測(cè)的幾大影響要素分析：1.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的比例B：N：P。另外還需要一些微量元素，如鐵、鋅、錳等。2.溫度50-70℃；-5-0℃；是微生物無(wú)法適應(yīng)，直接死亡的危險(xiǎn)溫度。處理污水的各類(lèi)微生物適宜在20-35℃。在適宜的溫度范圍內(nèi)，溫度越高，微生物的活性越強(qiáng)，處

微生物細(xì)胞、植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)上的主要區(qū)別2022/04/22: 微生物細(xì)胞培養(yǎng)，簡(jiǎn)稱(chēng)微生物培養(yǎng)，包括原核細(xì)胞培養(yǎng)（細(xì)菌培養(yǎng)）和真核細(xì)胞培養(yǎng)（霉菌培養(yǎng)和酵母培養(yǎng)）。這些細(xì)胞小、且具有細(xì)胞壁，細(xì)胞周期非常短，如細(xì)菌每20-30min增殖1次。植物細(xì)胞培養(yǎng)指原生質(zhì)體培養(yǎng)。未考慮分離出原生質(zhì)體的植物細(xì)胞培養(yǎng)，無(wú)論是游離的單細(xì)胞或組織塊，都稱(chēng)作植物組織培養(yǎng)。動(dòng)物組織細(xì)胞培養(yǎng)包括接種單細(xì)胞懸液進(jìn)行的培養(yǎng)、接種組織塊進(jìn)行的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞如細(xì)胞株、細(xì)胞系，通常采用接種單細(xì)胞懸液進(jìn)行的培養(yǎng)，是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)的方式。原代細(xì)胞是指來(lái)源于動(dòng)物組織的細(xì)胞團(tuán)塊，往往包含多種細(xì)胞類(lèi)型，

標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品混用情況說(shuō)明2022/04/22: 標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)際上就是大家所說(shuō)的標(biāo)準(zhǔn)物品，它所充當(dāng)?shù)慕巧褪呛饬繕?biāo)準(zhǔn)，專(zhuān)門(mén)用做藥物方面對(duì)照品的一種衡量標(biāo)準(zhǔn)，即為含量測(cè)定中的標(biāo)準(zhǔn)含量。標(biāo)準(zhǔn)品種類(lèi)也是多式多樣的，常見(jiàn)的有冶金標(biāo)準(zhǔn)品、化學(xué)計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)品和藥檢標(biāo)準(zhǔn)品等。雖然標(biāo)準(zhǔn)品與對(duì)照品有一定的區(qū)別，但是標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌坊煊玫默F(xiàn)象是司空見(jiàn)慣的，這就帶來(lái)了一定的麻煩。那么，為什么會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌坊煊玫那闆r呢?下面遠(yuǎn)慕生物來(lái)給大家簡(jiǎn)單分析一下其原因。為什么會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌坊煊玫那闆r呢：(1)衛(wèi)生部提供的對(duì)照品使用說(shuō)明書(shū)不夠詳盡，極其關(guān)鍵部分并沒(méi)有做一個(gè)詳盡的

不同標(biāo)準(zhǔn)品保存方式也不一樣哦2022/04/22: 常見(jiàn)的規(guī)范品的保存辦法有：1，常溫保存：一般用于化學(xué)性質(zhì)比較安穩(wěn)的規(guī)范品，主張保存于干燥陰涼的當(dāng)?shù)亍?，+4度冷藏：用于常溫下不是很安穩(wěn)的物質(zhì)，保存于冰箱冷藏室。3，-20度冷凍：用于化學(xué)性質(zhì)不安穩(wěn)，常溫下容易分化的物質(zhì)。4，-80度保存：一些具有生物活性的物質(zhì)，需求保存于特定的-80度的冰箱。運(yùn)送條件：相關(guān)于長(zhǎng)時(shí)刻保存的條件，運(yùn)送進(jìn)程因?yàn)闀r(shí)刻比較短，所以運(yùn)送條件相對(duì)來(lái)說(shuō)要求沒(méi)有保存條件那么嚴(yán)格。長(zhǎng)時(shí)刻保存條件為常溫和+4度的規(guī)范品都可以在常溫條件下運(yùn)送，-20度保存的規(guī)范品在運(yùn)送時(shí)可以放入冰袋

LC-MS與LC-MS/MS 區(qū)別你知道嗎2022/04/22: LC-MS可以通過(guò)采集質(zhì)譜得到總離子色譜圖。由于電噴霧是一種軟電離源,通常很少或沒(méi)有碎片,譜圖中只有準(zhǔn)分子離子，因而只能提供未知化合物的分子量信息，不能提供結(jié)構(gòu)信息。很難用來(lái)做定性分析，可以用來(lái)定量分析。但單級(jí)MS如果不用軟電離源，而是EI之類(lèi)的話(huà)，就有碎片峰，可以提供分子結(jié)構(gòu)信息。LC-MS/MS采用串聯(lián)質(zhì)譜，既能得到分子離子峰，又有碎片離子峰，因而可以用來(lái)進(jìn)行定性和定量分析。一個(gè)基本相似之處是：他們的應(yīng)用領(lǐng)域都適用于液相適用的領(lǐng)域。質(zhì)譜的最大特點(diǎn)是：它本身是有質(zhì)量信息的，是可以靠這個(gè)質(zhì)量信息

OD值是什么？Elisa試劑盒OD值不正常的原因2022/04/21: OD是opticaldensity（光密度）的縮寫(xiě)，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度，是檢測(cè)方法里的專(zhuān)有名詞，檢測(cè)單位用OD值表示，OD=lg（1/trans），其中trans為檢測(cè)物的透光值。因此又叫通光率，也稱(chēng)吸光度。光通過(guò)被檢測(cè)物，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量，特定波長(zhǎng)下，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。《科技編輯大辭典》對(duì)光密度的定義是：入射光強(qiáng)度與透射光強(qiáng)度之比值的常用對(duì)數(shù)值。專(zhuān)業(yè)書(shū)籍則這樣解釋“吸光度”：入射光和透射光的透過(guò)率之比值的常用對(duì)數(shù)值，也稱(chēng)光密度。分析可見(jiàn)

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