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微生物接種實驗需要注意這些！2022/04/21

微生物在自然界中呈混雜狀態(tài)存在，要獲得所需菌種，必需從中把它們分離出來。在保存菌種時不慎受到到污染也需予以分純。微生物分離和純化的方法很多，但基本原理卻是相似的，即將待分離的樣品進行一定的稀釋，并使微生物的細胞（或孢子）盡量以分散狀態(tài)存在，然后使其長成一個個純種單菌落。然而上述工作又離不開接種，即將一種微生物移到另一滅過菌的培養(yǎng)基上的過程。在接種的過程中需要注意哪些問題呢？（1）接種室應保持清潔，用煤粉酚皂液擦洗臺面及墻壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均應用紫外燈滅菌。定期對接種室作無菌程

蛋白質工程的篩選和選擇技術2022/04/21

蛋白質工程是開發(fā)有用或有價值的蛋白質的過程。它是一門年輕的學科，正在對蛋白質折疊的理解和蛋白質設計原理的識別方面進行大量研究。它也是一個產品和服務市場，到2017年估計價值為1,680億美元。蛋白質工程有兩種通用策略：合理的蛋白質設計和定向進化。這些方法不是互斥的。研究人員經常會同時使用這兩種方法。將來，對蛋白質結構和功能的更詳細了解以及高通量篩選的進步可能會xxx擴展蛋白質工程的能力。最終，甚至可以通過較新的方法（包括擴展的遺傳密碼）包括非天然氨基酸，該方法允許以遺傳密碼編碼新氨基酸。一旦蛋白

瓊脂擴散試驗的影響因素2022/04/21

瓊脂擴散試驗包括瓊脂雙向單擴散試驗和瓊脂雙向雙擴散試驗，后者是最/常用的瓊脂擴散試驗，一般用于抗體或抗原的定性檢測，其原理是可溶性抗原與相應的抗體（抗血清）在瓊脂凝膠中向四周自由擴散，如果抗原和抗體相對應，則在二者比例適當處形成肉眼可見的白色沉淀線，反之則不會出現沉淀線。常用已知抗原檢測未知的血清樣本，也可用已知抗血清檢測未知抗原樣本。1瓊脂擴散試驗的影響因素1.1瓊脂板的制備瓊脂板的質量、濃度、黏度、厚度、濕度等都會影響瓊脂擴散試驗的結果，瓊脂濃度越低，則孔徑越大，擴散速度也會越快；如果瓊脂濃

酶的提取、分離、純化及其活力測定2022/04/20

一、實驗目的酶是植物體內具有催化作用的蛋白質，植物體內的生化反應，一般都是在酶的作用下進行的，沒有酶的催化反應，植物的生命也就停止了，因此對酶的研究是闡明生命現象本質中十分重要的部分。為要研究酶首先要將酶從組織中提取出來，加以分離、純化，不同的研究目的對酶制劑的純度要求也不相同，有些工作只需要粗的酶制劑即可，而有些工作則要求較純的酶制劑，需根據不同情況區(qū)別對待。在酶的提取和純化過程中，自始至終都需要測定酶的活性，通過酶活性的測定以監(jiān)測酶的去向。二、實驗原理（一）酶的提取1.酶的存在位置？存在于動

酶切的基礎知識（酶切原理和實驗過程）2022/04/20

酶切的原理：DNA酶切一般分為質粒直接酶切和PCR產物酶切。限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上，并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類、Ⅱ類、Ⅲ類。Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位點不遠處的DNA，而Ⅲ類酶在識別位點上切割DNA分子，然后從底物上解離。Ⅱ類由兩種酶組成:一種為限制性內切核酸酶(限制酶)，它切割某一特異的核苷酸序列;另一種為獨立的甲基化酶，它修飾

標記免疫分析技術的種類，有何區(qū)別2022/04/20

免疫標記分析技術主要包括：放射物標記、酶標記、發(fā)光標記、熒光標記和金標記方法。1放射物標記分析：用放射物標記抗原或抗體發(fā)展的放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)是美國科學Yalow和Berson于1959年創(chuàng)立的一種微量分析法,它是將具有高靈敏度的放射性核素示蹤技術和特異性免疫化學技術相結合而建立的新方法。該技術利用核素標記物的放大效應,改善了待測物的檢測下限,同時以抗體或抗原作為結合試劑,大大提高了檢測方法的特異性。2熒光標記分析：以熒光標記的熒光免疫分析(fluoresc

免疫分析實驗中常用封閉劑介紹及選擇2022/04/20

在免疫學實驗中，通常使用封閉劑來減少非特異性結合。常用的封閉劑有脫脂奶粉，BSA，血清以及Fab片段單鏈二抗等。根據不同的平臺選擇相應的封閉劑。脫脂奶粉作用原理：脫脂奶粉含有多種蛋白，可以封閉未吸附蛋白的固相載體（WB膜、ELISA板等）位點，減少抗體與之結合的概率，避免非特異性結合帶來的高背景。優(yōu)點：價格便宜，因含多種不同分子量的蛋白，故封閉起來更全面。缺點：成分復雜，適用范圍窄。不適用于生/物素和堿性磷酸酶標記的抗體系統(tǒng)。且封閉后的載體不易長期保存，因此在試劑盒的生產中較少應用。牛血清白蛋白

遠慕淺談實驗中BSA的選擇2022/04/19

牛血清白蛋白（BSA）是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。按照等級從低到高分為：牛血清白蛋白，牛血清白蛋白第五組分，牛血清白蛋白（無必須脂肪酸），牛血清白蛋白（無蛋白酶），牛血清白蛋白（細胞培養(yǎng)級），金標級牛血清白蛋白，交聯牛血清白蛋白。客戶需根據實際情況，選擇合適級別的牛血清白蛋白，下面對各等級的BSA進行簡要說明。一、等級最/低的BSA主要成分是BSA的產品都可以成為牛血清白蛋白，一般是工業(yè)生產使用

你的蛋白質印跡法中檢測不到目的蛋白？2022/04/19

很多小伙伴在對膠片印跡進行短暫曝光后，檢測不到目的蛋白?？蓮囊韵聨讉€方面來優(yōu)化實驗步驟：1、裂解物制備每道全細胞提取物的20–30?g總蛋白，通常足夠用來檢測。如果靶標蛋白的基礎水平，或蛋白質修飾程度低，可能需要通過化學刺激劑來誘導表達或修飾。你可能要調查備選細胞系或組織，其所含的目的蛋白含量更高。應將樣品溶解于適當的緩沖液中，該緩沖液包含蛋白酶抑制劑和針對磷酸化目標的磷酸酶抑制劑。應務必對裂解物進行超聲處理，以確保有效的染色質和膜結合靶標的蛋白質提取。請查看我們網站上的對照物表，獲得推薦的陽性

丙二醇，丁二醇，乙醇三者之間的區(qū)別是什么？2022/04/19

區(qū)別：1、化學式不同。丙二醇：C3H8O2丁二醇：C4H10O2乙醇：C2H5OH2、狀態(tài)不同。丙二醇和丁二醇均為無色粘稠狀液體；乙醇為易燃易揮發(fā)的無色透明液體。3、氣味不同。丙二醇近乎無味，細聞微甜；丁二醇無味；乙醇具有特殊香味，并略帶刺激。4、用處不同。在化妝品中，丙二醇、丁二醇均可做保濕劑且具有一定的抑菌效果；乙醇不能做保濕劑。此外：丙二醇可用作不飽和聚酯樹脂的原料.在化妝品、牙膏和香皂中可與甘油或山/梨醇配合用作潤濕劑。在染發(fā)劑中用作調濕、勻發(fā)劑，也用作防凍劑，還用于玻璃紙、增塑劑和制藥

1,3-丙二醇與甘油的作用區(qū)別2022/04/19

一、物質不同1、1,3-丙二醇1,3-丙二醇是一種化學物質，分子式是C?H?O??？梢园l(fā)生氧化，酯化反應，可以與水混溶，可以混溶于乙醇、乙/醚。在工業(yè)生產中作為有機溶劑被廣泛應用。2、甘油丙三醇，能從空氣中吸收潮氣，也能吸收硫化氫、氰化氫和二氧化硫。難溶于苯、氯仿、四氯化碳、二硫化碳、石油醚和油類。丙三醇是甘油三酯分子的骨架成分。相對密度1.26362。熔點17.8℃。沸點290.0℃（分解）。折光率1.4746。閃點（開杯）176℃。急性毒性：LD50：31500mg/kg(大鼠經口)。二、性

檢驗人眼中的核酸檢測“金標準”到底定義了什么？2022/04/18

隨著疫情的常態(tài)化，大家越來越熟悉新/冠核酸檢測。新/冠核酸快速檢測是新/冠病毒檢測“金標準”，可是對于檢驗人來說，這個金標準可不簡單，眾所/周知PCR檢測技術本來就屬于高技術檢測。再加上新/冠核酸檢測的特殊性，對標本的檢測帶來巨大困難，隨之而來的就是各種假陽性、假陰性的結果。那么如何解決這些問題就成為檢驗人的一個難題。其實如果我們對PCR檢測了解多一些，其實這些問題是可以避免的。一、假陰性結果原因試劑質量：試劑比對、性能驗證、批間差等檢測試劑：靈敏度提取試劑：提取效率標本因素標本類型：肺泡灌洗液

血清白蛋白和球蛋白的分析測定實驗步驟2022/04/18

【目的與原理]】掌握血清白蛋白和球蛋白測定的原理和方法，并用鹽析法測定水產動物血清中白蛋白和球蛋白的含量。血清中含有多種不同成分的蛋白質，主要為白蛋白和球蛋白。用鹽析法沉淀血清中球蛋白，用雙縮脲法測定上清液中白蛋白，同時測定血清總蛋白。血清球蛋白的量從兩者的差值求得。【[試劑與器材】試劑：1、球蛋白沉淀劑：稱取硫酸鈉（Na2SO4）208g，及亞硫酸鈉（Na2SO3）70g，加入蒸餾水約900ml，并加入濃硫酸2ml，使蒸餾水酸化。不停攪拌，待*溶解后將溶液移入1L容量瓶內，用蒸餾水稀釋至1L刻

牛血清白蛋白的成分結構介紹2022/04/18

牛血清白蛋白(BSA)，是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白，球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著;α2巨球蛋白抑制胰蛋/白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著;轉鐵蛋白能結合鐵離子，減少其毒性和被細胞利用。折疊多肽血小板促生長因子能促細胞分裂，是多肽家庭的主要成員之一，是主要的促細胞增殖因子;成纖維細胞生長因子、表皮細

瓊脂擴散試驗(單向和雙向)操作說明2022/04/18

實驗概要可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散，二者相遇，在比例合適處形成白色沉淀?；绢愋陀袉蜗驍U散和雙向擴散兩種。本文介紹了單向和雙向兩種瓊脂擴散試驗的操作流程。單向瓊脂擴散試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量；雙向瓊脂擴散試驗可用來分析和鑒定標本中多種抗原或抗體成份，并用以測定抗原或抗體的效價。實驗原理1.單向瓊脂擴散試驗是一種定量試驗，將抗體混合于瓊脂內，傾注于玻片或平皿上，凝固后在瓊脂上打孔，再將抗原標本加入孔內，經過一定的時間，在孔的周圍出現抗原抗體復合物形成的沉

HPLC法中的超純水有多重要？2022/04/15

先進、高效的實驗室分析方法搭配高精尖的科學儀器得出的實驗結果必然是越來越精確。其實，要得到高質量的檢測數據，實驗用試劑起著決定性意義。比如超純水就是起決定性作用的實驗材料。近幾年來，實驗室分析技術有了很大的改進。與此同時，檢測儀器設備也越來越精密、靈敏，這就要求所使用的試劑、稀釋劑和水要達到很高的質量標準。在高效液相色譜法分析中，水質的重要性到底如何呢?反相色譜的梯度洗脫最能說明問題。因為反相色譜中的多個色譜柱需要大量的水質溶劑，而水質溶劑的有機污染物會被色譜柱端部所吸附，在后續(xù)的梯度脫洗過程中

培養(yǎng)液pH對細胞的影響？2022/04/15

由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍可能對細胞生長將產生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不*相同，原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差，無限細胞系耐受力強。但總體來說，細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養(yǎng)用液時，需要注意一點：培新配的培養(yǎng)基在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時，溶液的pH還會向上浮動0.2左右。培養(yǎng)液pH下降很快可能原因有哪些？其解決辦法是什么？通常細胞生長得非?？鞎r，pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外，培養(yǎng)瓶

細胞培養(yǎng)時培養(yǎng)液出現渾濁的原因2022/04/15

可能原因：1細胞崩解了；2培養(yǎng)基可能污染了，取部分培養(yǎng)基進行檢菌試驗細胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染.他們在細胞培養(yǎng)中污染的特點如下：1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯.2、支原體：黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一.而且它不能

標準物質/中藥品對照品的使用原則2022/04/15

對照品（標準品）是執(zhí)行藥品質量標準的實物對照，是量值傳遞的重要載體，是用來檢查藥品質量的一種特殊的專用量具、測量藥品質量的基準、確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的物質對照，也是作為校正測試儀器與方法的物質標準。對國家藥品標準而言，它是國家頒發(fā)的一種藥品計量、定性的標準物質。藥品標準物質必須具備材料均勻、性能穩(wěn)定、量值準確等條件，才能發(fā)揮其統(tǒng)一量值的作用。在藥物研發(fā)當中，對照品（標準品）涉及量值溯源、產品定性、雜質控制等重要環(huán)節(jié)，其制備和標定情況與藥品的質量研究、穩(wěn)定性研究乃至藥理毒理學研究中劑量的確定等臨床前基

瓊脂糖凝膠電泳的制備及核酸檢測2022/04/14

一.實驗目的1、掌握瓊脂糖凝膠電泳的原理;2、學習瓊脂糖凝膠電泳的操作。二.實驗原理瓊脂糖是一種天然聚合長鏈狀分子，沸水中溶解，45℃開始形成多孔性剛性濾孔，凝膠孔徑的大小決定于瓊脂糖的濃度。DNA分子在堿性環(huán)境中帶負電荷，在外加電場作用下向正極泳動。DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時，有電荷效應與分子篩效應。不同DNA，其分子量大小及構型不同，電泳時的泳動率就不同，從而分出不同的區(qū)帶。瓊脂糖凝膠電泳法分離DNA，主要是利用分子篩效應，遷移速度與分子量的對數值成反比關系。溴化乙錠（EB）未扁平狀分子