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DNA瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)拖尾的原因2022/04/14: 原因有以下：1、可以考慮是不是樣品不純，目的產(chǎn)物與雜帶相差不大，所以要多跑一段時(shí)間才有尾巴。參考marker,marker應(yīng)該不會有。如果有的話說明配膠有問題。2、瓊脂糖檢測DNA一般去1~5微升原液，加2微升溴酚藍(lán)便可，注意上樣濃度；3、可能是原液濃度太大造成的；4、可能DNA已降解。5、在提取前對樣品進(jìn)行一定的脫腐處理呀。很簡單。有一種TENPbuffer，文獻(xiàn)中查的到的。6、DNA降解避免核酸酶污染。7、DNA上樣量過多，可以減少凝膠中DNA上樣量。8、所用電泳條件不合適，可以將電泳時(shí)電壓

核酸檢測方法是什么？真的準(zhǔn)確嗎？2022/04/14: 檢測核酸的方法是一種靈敏度較高的核酸檢測方法。曾經(jīng)有美國科研人員發(fā)現(xiàn)，核酸檢測能夠檢測得出剛?cè)旧先祟惷庖呷毕莶《?HIV)的病患，而現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)檢測還無法做到這點(diǎn)。核酸檢測方法有哪些核酸檢測目前多是通過取咽試子的方法，病毒感染口腔黏膜上皮以后會寄宿在口腔黏膜上皮，通過采咽拭子可以達(dá)到取樣的目的。既不需要開刀，也不需要打針，只需要被檢測者張開嘴，用一個(gè)像棉簽一樣的試子擦拭扁桃體和咽隱窩附近的分泌物，也可以通過鼻腔取鼻咽喉部的分泌物，然后放入專門的試管內(nèi)，在1小時(shí)內(nèi)送到專門的檢測室進(jìn)行檢測。中國工程院

核酸抽提經(jīng)驗(yàn)及原理2022/04/14: 1、核酸抽提原理簡單地講，核酸抽提包含樣品的裂解和純化兩大步驟。裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程，純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分，如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)*分離的過程。經(jīng)典的裂解液幾乎都含有去污劑(如SDS、TritonX-100、NP-40、Tween20等)和鹽(如Tris、EDTA、NaCl等)。鹽的作用，除了提供一個(gè)合適的裂解環(huán)境(如Tris)，還包括抑制樣品中的核酸酶在裂解過程中對核酸的破壞(如EDTA)、維持核酸結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定(如NaCl)等。去污劑則是通過使蛋白質(zhì)變性，破

全血、血清、血漿樣本在DNA檢測過程中的區(qū)別2022/04/13: 很多的血液類DNA提取試劑盒在適用樣本上都會寫上全血、血漿、血清均可適用，所以很多老師在做核酸診斷類的實(shí)驗(yàn)時(shí)，就認(rèn)為這三種樣本都可以使用，選擇比較隨意，但是得到的結(jié)果往往并不盡如人意，那么這三種樣本有什么區(qū)別，對核酸診斷實(shí)驗(yàn)有什么影響呢？簡單來說，血漿是全血的一部分，血清是血漿的一部分。全血包括血漿和血細(xì)胞（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板），血漿包括血清和纖維蛋白原。從核酸診斷的角度來講，人的基因組DNA更多的存在于白細(xì)胞中，而只有少量游離DNA存在于血清中，但如果白細(xì)胞大量凋亡，血清中的游離DNA量會

血清和血漿的區(qū)別以及制備方法2022/04/13: 血清血漿的區(qū)別：成分、作用和凝血反應(yīng)。血清血漿從外觀是很難分辨出來的，但是可以從以下方面來進(jìn)行區(qū)別：1、成分，血漿就是從人體中抽出血液加抗凝劑，經(jīng)過離心沉淀后，下面的部分叫做血細(xì)胞，上面淡黃色的部分叫做血漿。血清則是從人體中抽出血液不加抗凝劑。2、作用，血漿的作用主要是提供血細(xì)胞，運(yùn)輸維持人體生命活動所需要的物質(zhì)和體內(nèi)產(chǎn)生的廢物等。血清的主要作用是提供基本的營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子等，血清還能夠用來檢驗(yàn)血型。3、凝血反應(yīng)，在凝血反應(yīng)中，血小板釋放了非常多的物質(zhì)，凝血因子也會發(fā)生變化，這些

如何給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”？2022/04/13: 把細(xì)胞養(yǎng)好的三個(gè)關(guān)鍵要素是：良好的細(xì)胞來源，正確的實(shí)驗(yàn)操作，以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要創(chuàng)造適合細(xì)胞生長的環(huán)境，給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”。細(xì)胞培養(yǎng)基本條件：1.合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2.優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細(xì)胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。3.無菌無毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無菌

細(xì)胞培養(yǎng)中抗生素的作用你知道嗎2022/04/13: 細(xì)胞培養(yǎng)起來感覺會很簡單，但是有時(shí)候也會出現(xiàn)各種不順的問題，例如：污染，生長緩慢，變形，死亡率過高…..，畢竟細(xì)胞是體外培養(yǎng)的，在培養(yǎng)的時(shí)候會受到各種外界因素的影響，培養(yǎng)基、血清、孵育溫度、C02濃度等，除此之外還有抗生素……一般來說細(xì)胞培養(yǎng)是不需要加抗生素，因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)必須要無菌操作。如果實(shí)驗(yàn)室污染嚴(yán)重，建議*打掃一下，擦拭消毒、熏蒸或者紫外照射殺菌。然后把細(xì)胞實(shí)驗(yàn)涉及到的試劑都做下空培，包括使用的胰酶，胎牛血清等。如果實(shí)驗(yàn)室無菌條件優(yōu)異，細(xì)胞培養(yǎng)可以不加抗生素，因?yàn)榭股氐乃幮胶投拘运?

質(zhì)粒載體對宿主生存并不是必需的2022/04/12: 這點(diǎn)不同于線粒體，線粒體DNA也是環(huán)狀雙鏈分子，也有獨(dú)立復(fù)制的調(diào)控，但線粒體的功能是細(xì)胞生存所必需的。線粒體是細(xì)胞的一部分，質(zhì)粒也往往有其表型，其表現(xiàn)不是宿主生存所必需的，但也不妨礙宿主的生存。某些質(zhì)粒攜帶的基因功能有利于宿主細(xì)胞的特定條件下生存，例如，細(xì)菌中許多天然的質(zhì)粒帶有抗藥性基因，如編碼合成能分解破壞四環(huán)素、氯霉/素、氨芐表霉素等的酶基因，這種質(zhì)粒稱為抗藥性質(zhì)粒，又稱R質(zhì)粒，帶有R質(zhì)粒的細(xì)菌就能在相應(yīng)的抗生素存在生存繁殖。所以質(zhì)粒對宿主不是寄生的，而是共生的。醫(yī)學(xué)上遇到許多細(xì)菌的抗藥性，

微生物樣品采樣后怎樣處理？2022/04/12: 一、樣品的運(yùn)輸樣品從采集結(jié)束至送達(dá)實(shí)驗(yàn)室整個(gè)過程的運(yùn)輸應(yīng)保證樣品本身變化最小及其中的微生物數(shù)量變化最/低，盡量維持樣品采樣時(shí)的各種最初外界條件（如儲存溫度、是否需要冷藏或冷凍、避光等）。樣品應(yīng)避免破損或漏撒，產(chǎn)品標(biāo)簽應(yīng)注明是否需要冰箱保存，不需要冷藏或冷凍的樣品應(yīng)放置于強(qiáng)度較高可以避免外界破壞的合適容器內(nèi)。需注意：若容器內(nèi)需要加入冰袋來進(jìn)行保溫時(shí)，冰袋絕不可以直接接觸樣品。以下是各類樣品建議的運(yùn)輸溫度：（1）固體樣品：樣品周圍溫度應(yīng)≤40℃。（2）冷凍或深度冷凍樣品：樣品周圍溫度應(yīng)低于-15℃，

凍干粉針異?，F(xiàn)象總結(jié)與解決措施2022/04/12: 凍干粉針基本存在的現(xiàn)象如下：現(xiàn)象一：含水量超標(biāo)凍干粉針劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的含水量較低。造成其含水量超過標(biāo)準(zhǔn)的主要原因是：裝入容器的藥液過多，藥液層過厚；干燥過程中供熱不足，使其蒸發(fā)量減少；真空度不夠，水蒸氣不能順利排出；冷凝室溫度偏高，不能有效地將水蒸氣捕集下來；凍干時(shí)間較短；真空干燥箱的空氣濕度高；出箱時(shí)制品溫度低于室溫而出現(xiàn)制品吸濕等。措施：生產(chǎn)人員須針對不同原因采取相應(yīng)的解決方法。如按藥液體積調(diào)整西林瓶規(guī)格，減少裝液厚度，一般應(yīng)控制在10~15mm；加強(qiáng)熱量供給，促進(jìn)水分蒸發(fā)；檢查真空度不高

標(biāo)準(zhǔn)菌株的管理與控制！2022/04/12: 一、目的規(guī)范用于微生物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制和操作評估的標(biāo)準(zhǔn)菌株管理與使用程序，盡量減少交叉污染確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠與實(shí)驗(yàn)室安全。二、范圍本工作指引適用于微生物實(shí)驗(yàn)室所有標(biāo)準(zhǔn)菌株的管理與使用。三、參考四、內(nèi)容4.1程序1.標(biāo)準(zhǔn)菌株的復(fù)壯a(bǔ).將復(fù)壯所用的0.5-1ml液體培養(yǎng)基（如TS或BPW）置于室溫；b.將標(biāo)準(zhǔn)菌株從冰箱取出置于室溫；c.無菌操作去除菌株的包裝物；d.無菌操作敬液體培養(yǎng)基導(dǎo)入菌株容器；或者無菌操作剪開菌株包裝物，將菌株倒入液體培養(yǎng)基；e.將試管在37℃下放置一段時(shí)間后，使菌種*溶解到培養(yǎng)基中

檢測實(shí)驗(yàn)室常見問題，知識干貨！2022/04/11: 1.企業(yè)內(nèi)部實(shí)驗(yàn)室通過CNAS認(rèn)可，可否作為第三方對外出具證書報(bào)告？答：CNAS認(rèn)可，是對實(shí)驗(yàn)室能力的認(rèn)可，可否作為第三方機(jī)構(gòu)對外出具證書報(bào)告，還要符合國家法律法規(guī)的要求。例如國家計(jì)量法規(guī)定作為第三方檢測機(jī)構(gòu)對外出具檢測報(bào)告要通過計(jì)量認(rèn)證？2.如何定義“多地點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”？同城，但試驗(yàn)場所分散在幾個(gè)地點(diǎn)的，是否算“多地點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”？答：CNAS-RL01中有“多場所實(shí)驗(yàn)室”定義，可以查看。不同的地址，就是不同的場所，即使是同城，也是多場所。3.定期監(jiān)督評審時(shí)，未安排某領(lǐng)域的技術(shù)評審員(譬如電磁兼容)，

實(shí)驗(yàn)室制好的超純水，能放置多長時(shí)間？2022/04/11: 超純水存放的要求1.即取即用超純水取水后很容易遭到環(huán)境污染，所以使用前取水(即取即用)方式時(shí)最合適的。只有把超純水與環(huán)境接觸的時(shí)間縮到極短，才能夠獲得純度*的超純水。2.存放時(shí)間在配置高純度的化學(xué)試劑時(shí)，盡量不要使用長時(shí)間儲桶中存放的超純水，因?yàn)閮ν敖?jīng)長時(shí)間使用后，會因雜質(zhì)、微生物的污染而造成水質(zhì)的劣化，超純水像這種水，在使用時(shí)已經(jīng)不再是超純水。3.純水儲桶最好安裝空氣過濾器，防止環(huán)境因素造成的污染。4.儲水桶請勿放置在日光直射處，水溫上升，容易造成微生物繁殖。特別是半透明儲水桶，也會因?yàn)槿展馔?

一起get生物實(shí)驗(yàn)室管理6大要點(diǎn)！2022/04/11: 實(shí)驗(yàn)室安全是個(gè)老生常談的問題了，生物實(shí)驗(yàn)室尤其設(shè)計(jì)病毒的實(shí)驗(yàn)室更要嚴(yán)格管理，關(guān)于生物實(shí)驗(yàn)室，這些要點(diǎn)你都知道嗎？一起來看看吧。一、質(zhì)量與生物安全管理體系的建立實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的建立是要有明確的目的及規(guī)范的管理,有效的制約和高效的機(jī)制,能自我發(fā)展和完善的有機(jī)整體。在病原微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的檢測工作的質(zhì)量管理作為單位質(zhì)量管理體系的有機(jī)組成部分有關(guān)生物安全方面的特殊要求包括:實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)入,操作規(guī)范,個(gè)人防護(hù)、健康監(jiān)護(hù)、消毒效果評估,菌毒種保管,廢棄物處理和意外處置、實(shí)驗(yàn)室生物風(fēng)險(xiǎn)評估等各項(xiàng)生物安全規(guī)章制

空白試驗(yàn)應(yīng)該注意什么，實(shí)驗(yàn)人看這里！2022/04/11: 國標(biāo)中空白試驗(yàn)的定義空白試驗(yàn)：除不加試樣外，采用*相同的分析步驟、試劑和用量（滴定法中標(biāo)準(zhǔn)滴定液的用量除外），進(jìn)行平行操作所得的結(jié)果。用于扣除試樣中試劑本底和計(jì)算方法的檢出限?？瞻鬃霾缓脮鯓?？空白試驗(yàn)測得的結(jié)果稱為空白試驗(yàn)值。在進(jìn)行樣品分析時(shí)所得的值減去空白試驗(yàn)值得到的才是最終分析結(jié)果?？瞻自囼?yàn)是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，其準(zhǔn)確性對提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度至關(guān)重要?？瞻自囼?yàn)值反應(yīng)了測試儀器的噪聲、試劑中的雜質(zhì)、環(huán)境及操作過程中的沾污等因素對樣品測定產(chǎn)生的綜合影響，直接關(guān)系到測定的最終結(jié)果的準(zhǔn)確性。

菌種保藏及活化使用的注意事項(xiàng)2022/04/08: 菌種保藏的方法很多，但原理大同小異。首先要挑選優(yōu)良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營養(yǎng)體；其次，根據(jù)其生理、生化性，人為創(chuàng)造低溫、干燥或缺氧等條件，抑制微生物的代謝作用，使其生命活動降低到極低的程度或處于休眠狀態(tài)，從而延長菌種生命以及使菌種保持原有的形狀，防止變異。不管采用哪種保藏方法，在菌種保存過程中要求不死亡、不污染雜菌和不退化。短期：斜面保藏斜面保藏是目前最/普遍的短期保藏法，操作簡單，使用方便，但需定期接種。因此工作量較大，而且傳代次數(shù)多易發(fā)生變異，因此，僅適用于短期經(jīng)常使用的菌種。1.配

關(guān)于微波爐加熱培養(yǎng)基是否合適你關(guān)注過嗎？2022/04/08: 平日實(shí)驗(yàn)室里微波爐的使用：三角瓶配置好培養(yǎng)基（以五百毫升瓶子裝300mL培養(yǎng)基為例），加熱溶解，攪拌均勻，放入微波爐，調(diào)節(jié)火至大火或最/高檔（根據(jù)加熱快慢選擇），設(shè)2分鐘，開始加熱，通過觀察窗觀察里面培養(yǎng)基變化（VRBA培養(yǎng)基開始會表面出現(xiàn)白沫，沸前變清。這個(gè)也不*準(zhǔn)，主要還是根據(jù)不同配方的培養(yǎng)基成分有關(guān)），一般二分鐘后是沒有變化的（根據(jù)培養(yǎng)基量的多少），然后繼續(xù)設(shè)2分，如此直至有少部分冒泡，這時(shí)候盯的要求比較緊，一旦有冒泡變多上漲趨勢（一般反應(yīng)已在一厘米高度），馬上拉門（門一開，自動斷電和降溫

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染種類及危害！2022/04/08: 在環(huán)保面前人人平等，必須本著“誰污染環(huán)境，誰負(fù)責(zé)處理”的原則貫徹執(zhí)行。實(shí)驗(yàn)室的成本核算和對外收費(fèi)都應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)室的環(huán)保費(fèi)用在內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室的污染源種類復(fù)雜，品種多，毒害大，應(yīng)根據(jù)具體情況，分別制訂處理方案。1實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染種類及危害1.1按污染性質(zhì)分1.1.1化學(xué)污染化學(xué)污染包括有機(jī)物污染和無機(jī)物污染。有機(jī)物污染主要是有機(jī)試劑污染和有機(jī)樣品污染。在大多數(shù)情況下，實(shí)驗(yàn)室中的有機(jī)試劑并不直接參與發(fā)生反應(yīng)，僅僅起溶劑作用，因此消耗的有機(jī)試劑以各種形式排放到周邊的環(huán)境中，排放總量大致就相當(dāng)于試劑的消耗量。日復(fù)

PCR實(shí)驗(yàn)室污染？遠(yuǎn)慕教你萬能應(yīng)急法2022/04/08: PCR檢測因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應(yīng)用，不過正是由于它靈敏度*，極微量的污染源都有可能導(dǎo)致檢測結(jié)果的假陽性，因此所有的預(yù)防措施都會稍稍有所不同。「易查不易察」，污染來的悄無聲息，我們該如何應(yīng)對。那么，如何避免以及處理實(shí)驗(yàn)室污染，對PCR人來說是一門必修課。PCR實(shí)驗(yàn)室污染分類1、樣本間交叉污染主要是在采（?。拥倪^程中，由于取樣工具之間的交叉造成污染；或者在核酸提取的過程中，由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。2、PCR試劑污染主要是在PCR組分試劑加樣過程中，由于移液器

你實(shí)驗(yàn)室里的試劑藥品還在混放？2022/04/07: 化學(xué)貯存室化學(xué)藥品封閉柜混放，未按GB15603標(biāo)準(zhǔn)隔離存放。整改措施：（1）實(shí)驗(yàn)室做到了無機(jī)試劑先按固體和液體分成兩類，然后再按單質(zhì)、酸、堿、鹽分類。單質(zhì)又可分為金屬和非金屬，鹽類又可按照酸根分為鹵化物、硫酸鹽、硝酸鹽等排列。并且不同藥品間分開了一定的距離，做到分類隔離存放。（2）對于危險(xiǎn)化學(xué)藥品，按GB15603標(biāo)準(zhǔn)隔離存放。①易燃固體：紅(赤)磷、硫粉、鎂條，它們的著火點(diǎn)一般都很低，非常容易著火，所以將其它各類物品隔開存放。由專人負(fù)責(zé)，雙人雙鎖，妥加保管。②自燃物品：黃(白)磷不經(jīng)明火接觸

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