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葡聚糖凝膠的方法分類及儲運特性2022/01/05

方法分類1.乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干；2.無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹，然后；3.鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗至中性；4.將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層；5.上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（流出液的PH值等于

凝膠過濾層析常見問題解答2022/01/05

凝膠過濾層析又稱凝膠排阻色譜,分子篩色譜法,凝膠過濾法等。利用凝膠過濾介質(zhì)為固定相，根據(jù)物料中溶質(zhì)相對分子質(zhì)量的差異的液相色譜法。只依據(jù)尺寸大小分離，大組分最先被洗提出。色譜固定相是多孔性凝膠，只有直徑小于孔徑的組分可以進入凝膠孔道。大組分不能進入凝膠孔洞而被排阻，只能沿著凝膠粒子之間的空隙通過，因而最大的組分最先被洗提出來。小組分可進入大部分凝膠孔洞，在色譜柱中滯留時間長，會更慢被洗提出來。溶劑分子因體積最小，可進入所有凝膠孔洞，因而是最后從色譜柱中洗提出。這也是與其他色譜法最大的不同。凝膠過

PCR應(yīng)用中存在的問題，實驗人了解一下2022/01/05

開展PCR應(yīng)具有一定的條件。需要一個正規(guī)的pCR實驗室，采集標本、核酸提取、擴增及產(chǎn)物分析應(yīng)在不同的房間進行；需有嚴密的防污染措施、假陽性和假陰性結(jié)果的質(zhì)控等。實驗者應(yīng)具有一定的分子生物學理論知識及實驗技能，能夠及時發(fā)現(xiàn)和糾正實驗中的問題。目前，我國在PCR應(yīng)用中尤其是在臨床診斷中存在問題較多，主要表現(xiàn)為：PCR試劑的考核、審查工作薄弱，許多單位實驗條件不符合要求，部分操作人員的理論和實驗知識水平較低。PCR的應(yīng)用范圍過寬等，因此造成PCR實驗結(jié)果的可靠性差，出現(xiàn)較多的假陽性、假陰性結(jié)果。一、假

標準品和對照品的分類和區(qū)別2022/01/05

一、標準品和對照品的概念對照品指用于鑒別、檢查、含量測定和校正檢定儀器性能的標準物質(zhì)。標準品指用于生物檢定、抗生素或生物藥品中含量或效價測定的標準物質(zhì)，以效價單位(U)表示。國家標準品及生物參考品系指用于鑒別、檢查含量或效價測定的標準物質(zhì)，其制備與標定應(yīng)符合:“生物制品國家標準物質(zhì)制備和標定規(guī)程”要求，并由國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門zhi定的機構(gòu)分發(fā)。企業(yè)工作標準品或參考品必須經(jīng)國家標準品或參考品標化后方能使用。對照品系指用于生物制品理化等方面測定的特定物質(zhì)，由生產(chǎn)單位采用與制品生產(chǎn)工藝相同的方法制

無菌檢查和微生物限度檢查有啥區(qū)別2022/01/04

無菌檢查和微生物限度檢查的區(qū)別1、檢驗方法不同（1）無菌檢查是指對藥典規(guī)定的藥品、敷料、縫線、無菌器具等品種進行無菌檢查的方法。（2）微生物限度檢查是檢查非處方殺菌劑及其原料、輔料的微生物污染程度的一種方法。2、檢驗要求環(huán)境不同（1）無菌檢查是在潔凈的*單向流通空氣區(qū)或隔離系統(tǒng)中進行的。整個過程應(yīng)嚴格遵守無菌操作，防止微生物污染。必須驗證單向氣流區(qū)域和工作臺的清潔度。生物制品的無菌檢驗按照《中國生物制品規(guī)程》中有關(guān)無菌檢驗的規(guī)定執(zhí)行。（2）微生物限度檢查：微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級

酵母提取物、酵母浸粉和酵母粉的區(qū)別2022/01/04

酵母浸粉的介紹：酵母浸粉又稱酵母提取物，是采用新鮮酵母經(jīng)酵母自溶、過濾、濃縮、噴霧干燥而得到的一種淺黃色至類白色干燥粉末。有酵母自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黃色。酵母浸粉極-具吸濕性，請放陰涼干燥處保存。酵母浸粉當中含有氨基酸類、肽類、水溶性維生素、及酵母多糖、酵母核酸組成的一種混合物，酵母浸粉當中含有豐富的B族維生素和各種氨基酸。核苷酸類、有機酸類、礦物質(zhì)類及維生素類的水溶性物質(zhì)。在當中它起的主要作用是補充氮源和提供細菌生長的各種維生素及氨基酸。酵母浸粉主要用于微生物培養(yǎng)基制備的基礎(chǔ)原材料以

微生物的三種傳統(tǒng)檢測方法2022/01/04

微生物的三種傳統(tǒng)檢測方法1、直接顯微鏡觀察，正常情況，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度以及培養(yǎng)時間），同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。可以通過顯微鏡觀察菌落特征對微生物種類進行判斷。2、選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物或人為提供有利于目的菌株生長的條件，選擇培養(yǎng)基，其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養(yǎng)一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進行間接判斷，得到的微生物往往并不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對其分類。3、鑒別培養(yǎng)基，根據(jù)微生物

各種抗體稀釋液的配置方法和配方！2022/01/04

抗體作為免疫基礎(chǔ)實驗中常用的試劑，WB、IHC、IF、FC實驗應(yīng)用中都會用到抗體，如何正確使用抗體，其中稀釋液的選擇非常重要，不同的生產(chǎn)廠家對抗體稀釋液的要求都不一樣，一般常見的稀釋液是自己配置5%脫脂奶粉或者5%BSA溶液。各種抗體稀釋液的配置方法和配方！辣根過氧化物酶標記抗體稀釋液的配制：1%牛血清白蛋白（穩(wěn)定劑）；0.1%冷魚皮明膠（堵）；0.05%硫柳汞（防腐劑）；0.01MPBSpH7.2；注：1）抗體稀釋使用該緩沖區(qū)可以存儲在4oC6個月未還原的結(jié)合活性。2）不要用BSA或其他含血清

液體細菌培養(yǎng)的操作步驟2021/12/31

以光合細菌培養(yǎng)方法為例。光合細菌培養(yǎng)的方法，按次序分為容器、工具的消毒，培養(yǎng)基的制備，接種和培養(yǎng)管理四個步驟。（一）容器、工具的消毒參考、此處從略。（二）培養(yǎng)基的制備1．培養(yǎng)用水如果培養(yǎng)的光合細菌是淡水種，菌種培養(yǎng)可用蒸餾水，生產(chǎn)培養(yǎng)可用消毒的自來水（或井水）配制。如果培養(yǎng)的光合細菌是海水種，則用天然海水配制培養(yǎng)基，注意在海水中加入磷元素時，不能用磷酸氫2鉀，應(yīng)用磷酸2氫鉀，不然會產(chǎn)生大量沉淀。2．滅菌和消毒菌種培養(yǎng)用的培養(yǎng)基應(yīng)連同培養(yǎng)容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產(chǎn)性培養(yǎng)可把配好的培養(yǎng)液用普

細菌培養(yǎng)的日常管理和測試2021/12/31

日常管理和測試（1）攪拌和充氣：光合細菌培養(yǎng)過程中必須充氣或攪拌，作用是幫助沉淀的光合細菌上浮獲得光照，保持菌細胞的良好生長。小型厭氣培養(yǎng)常用人工搖動培養(yǎng)容器的方法使菌細胞上浮，每天至少搖動三次，定時進行。大型厭氣培養(yǎng)則用機械攪拌器或使用小水泵使水緩慢循環(huán)運轉(zhuǎn)，保持菌體懸浮。微氣培養(yǎng)是通過充氣幫助菌體上浮，因為培養(yǎng)液中溶解氧含量增加，光合細菌繁殖受到抑制，產(chǎn)量下降，所以必須嚴格控制充氣量。一般采用定時斷續(xù)充氣，充氣量控制在1～1.5升/（升·h）之間，溶解氧量保持在1×10-6以下。（2）調(diào)節(jié)光

藥敏和細菌培養(yǎng)報告單你能看懂嗎？2021/12/31

1、藥敏試驗是如何測定的？根據(jù)美國臨床標準委員會推薦的紙片擴散法測定。將含有一定量抗菌藥的紙片貼在涂有細菌的瓊脂平板表面，35℃培養(yǎng)過夜，測量紙片周圍抑菌圈的大小確定細菌對藥物的敏感性，抑菌圈越大敏感性越高。不同細菌對不同抗菌藥敏感性的判定標準不同，例如頭孢-噻肟對腸桿菌科細菌的抑菌圈≤14mm為R，15mm-22mm為I，≥23mm為S；苯唑西林對金黃色葡萄球菌抑菌圈≤10mm為R，11mm-12mm為I，≥13mm為S。2、藥敏試驗報告中S、I、R指的是什么？S：是指細菌對抗菌藥敏感，使用常

細菌數(shù)量的測定方法匯總2021/12/31

1、顏色改變單位法（colourchangeunit,簡稱CCU）這種方法通常用于很小，用一般的比濁法無法計數(shù)的微生物，比如支原體等，因為支原體的液體培養(yǎng)物是完-全透明的，呈現(xiàn)為清亮透明紅色，因此無法用比濁法來計數(shù)，由于支原體固體培養(yǎng)很困難，用cfu法也不容易計數(shù)，因此需要用特殊的計數(shù)方法，即CCU法。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標，來計數(shù)微生物的相對含量的，下面以解脲脲原體為例，簡單介紹其操作：（1）取12只無菌試管，每一管裝1.8ml解脲脲原體培養(yǎng)基。（2）在第1管加入0.2ml待測

核酸電泳的指示劑與染色劑區(qū)別2021/12/30

指示劑核酸電泳常用的指示劑有溴酚蘭和二甲苯青及銀染色.溴酚蘭在堿性液體中呈紫蘭色，在0.6%、1%、1.4%和2%瓊脂糖凝膠電泳中，溴酚蘭的遷移率分別與1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的雙鏈線性DNA---pian段大致相同.二甲苯青的水溶液呈蘭色，它在1%和1.4%瓊脂糖中電泳時，其遷移速率分別與2Kb和1.6Kb的雙鏈線性DNA大致相似.指示劑一般與蔗糖、甘油或聚蔗糖400組成載樣緩沖液.載樣緩沖液的作用有①增加樣品密度，使其比重增加，以確保DNA均勻沉入加樣孔內(nèi).②在電泳中形成

生物標本制作常用生理鹽水的配制方法2021/12/30

配方一各種動物需用的生理鹽水哺乳類需用生理鹽水濃度是0.9%。稱取0.9克氯化鈉，溶解在少量蒸餾水中，稀釋到100毫升。鳥類需用的生理鹽水濃度是0.75%。稱取0.75克氯化鈉，溶解后用蒸餾水稀釋到100毫升。兩棲類需用的生理鹽水濃度是0.65%。稱取0.65克氯化鈉，溶解后用蒸餾水稀釋到100毫升。配方二任氏（Ringer’s）生理鹽水氯化鈉6.5克碳-酸氫鈉0.2克lv化鉀0.14克磷酸二氫鈉0.01克氯化鈣0.12克先把氯化鈉、lv化鉀、碳-酸氫鈉、磷酸二氫鈉分別溶解在少量蒸餾水中，混合后

微生物細胞的固定方法有哪些2021/12/30

微生物細胞的固定方法有主要有物理吸附法和包埋法兩種.1．物理吸附法帶電的微生物細胞和載體之間的靜電相互作用,使細胞體吸附固定在硅藻土、木材、玻璃、陶瓷和塑料等載體上.如酵母細胞是帶負電的,在固定時要選擇帶正電的載體.在PH4時,熱帶假絲酵母、釀酒酵母等在陶瓷表面上的吸附程度較大,載體表面的40~70%被細胞牢固吸附,不會被高流培養(yǎng)液沖掉.載體的性質(zhì)也影響細胞與載體之間的相互作用,主要是載體的成分、表面電荷、表面積和PH的影響.所有的玻璃和陶瓷都是由不同比例的氧化硅、氧化鎂等組成,如將玻璃等放在溶

定量分析中怎樣選擇內(nèi)標法或外標法2021/12/30

選一與欲測組分相近但能完-全分離的組分做內(nèi)標物（當然是樣品中沒有的組分），然后配制欲測組分和內(nèi)標物的混合標準溶液，進樣得相對校正因子。再將內(nèi)標物加入欲測組分的樣品中，進樣后測得欲測組分和內(nèi)標物的定量參數(shù)。用內(nèi)標法公式計算即可。內(nèi)標法是將一定量的純物質(zhì)作內(nèi)標物，加入到準確稱量的試樣中，根據(jù)被測試樣和內(nèi)標物的質(zhì)量比及其相應(yīng)的色譜峰面積之比，來計算被測組分的含量。選擇內(nèi)標物有4個要求：1.內(nèi)標物應(yīng)是該試樣中不存在的純物質(zhì)；2.它必須完-全溶于試樣中，并與試樣中各組分的色譜峰能完-全分離；3.加入內(nèi)標物

超全的菌種保存和微生物常識2021/12/29

1、常用培養(yǎng)基的制備、滅菌與消毒營養(yǎng)：從外部環(huán)境攝取其生命活動所必需的能量和物質(zhì)，滿足生長和繁殖需要的一種生理過程。是生命活動的物質(zhì)基礎(chǔ)，是生命活動的起點。營養(yǎng)物：具有營養(yǎng)功能的物質(zhì)。也包括光能。提供生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)、能量、代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)和良好的生理環(huán)境。營養(yǎng)要素：碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽和水培養(yǎng)基：人工配制、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的混合養(yǎng)料。要求：應(yīng)具備6大營養(yǎng)要素；物質(zhì)比例合適；必須滅菌。2、選用和設(shè)計培養(yǎng)基的原則、方法及制備過程原則：目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、經(jīng)濟節(jié)約物理化學條件

無菌實驗室基本配置和要求2021/12/29

無菌實驗室在行業(yè)內(nèi)其實也會稱之為潔凈實驗室或生物安全實驗室，他主要應(yīng)用在生物化學、生物醫(yī)學、基因重組、微生物學等生物學方面的研究實驗室。無菌實驗室對于潔凈度要求十分高，那么在設(shè)計以及建造時我們應(yīng)該注意些什么呢？一、無菌實驗室的基本配置1、準備室是配置培養(yǎng)基以及對生物樣品基本處理的空間，室內(nèi)必須要配備有電源、冰箱、電爐、實驗臺、試劑柜、存放器具以及材料柜和上下水道。2、洗滌室用于清理已經(jīng)使用過的實驗器皿以及相關(guān)用具，因為已經(jīng)使用過的試驗器具上會有殘留的實驗微生物，也有可能會有部分病原微生物存在。所

實驗中樣品的回收率計算方法2021/12/29

加入已知濃度A的待測物質(zhì)，用該方法測定其濃度值B，回收率=（A/B）×100%.注：已知濃度A應(yīng)在該檢測方法的可以檢測濃度范圍內(nèi)。加標回收率，一般是測定樣品中待測物質(zhì)的濃度為C；再取另一份樣品，加入定量待測物質(zhì)（定量加入待測物質(zhì)的理論濃度為E）（加入待測物質(zhì)的量最好與樣品中待測物質(zhì)的量一樣）測定其濃度為D，加標回收率=（（D-C）/E）×100%絕對回收率因為不論是生物基質(zhì)還是制劑輔料中的藥物，經(jīng)過樣品處理都有一定的損失。作為一個分析方法，絕對回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基質(zhì)中定量加

色譜分析中歸一化法、外標法、內(nèi)標法的區(qū)別2021/12/29

一、使用不同：除了內(nèi)標法和歸一化法，常用的氣相色譜方法還有外標法。與內(nèi)標法相比，外標法不是把標準物質(zhì)加入到被測樣品中，而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定，把得到的色譜峰面積與被測組分的色譜峰面積進行比較求得被測組分的含量。外標物與被測組分同為一種物質(zhì)但要求它有一定的純度，分析時外標物的濃度應(yīng)與被測物濃度相接近，以利于定量分析的準確性。二、含義不同：面積歸一化法優(yōu)點是簡便、準確，當操作條件變化時對結(jié)果影響較小，宜于分析多組分試樣中各組分的含量。但是試樣中所有組分必須全部出峰，因此，此法在使用