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125I-UdR釋放試驗(yàn)測(cè)定NK細(xì)胞活性2019/02/25: 實(shí)驗(yàn)方法原理25I-UdR（125I-2′脫氧尿嘧啶核苷）是胸腺嘧啶核苷的類似物，作為DNA合成的前體物，能相當(dāng)特異地取代胸腺嘧啶核苷摻入到細(xì)胞核DNA鏈上。因此，可用125I-UdR標(biāo)記體外傳代培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞作為靶細(xì)胞，以外周血分離的單個(gè)核細(xì)胞或小鼠脾細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞，進(jìn)行體外NK細(xì)胞活性檢測(cè)。被效應(yīng)細(xì)胞殺傷的靶細(xì)胞溶解后可釋放125I-UdR，用γ-計(jì)數(shù)儀測(cè)定其放射性強(qiáng)度，以125I-UdR釋放百分率表示NK細(xì)胞的活性。實(shí)驗(yàn)材料YAC-1細(xì)胞試劑、試劑盒125I-UdR（125I-2′脫氧尿

GIST-430 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞2019/02/22: InstructionmanualGIST-430人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞CatalogueNo.:C470ProductFormat:aT25flaskCultureProperties：貼壁CompleteGrowthMedium:89%McCoy’s+10%FBS+1%雙抗Atmosphere:air,95%;carbondioxide(CO2),5%Application:CellsａndcancerresearchNOTE:FORRESEARCHUSEONLY.ComponentsItemS

豬流感病毒H1N1亞型雙色實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒2019/02/22: 【產(chǎn)品名稱】通用名稱：豬流感病毒H1N1亞型雙色實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒英文名稱：SwineInfluenzaVirusH1N1DetectionKit(DualchannelsReal-TimePCRMethod)【包裝規(guī)格】25T/盒&50T/盒【預(yù)期用途】本試劑盒利用實(shí)時(shí)熒光PCR原理，定性檢測(cè)豬流感病毒，對(duì)豬流感病毒引起的流感及其并發(fā)癥的診斷及療效評(píng)估有重要指導(dǎo)意義?！緳z驗(yàn)原理】豬流感病毒H1N1亞型雙色實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒本試劑盒針對(duì)豬流感病毒H1N1的高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和探針，在

肥大細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)2019/02/21: 實(shí)驗(yàn)方法原理肥大細(xì)胞形態(tài)較大（20～30μm），細(xì)胞核較小，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)充滿許多的圓形嗜堿性顆粒。由于顆粒中含有肝素等成分的多硫酸脂，也屬于硫酸黏多糖類，能夠被異染性染料著色，常用甲苯胺藍(lán)染色法。實(shí)驗(yàn)材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水冰醋酸甲苯胺藍(lán)儀器、耗材滴管實(shí)驗(yàn)步驟甲苯胺藍(lán)染色液：甲苯胺藍(lán)0.5g，蒸餾水100ml。冰醋酸分化液：冰醋酸0.5ml，蒸餾水100ml。1.石蠟組織切片4μm，脫蠟至水。2.甲苯胺藍(lán)染色液染色10min，蒸餾水洗2次。3.冰醋酸分化液30s左右，

細(xì)胞膜完整性及膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能檢測(cè)實(shí)驗(yàn)2019/02/21: 區(qū)分活細(xì)胞和死亡細(xì)胞的關(guān)鍵在于死亡細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能及膜完整性的喪失。許多陽(yáng)離子染料，如臺(tái)盼藍(lán)、碘化丙錠（PI）、溴化乙錠（EB）以及7-氨基放線菌素D（7-ADD）等，常被用于檢測(cè)細(xì)胞的存活率。活細(xì)胞由于膜具有完整性而不被著色，死亡細(xì)胞（如壞死細(xì)胞或晚期凋亡細(xì)胞）由于其膜完整性的喪失而被著色。實(shí)驗(yàn)方法原理實(shí)驗(yàn)步驟1.主要試劑的的配制碘化丙錠（PI）染色液（4℃避光保存）：Pl，100μg/ml；TritonX-100，1.0%；NaCl0.9%。2.操作流程2.1樣本的準(zhǔn)備2.1.1培養(yǎng)細(xì)胞收集懸

狂犬病病毒檢測(cè)試劑盒2019/02/20: 一、犬瘟熱病毒檢測(cè)試劑盒通用名稱：犬瘟熱病毒檢測(cè)試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）英文名稱：CaninedistempervirusDetectionKit(Real-TimePCRMethod)二.規(guī)格：25T/盒、48T/盒、50T/盒檢測(cè)樣本：血液或血清/肌肉或內(nèi)臟檢測(cè)方法：實(shí)時(shí)熒光PCR法貯存條件：-20℃保質(zhì)期：12個(gè)月三、預(yù)期用途本試劑盒適用于犬瘟熱病毒檢測(cè)，可用于臨床犬瘟熱病毒感染的輔助診斷，但不作確診使用。四、犬瘟熱病毒檢測(cè)試劑盒原理本試劑盒針對(duì)犬瘟熱病毒的高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和探

犬細(xì)小病毒檢測(cè)試劑盒2019/02/20: 犬細(xì)小病毒檢測(cè)試劑盒本試劑盒利用實(shí)時(shí)熒光PCR原理，定性檢測(cè)犬細(xì)小病毒，對(duì)犬細(xì)小病毒引起的疾病診斷及療效評(píng)估有重要指導(dǎo)意義。規(guī)格：25T/盒、48T/盒、50T/盒檢測(cè)樣本：犬的淚液、鼻液、唾液、糞便/病死犬的肝、腎、脾、肺等組織器官檢測(cè)方法：實(shí)時(shí)熒光PCR法貯存條件：-20℃保質(zhì)期：12個(gè)月一、犬細(xì)小病毒檢測(cè)試劑盒通用名稱：犬細(xì)小病毒檢測(cè)試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）英文名稱：CanineParvovirusDetectionKit(Real-TimePCRMethod)二、包裝規(guī)格25T/盒、4

禽白血病檢測(cè)試劑盒2019/02/20: 本試劑盒適用于禽白血病病毒檢測(cè)，可用于臨床禽白血病病毒感染的輔助診斷，但不作確診使用。規(guī)格：25T/盒、48T/盒、50T/盒檢測(cè)樣本：咽喉拭子/泄殖腔拭子/血液/禽肉取肌肉/內(nèi)臟檢測(cè)方法：實(shí)時(shí)熒光PCR法一、禽白血病檢測(cè)試劑盒通用名稱：禽白血病病毒檢測(cè)試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）英文名稱：LeukemiaofFowlsvirusDetectionKit(Real-TimePCRMethod)二、包裝規(guī)格25T/盒、48T/盒、50T/盒三、預(yù)期用途本試劑盒適用于禽白血病病毒檢測(cè)，可用于臨床禽白血

BCPAP人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞STR鑒定報(bào)告2019/02/19: BCPAP人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞STR鑒定報(bào)告一、細(xì)胞培養(yǎng)條件生長(zhǎng)特性貼壁凍存條件90%FBS+10%DMSO培養(yǎng)體系DMEM+10%FBS氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%傳代方法1:2-1:4傳代情況2天換液備注收集瓶子培養(yǎng)基，過渡使用。二、細(xì)胞收到后處理細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)暮棉k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察

staurosporine誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡2019/02/19: Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶（包括酪氨酸蛋白激酶）強(qiáng)有力的抑制劑。通過阻斷磷酸二酯鍵從DNA轉(zhuǎn)移到活化的酪氨酸位點(diǎn)而直接抑制拓普異構(gòu)酶II的活性?？捎糜谡T導(dǎo)CHO細(xì)胞凋亡。實(shí)驗(yàn)方法原理Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶（包括酪氨酸蛋白激酶）強(qiáng)有力的抑制劑。通過阻斷磷酸二酯鍵從DNA轉(zhuǎn)移到活化的酪氨酸位點(diǎn)而直接抑制拓普異構(gòu)酶II的活性。可用于誘導(dǎo)CHO細(xì)胞凋亡。實(shí)驗(yàn)材料妊娠的C57BL6cr小鼠試劑、試劑盒staurosporine蒸餾水脫氫酶ZVAD

細(xì)胞膜流動(dòng)性測(cè)定實(shí)驗(yàn)2019/02/15: 膜結(jié)構(gòu)中的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)具有相對(duì)側(cè)向流動(dòng)性；細(xì)胞膜是由磷脂雙分子層和鑲嵌、貫穿在其中及吸附在其表面的蛋白質(zhì)組成的，磷脂雙分子層疏水的尾部在內(nèi)，親水頭部在外。實(shí)驗(yàn)方法原理常用于研究膜脂流動(dòng)性的熒光探針為1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH摻入到細(xì)胞膜脂烴鏈區(qū)后，介質(zhì)粘度增加，順反異構(gòu)受到抑制，成為能發(fā)光的全反構(gòu)型。實(shí)驗(yàn)材料腫瘤細(xì)胞試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液DPH儀器、耗材熒光分光光度計(jì)離心機(jī)實(shí)驗(yàn)步驟1.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞，以pH7.2，0.01mol/l磷酸鹽緩沖液洗滌兩次。2.取

豬甲狀腺細(xì)胞2019/02/15: 實(shí)驗(yàn)方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織，所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯(lián)合消化法，用單一的胰蛋白酶消化效果一般；促甲狀腺激素(TSH)是培養(yǎng)甲狀腺細(xì)胞*的，它能夠起到促進(jìn)甲狀腺細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。實(shí)驗(yàn)材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養(yǎng)基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛TSH儀器、耗材眼科剪滴管離心機(jī)培養(yǎng)皿CO2培養(yǎng)箱實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)步驟1.殺豬后迅速取出甲狀腺1～2個(gè)，置于盛有75%酒精的燒杯中，用冰盒送至實(shí)驗(yàn)室(1h以內(nèi))。2.立即置于pH為7.4的PBS緩沖液(含青鏈霉素)中，反復(fù)漂洗，

BCPAP人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞培養(yǎng)說明書2019/02/15: BCPAP人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞培養(yǎng)說明書一、細(xì)胞培養(yǎng)條件細(xì)胞英文名稱BCPAP細(xì)胞中文名稱人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞生長(zhǎng)特性貼壁凍存條件90%FBS+10%DMSO培養(yǎng)體系DMEM+10%FBS氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%傳代方法1:2-1:4傳代情況2天換液備注收集瓶子培養(yǎng)基，過渡使用。BCPAP人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞培養(yǎng)說明書二、細(xì)胞收到后處理細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)暮棉k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包

小鼠輸卵管卵母細(xì)胞采集與結(jié)構(gòu)觀察實(shí)驗(yàn)2019/02/14: 實(shí)驗(yàn)方法原理哺乳動(dòng)物的卵子發(fā)生在卵巢的卵泡內(nèi)進(jìn)行。在卵母細(xì)胞成熟發(fā)育階段，初級(jí)卵母細(xì)胞發(fā)生生發(fā)泡破裂(germinalvesiclebreakdown,GVBD)現(xiàn)象，并完成次成熟分裂(減數(shù)分裂，以同源染色體分離為特征)，并排出極體。一般認(rèn)為，GVBD的發(fā)生和極體的排出是卵母細(xì)胞核成熟的標(biāo)志。之后，次級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行第二次成熟分裂(一般為有絲分裂,以染色單體分離為特征)，并停滯在第二次成熟分裂中期。在這期間，完成胞質(zhì)的后成熟。這時(shí)，卵泡發(fā)育成熟，將處于第二次成熟分裂中期的卵母細(xì)胞連同周圍的卵丘細(xì)胞

大鼠肝星狀細(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)2019/02/13: 實(shí)驗(yàn)方法原理將小鼠的肝細(xì)胞從機(jī)體中取出，經(jīng)胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖。實(shí)驗(yàn)材料SD大鼠試劑、試劑盒小牛血清DMEM酶消化液D-Hanks'液酚紅臺(tái)盼蘭HBSS氯化鈉PBS儀器、耗材手術(shù)刀手術(shù)剪尼龍網(wǎng)相差顯微鏡熒光顯微鏡實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備1.動(dòng)物：雄性SD大鼠(體重250-450g)。2.試劑：，小牛血清(或胎牛血清，則更好)，DMEM，酶消化液I、Ⅱ(以HBSS配)，18%Nycodenz(以GBSS配)，D-Hanks

人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)與增殖實(shí)驗(yàn)2019/01/25: 血管內(nèi)皮細(xì)胞不僅參與調(diào)節(jié)血管通透性和凝血過程，在免疫調(diào)節(jié)，移植排斥，腫瘤轉(zhuǎn)移，炎癥等許多過程中也具有重要作用。內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)是體外研究?jī)?nèi)皮細(xì)胞功能的重要手段。70年代Eric等建立了內(nèi)皮細(xì)胞分離及體外培養(yǎng)的方法。實(shí)驗(yàn)方法原理在體外，內(nèi)皮細(xì)胞在內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子存在的條件下可迅速增殖，并可傳代，可作為內(nèi)皮細(xì)胞增殖，細(xì)胞因子分泌、表型等研究的模型。實(shí)驗(yàn)材料膠原酶血清試劑、試劑盒CordBuffor硫酸鏈霉素生埋鹽水EDTA-Na明膠儀器、耗材插管止血鉗注射器手套絲線飯盒勻漿機(jī)離心機(jī)振蕩器培養(yǎng)瓶CO孵箱顯

人腫瘤抗原的識(shí)別與鑒定實(shí)驗(yàn)2019/01/22: 實(shí)驗(yàn)方法原理本實(shí)驗(yàn)用DynabeadsproteinA進(jìn)行免疫復(fù)合物的純化。DynabeadsA蛋白（DynabeadsProteinA）在免疫沉淀中有以下作用：（1）將方案時(shí)間減少到30分鐘。（2）顯著降低非特異性結(jié)合造成的背景（3）保持蛋白質(zhì)復(fù)合物的完整。對(duì)珍貴的蛋白質(zhì)沒有物理壓力。實(shí)驗(yàn)材料腫瘤細(xì)胞試劑、試劑盒PBS生理鹽水裂解液蛋白酶抑制劑儀器、耗材培養(yǎng)瓶細(xì)胞刮棒離心管低溫離心機(jī)-80℃冰箱探針型超聲波恒溫水浴鍋實(shí)驗(yàn)步驟一、裂解細(xì)胞1.方向刮取細(xì)胞。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管，離心取沉淀，-8

從小鼠中分離內(nèi)皮細(xì)胞2019/01/18: 內(nèi)皮細(xì)胞分布于整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，從心臟到小的毛細(xì)血管。在這個(gè)步驟中，氣管的活力很非常重要。取出器官和開始消化之間的時(shí)間越短將提高細(xì)胞更有活力的產(chǎn)出及不在含氧量低的條件下太久。小鼠的數(shù)量需要：小鼠應(yīng)該是5~6周大小。年齡大的小鼠內(nèi)皮細(xì)胞的產(chǎn)出會(huì)少些。少5個(gè)小鼠可以得到很好的產(chǎn)出。一、材料和試劑1.內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑（ECGS）（Sigma，catalognumber：E2759）2.膠原酶I（Invitrogen，Catalognumber：17100-017）3.BSA4.DMEM5.FCS6.An

NK細(xì)胞活性測(cè)定：LDH法2019/01/17: 實(shí)驗(yàn)方法原理活細(xì)胞的胞漿內(nèi)含有LDH。正常情況下，LDH不能透過細(xì)胞膜，當(dāng)細(xì)胞受到NK細(xì)胞的殺傷后，LDH釋放到細(xì)胞外。LDH可使乳酸鋰脫氫，進(jìn)而使NAD還原成NADH，后者再經(jīng)遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）還原碘硝基氯化四氮唑（INT），INT接受H＋被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶標(biāo)儀上用490nm比色測(cè)定。實(shí)驗(yàn)材料YAC-1細(xì)胞試劑、試劑盒Hank's液RPMI1640*培養(yǎng)液乳酸鋰乳酸鈉硝基氯化四氮唑吩嗪二甲酯硫酸鹽Tris-HCl緩沖液NP-40TritonNAD試劑盒儀器、耗材酶

細(xì)菌生長(zhǎng)及形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)2019/01/14: 實(shí)驗(yàn)方法原理觀察細(xì)菌菌落：觀察方法一般可用肉眼進(jìn)行觀察，將平皿培養(yǎng)物放在自然光或白熾燈光的面前，從不同的角度進(jìn)行觀察菌落，若菌落太小，可用放大鏡觀察。實(shí)驗(yàn)步驟1、觀察菌落：了解菌落的各種特征，以便確定對(duì)該菌落如何進(jìn)一步鑒別。菌落的各種特征及其描述如下：大?。褐睆揭院撩祝╩m）計(jì)算。形狀；點(diǎn)滴狀、圓形、絲形、不規(guī)則、根狀、似梭形。突起：扁平、隆起、凸起、枕狀、紐扣狀、臍狀。邊緣：光滑、波形、耳垂?fàn)睢忼X形、絲狀、卷發(fā)狀。顏色：白色、黃色、黑色、淡黃、橙黃等。表面：閃光、暗淡、其他。透明度：不透明、

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