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手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:逆轉(zhuǎn)錄酶,你真的了解嗎?2021/09/10
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:逆轉(zhuǎn)錄酶,你真的了解嗎?通過上期《手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:如何評估RNA質(zhì)量?》一文的學(xué)習(xí)。相信大家已經(jīng)獲得了優(yōu)質(zhì)的RNA,即將進入逆轉(zhuǎn)錄環(huán)節(jié)。對于逆轉(zhuǎn)錄,大家都知道它是以RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,合成互補DNA(complementaryDNA,cDNA)的過程(如圖1)。但對于過程中起關(guān)鍵作用的逆轉(zhuǎn)錄酶,可能比較陌生。接下來,讓小翌給大家介紹下逆轉(zhuǎn)錄酶的相關(guān)理論知識。圖1.逆轉(zhuǎn)錄過程示意圖逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)1970年美國科學(xué)家H
翌圣鬼筆環(huán)肽產(chǎn)品助力臨床材料研究2021/09/10
翌圣鬼筆環(huán)肽產(chǎn)品助力臨床材料研究2021年7月10號,蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院耿德春課題組在《BioactiveMaterials》(IF=14.593)發(fā)表題為“RationalintegrationofdefenseandrepairsynergyonPEEKosteoimplantsviabiomimeticpeptideclickingstrategy”的研究論文,該研究提出并開發(fā)了一種受貽貝啟發(fā)的仿生多肽涂層,提高了以聚醚醚酮(PEEK)為原材料的骨植入物的植入物-骨界面整合能力和抗感染能
轉(zhuǎn)染試劑精準(zhǔn)推薦,各種使用場景全覆蓋2021/09/10
轉(zhuǎn)染試劑精準(zhǔn)推薦,各種使用場景全覆蓋翌圣生物擁有雄厚的研發(fā)與生產(chǎn)團隊,不斷優(yōu)化配方,改良生產(chǎn)工藝,推出了多款以陽離子脂質(zhì)體與陽離子聚合物為基礎(chǔ)的產(chǎn)品。同時,為滿足更廣泛的客戶需求,我們與Polyplus公司強強聯(lián)手,為廣大科研院校與企業(yè)提供的產(chǎn)品,產(chǎn)品線覆蓋轉(zhuǎn)染試劑涉及的各個領(lǐng)域。產(chǎn)品優(yōu)勢?高效性:適合瞬時轉(zhuǎn)染或者穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系。?低毒性:轉(zhuǎn)染細胞保持很好的活性。?適應(yīng)性廣:普通細胞、難轉(zhuǎn)染的原代細胞、活體全面覆蓋。?操作簡便:適合血清存在的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后無需更換培養(yǎng)基。?性價比高:經(jīng)濟實用,
開學(xué)* | 好用又不貴的凋亡檢測試劑盒來了2021/09/10
開學(xué)*|好用又不貴的細胞凋亡檢測試劑盒來了小翌這次給要給大家介紹的是凋亡試劑盒同時也為大家送來福利啦開學(xué)季*活動重磅來襲滿滿干貨+*福利關(guān)注小翌不迷路哦~一年四季,春秋變換,宏觀宇宙也敵不過時間的侵蝕,構(gòu)成人體微觀世界的細胞更是如此,細胞凋亡伴隨著人的一生。細胞凋亡(apoptosis)一般是指機體細胞在發(fā)育過程中或在某些因素作用下,通過細胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物的調(diào)控而發(fā)生的一種程序性細胞死亡(programmedcelldeath)。細胞處于不同的凋亡階段具有不同的生物學(xué)特征,典型的特征包括:細胞膜
恭喜你~在做分子克隆之前看到了這篇福利好文!2021/09/03
恭喜你~在做分子克隆之前看到了這篇福利好文!分子克隆技術(shù)發(fā)展至今,從經(jīng)典的酶切酶連法到簡便、快速的同源重組法,同源重組技術(shù)廣受科研小伙伴的青睞!翌圣一步法快速克隆試劑盒(Cat#10911、10912)自上市以來,受到了眾多小伙伴的支持!好評如潮!看到各位小伙伴的反饋結(jié)果,小翌按捺不住內(nèi)心的喜悅,要與大家一同分享~一步法快速克隆試劑盒翌圣一步法快速克隆試劑盒是一種利用同源重組的原理,進行無縫克隆的技術(shù)。該技術(shù)無需考慮酶切位點,將PCR產(chǎn)物定向克隆至任何載體的任何位點,可高效克隆50bp-10kb
S-腺苷甲硫氨酸的性能2021/08/31
S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)是一種重要的中間代謝產(chǎn)物,可作為甲基供體、丙氨基供體及巰基化合物前體等參與體內(nèi)眾多生化反應(yīng),例如核酸、蛋白質(zhì)、磷脂質(zhì)和維生素等合成,也參與半胱氨酸、谷胱甘肽、多胺以及輔酶A和?;撬岬群蚧衔锏南嗷マD(zhuǎn)化等[1]。SAM是雙手性物質(zhì),有兩種異構(gòu)體:(+)-SAM和(-)-SAM,只有(-)-SAM具有生物活性[2]。SAM的制備方法主要有化學(xué)合成法、酶促合成法、發(fā)酵法等。在現(xiàn)代生物學(xué)研究中,SAM也作為mRNA體外合成穩(wěn)定性修飾的
如何評估RNA質(zhì)量?2021/08/31
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:如何評估RNA質(zhì)量?在上一期中,小翌闡述了RNA提取過程需注意的關(guān)鍵要點以幫助大家提取到高質(zhì)量的RNA(《一文解鎖RT-qPCR實驗之RNA提取攻略》)。那提取完RNA的質(zhì)量到底如何評估呢?今天我給大家來分享一下。評估RNA的質(zhì)量主要包含三個方面,分別是RNA的濃度、純度和完整性。RNA濃度評估首先我們先來復(fù)習(xí)一下OD260、OD280、OD230的含義。核酸分子所含的嘌呤和嘧啶堿基具有共軛雙鍵,在260nm波長處有最大吸收峰,因此,核酸的最大吸收波長為
一文Get原代細胞培養(yǎng)秘笈2021/08/27
一文Get原代細胞培養(yǎng)秘笈1概述原代細胞(PrimaryCell)是指從機體的組織或器官經(jīng)胰蛋白酶、膠原酶、中性蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體環(huán)境培養(yǎng)的細胞。▲圖1.原代組織細胞培養(yǎng)(源于網(wǎng)絡(luò))那原代細胞與細胞系有什么區(qū)別呢?小翌給你答案,見下表:特性原代細胞細胞系增殖能力較弱強繁殖代數(shù)一般只能傳10代以內(nèi)無限增殖,50代左右遺傳物質(zhì)完整性遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)發(fā)生改變生物特性臨床樣本偏離臨床樣本培養(yǎng)容易程度比較復(fù)雜簡單,易操作原代細胞培養(yǎng):由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代
MolPure® Soil DNA Kit 土壤DNA提取試劑盒簡介2021/08/27
MolPure®SoilDNAKit土壤DNA提取試劑盒——提取效果媲美進口M*品牌20世紀(jì)80年代中期前,微生物學(xué)家通過人工培養(yǎng)的方法研究土壤微生物生態(tài)系統(tǒng),而可培養(yǎng)的微生物不到總數(shù)的1%,相當(dāng)多的微生物還未被認(rèn)知。隨著宏基因組學(xué)的快速發(fā)展,通過提取土壤微生物總DNA來研究生態(tài)系統(tǒng)的方法開始出現(xiàn)。然而,土壤是一個非常復(fù)雜的異質(zhì)體系,其中,含有的腐植酸及腐植酸類似物、酚類化合物、重金屬離子等,在DNA提取過程中如不能有效去除,將直接影響后續(xù)的PCR擴增、核酸雜交、內(nèi)切酶消化等分子操作。為了解決這
單細胞測序,不是只有BD和10×Genomics2021/08/27
單細胞測序,不是只有BD和10×Genomics單細胞測序技術(shù)指的是通過高通量測序技術(shù)(NGS,NextGenerationSequencing)分析每一個單個細胞的序列信息,從而更高分辨率地揭示細胞間的細胞差異以及其在微環(huán)境中的功能情況。為什么要做單細胞測序單細胞測序發(fā)展的十余年,使得我們所認(rèn)知的這個世界越來越精準(zhǔn)。我們傳統(tǒng)的測序方法,是在組織水平或者說多細胞水平上進行的,最終得到的數(shù)據(jù)其實是從多個或者多類細胞中得到的平均值,但是無法明確細胞異質(zhì)性的信息。而單細胞測序,則能夠在更精細的單個細胞
1分鐘解鎖兩代轉(zhuǎn)染試劑的差異2021/08/27
1分鐘解鎖兩代轉(zhuǎn)染試劑的差異導(dǎo)讀化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中常用的轉(zhuǎn)染方法,主要包括兩類:陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物。在購買使用過程中,該如何選擇,他們之間的區(qū)別在哪,小翌來為大家進行簡要說明。陽離子脂質(zhì)體陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染是目前常用的轉(zhuǎn)染方式之一。其原理是陽離子脂質(zhì)體的基本結(jié)構(gòu)由帶正電荷的頭基和一個或兩個烴鏈組成,帶正電荷的頭基與帶負電荷的核酸通過靜電作用形成復(fù)合物,經(jīng)細胞的內(nèi)吞作用進入細胞。在DNA與陽離子脂質(zhì)體形成lipoplex的過程中,陽離子脂質(zhì)體起到復(fù)合和凝集DNA的作用,同時也
生物制品核酸殘留解決方案2021/08/25
UltraNuclease(全能核酸酶),又稱非限制性核酸內(nèi)切酶、廣譜核酸酶;是一種來源于SerratiaMarcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進行切割,將核酸*消化成2-5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸,能夠在非常廣泛的條件下(6MUrea,0.1MGuanidineHCl,0.4%TritonX-100,0.1%SDS,1mMEDTA,1mMPMSF)降解各種形式的(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀,天然或變性)DNA和RNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。本品經(jīng)基因工程改造在
DNA聚合酶的保真度檢測方法你了解嗎?2021/08/23
DNA聚合酶的選擇是聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)中的重要決策之一,相較于準(zhǔn)確度需求較低的菌落PCR等分析實驗,蛋白表達、突變檢測、基因篩選等準(zhǔn)確度要求較高的實驗,則需要選擇高保真DNA聚合酶,以保證擴增過程中的保真度。什么是DNA聚合酶的保真度DNA聚合酶的保真度指的是其進行準(zhǔn)確擴增模板的能力,確保DNA序列的高度準(zhǔn)確擴增。高保真酶具有3'到5'核酸外切酶的活性,可對聚合反應(yīng)時錯配的堿基進行切除,從而保證擴增的準(zhǔn)確性。錯配率是高保真DNA聚合酶保真性的一個通用標(biāo)準(zhǔn),錯配率越低保真性越好。保真度常用錯配
這才是CRISPR基因編輯實驗成功的關(guān)鍵點!2021/08/13
這才是CRISPR基因編輯實驗成功的關(guān)鍵點!導(dǎo)讀2021年8月5日,美國加州大學(xué)伯克利分校的JenniferDoudna團隊在NatureChemicalBilology發(fā)文稱開發(fā)了一種基于CRISPR的核酸檢測新技術(shù)來檢測xinguan,最快20min完成檢測,較于傳統(tǒng)的RT-qPCR檢測方法更快速,這是CRISPR在病毒檢測領(lǐng)域應(yīng)用的又一大進步。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)即成簇規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序
一鍵收藏:讓DNA甲基化觸手可得!2021/08/13
一鍵收藏:讓DNA甲基化觸手可得!PartⅠ何為DNA甲基化?DNA甲基化(DNAmethylation)是一種重要的表觀遺傳學(xué)標(biāo)記。是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMT)催化下,以S-腺苷甲硫氨酸為甲基供體,將活性甲基轉(zhuǎn)移至DNA鏈中特定堿基上的化學(xué)修飾過程。DNA甲基化與基因的調(diào)控表達,染色質(zhì)結(jié)構(gòu),基因印記,X染色體失活,衰老人類腫瘤發(fā)生中發(fā)揮重要作用。圖1.DNA甲基化的形成(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))PartⅡDNA甲基化功能基因表達調(diào)控生物體內(nèi),DNA復(fù)制后胞嘧啶的甲基化會改變DNA的構(gòu)象,使DN
雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)2021/08/13
雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)——更簡便、更靈敏、更準(zhǔn)確自1990年螢光素酶生物傳感器技術(shù)誕生,時至今日,螢光素酶報告基因的檢測系統(tǒng)被廣泛應(yīng)用于細胞信號通路、siRNA/miRNA、免疫應(yīng)答、藥物篩選等研究。螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)中具有代表性的是螢火蟲螢光素酶報告基因和海腎螢光素酶報告基因,由于兩種酶底物和發(fā)光顏色的區(qū)別,且在動物體內(nèi)無內(nèi)源性表達,使其在單、雙報告實驗中得到廣泛應(yīng)用。檢測原理螢火蟲螢光素酶是一種胞內(nèi)蛋白,大小為61KDa。在氧氣、ATP和鎂離子同時存在的條件下,催化底物螢火蟲螢光素
CUT&Tag測評 | 蓄勢已發(fā)的技術(shù)風(fēng)潮2021/08/10
CUT&Tag(CleavageUnderTargetsandTagment)作為一種新興的DNA蛋白互作研究技術(shù),憑借其信噪比高,可重復(fù)性好,實驗周期更快等優(yōu)勢,在植物以及動物細胞中的成功應(yīng)用與科研文章的發(fā)表[1-2],受到廣大科研工作者的信賴。CUT&Tag是蛋白質(zhì)與DNA互作研究的革新技術(shù),其核心技術(shù)為pA/G-Tn5Transposase,將ProteinA/G與Tn5轉(zhuǎn)座酶進行融合,使得與抗體結(jié)合的同時,Tn5切割核小體上纏繞的DNA片段,獲得目的序列并完成文庫構(gòu)建,實現(xiàn):上班拿到細胞
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:1.1提取高品質(zhì)RNA2021/08/06
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:1.1提取高品質(zhì)RNARNA提取是RT-qPCR實驗成功的首要步驟,RNA的質(zhì)量直接關(guān)乎RT-qPCR實驗的結(jié)果。但是在實驗過程中我們經(jīng)常會碰到RNA提取實驗翻車的情況,主要是因為RNA的分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定和無處不在的RNase對RNA的降解造成的。由此可見,想要提取到高質(zhì)量的RNA并非易事。今天,小翌主要從樣本選擇、樣本采集與保存、RNA提取這三個方面來闡述RNA提取過程需注意的關(guān)鍵要點,以輔助后續(xù)的qPCR實驗順利進行。樣本的選擇樣本最好選擇處于生長旺盛
快速PCR預(yù)混液,滿足您的多種擴增需求2021/08/06
快速PCR預(yù)混液,滿足您的多種擴增需求——提升PCR成功率,大幅減少擴增時間你還在擔(dān)心PCR擴增檢出率低嗎?你還在擔(dān)心PCR擴增產(chǎn)量低嗎?你還在擔(dān)心PCR擴增時間長嗎?翌圣Hieff®RobustPCRMasterMix是一款高檢出率型PCR預(yù)混液,通過酶結(jié)構(gòu)的改造、篩選及Buffer的優(yōu)化,決了常規(guī)PCRMix檢出率低、產(chǎn)量低的問題。另外,延伸速度提升至15-30s/kb,可用于基因的快速克隆。產(chǎn)品特點◎擴增速度達15-30s/kb,極限速度5s/kb◎擴增長度1-4kb◎模板適用性廣◎靶基因
多樣本直接PCR系列專題2021/08/06
PCR-basedGenotyping等實驗,常需純化樣本基因組。當(dāng)待測樣本較多時,純化基因組的過程費時、操作重復(fù),并且實驗成本高。翌圣生物通過改造TaqDNA聚合酶,優(yōu)化PCR反應(yīng)體系開發(fā)出無需基因組純化的DirectPCRKit系列產(chǎn)品。CleverPCR:DirectPCR翌圣DirectPCRKit是直接從樣本開始,以未經(jīng)基因組純化的微量原始樣本(圖1-A)或其裂解產(chǎn)物(圖1-B)作為模板,進行PCR-basedGenotyping(見圖1)。與常規(guī)PCR-basedGenotyping
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