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上海遠慕生物科技有限公司
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滴定分析法的滴定操作要點介紹2023/07/07
a滴定管在裝滿滴定液后,管外壁的溶液要擦干,以免流下或溶液揮發(fā)而使管內(nèi)溶液降溫(在夏季影響尤大)。手持滴定管時,也要避免手心緊握裝有溶液部分的管壁,以免手溫高于室溫(尤其在冬季)而使溶液的體積膨脹(特別是在非水溶液滴定時),造成讀數(shù)誤差。b使用酸式滴定管時,應將滴定管固定在滴定管夾上,活塞柄向右,左手從中間向右伸出,拇指在管前,食指及中指在管后,三指平行地輕輕拿住活塞柄,無名指及小指向手心彎曲,食指及中指由下向上頂住活塞柄一端,拇指在上面配合動作。在轉(zhuǎn)動時,中指及食指不要伸直,應該微微彎曲,輕輕
ATCC菌株是什么?怎樣采購ATCC標準菌株?2023/07/07
ATCC是美國的一個微生物菌株保藏中心。每種已經(jīng)定名的細菌都會有一個模式菌株,一般就是該種最早發(fā)現(xiàn)的那株菌株,稱為標準菌株,用來作為和其他細菌之間比較的對照物。新種鑒定的時候作為參比的實驗菌株就必須是標準菌株。細菌(學名:Bacteria)是指生物的主要類群之一,屬于細菌域。也是所有生物中數(shù)量最多的一類,據(jù)估計,其總數(shù)約有5×10^30個。細菌的形狀相當多樣,主要有球狀、桿狀,以及螺旋狀。細菌也對人類活動有很大的影響。一方面,細菌是許多疾病的病原體,可以通過各種方式,如接觸、消化道、呼吸道、昆蟲
NK細胞和K細胞的不同點分析2023/07/06
NK細胞和K細胞的不同點:1、數(shù)量不同K細胞占血液中淋巴細胞總數(shù)的5%~7%,NK細胞占血中淋巴細胞總數(shù)的2%~5%。2。免疫殺傷方式不同K細胞必須在抗體協(xié)助下才能具有免疫殺傷作用,NK細胞不需抗原激活,更不需抗體的協(xié)助,它可直接殺傷靶細胞。3、細胞體積不同K細胞體積略大,是中型淋巴細胞,其直徑約為9~12μm。NK細胞是大淋巴細胞,平均直徑為12~15μm,胞質(zhì)較多,在胞質(zhì)內(nèi)有許多大小不等的嗜天青顆粒。4、免疫性質(zhì)不同K細胞主要攻擊比微生物大的靶細胞,可以是病毒感染的細胞,如慢性活動性肝炎中的
生物菌種凍干保存步驟介紹2023/07/06
凍干機適用于大多數(shù)細菌、放線菌、病毒、噬菌體、立克次體、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏,但不適于霉菌的菌絲型、菇類、藻類和原蟲等。生物菌種凍干保存步驟,其操作流程如下:1、安瓿管準備安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性,干燥后、貼上標簽,標上菌號及時間,加入脫脂棉塞后,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。2、保護劑的選擇和準備保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時,應注意其濃度及pH值,以及滅菌方法。如血清,可用過濾滅菌
配制微生物培養(yǎng)基的基本需求2023/07/05
配置微生物培養(yǎng)基需要:1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。3、將培養(yǎng)基的pH控制在適宜的范圍之內(nèi),以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。4、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。5、如需要加熱的時候注意時間的把握。步驟:(一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,加熱溶解,補充水分,測
關于質(zhì)控菌株的基本分類及特點簡介2023/07/05
質(zhì)控菌株本質(zhì)上是標準菌株的商業(yè)衍生產(chǎn)品,其應有可靠的溯源證明追溯至其使用的標準菌株來源,在微生物實驗室僅可作為工作菌株進行使用,在使用前也應進行特性和純度的確認。質(zhì)控定量菌株使用起來非常方便,基本就是用無菌水復溶帶菌小球,震蕩后即可或在其允許的存放條件及時間內(nèi)使用。自從2015版藥典生效后,質(zhì)控菌株這一標準菌株的商業(yè)衍生物慢慢熱了起來,原來的微生物實驗室,多數(shù)使用CMCC菌株,因此基本購買中檢所的0代標準菌株制成1代標準貯備菌株然后再制成工作菌株進行使用,或購買地方所制備的2-3代商業(yè)衍生物作為
細胞凍存液的原理及配制說明2023/07/04
細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分
從凍存的細胞提取RNA操作步驟2023/07/04
從凍存的細胞提取RNA1).將凍存管從液氮或冰箱中取出;2).不待細胞溶解,將Trizol500ul-1ml直接放入凍存管中,此時Trizol會凍成冰狀;3).將凍存管緩慢融化,并用加樣器吹打混勻;4).將細胞裂解液移至Eppendorf管中,16000′g離心1min,吸出管底絮狀沉淀;注釋:該步驟并非必要,多數(shù)Protocol省略該步驟,但加入該步中能明顯提高RNA的質(zhì)量;注意不能離心時間過長,否則沉淀難以吸出,將200ul黃槍頭尖部切去0.5cm操作;5).加入1/5體積的氯仿(約200u
滴定分析法的標準溶液制備要求2023/07/03
制備要求滴定分析用標準溶液的制備,一般要求的內(nèi)容,依據(jù)GB/601-2002中的12條規(guī)定:1、試劑純度:分析純以上:2、實驗用水:至少應符合GB/T6682中三級水的規(guī)格;3、配制標準物質(zhì)時的溫度:是指20℃時的溫度;4、分析天平、滴定管、容量瓶和移液管,均需定期校正;5、標定使用時的滴定速度,一般應保持在6~8ml/min;6、稱量基準試劑的質(zhì)量:質(zhì)量小于0.5g,按精確至0.01mg稱量;質(zhì)量大于0.5g,按精確至0.1mg稱量;7、制備時的濃度值范圍:應在規(guī)定濃度值的±5%范圍以內(nèi);8、
怎樣給標準溶液“續(xù)命”?2023/07/03
首先,請確保標液按證書上建議的保存條件進行保存,保證化合物的穩(wěn)定。溶劑揮發(fā)、化合物分解等各種因素會使標準溶液的濃度標準值發(fā)生改變,造成后續(xù)使用時定值不準。因此遠慕生物建議:1、標液原液原則上不建議多次或者長期使用,最好是一次性配制成儲備液。如需多次或長期使用,請分裝成可供單次使用的包裝、在證書條件下保存,最重要的是,盡快用完!2、貯備液、工作液分裝成可供單次使用的包裝、在證書條件下保存為宜;3、化學性質(zhì)不穩(wěn)定的化合物,工作溶液現(xiàn)配現(xiàn)用;4、分裝需使用密封性好、化學穩(wěn)定性好的儲存瓶或進樣瓶:●化合
聚合酶鏈式反應(PCR)詳細實驗步驟2023/06/30
一、準備工作1、實驗器具與材料:(1)移液槍:200ul、10ul(2)吸頭:200ul、20ul(3)吸頭臺:放置200ul和20ul的吸頭一個(4)EP管1.5ml、100ul2、實驗器具的處理與準備塑料制品:(包括吸頭、EP管等)送至高壓3次,試驗前將槍頭放入吸頭臺。3、試劑配制和準備:(1)雙蒸水:100ml鹽水瓶內(nèi)裝40ml蒸餾水,送至高壓,后分裝到幾個1。5mlEP管中,-20℃中保存?zhèn)溆?。?)PCR中所需要的各種試劑二、PCR時注意事項:佩戴一次性手套,同時避免戴上的一次性的手套
?pH計的原理、使用、維護及數(shù)字不穩(wěn)定現(xiàn)象原因總結!2023/06/30
pH計,酸度計主要指實驗室酸度計,主要分為臺式pH計|酸度計,便攜式pH計|酸度計,筆式pH計|酸度計三大類別。一、pH計|酸度計原理用pH計|酸度計進行電位測量是測量pH最jing密的方法。pH計|酸度計由三個部件構成:1.一個參比電極;2.一個玻璃電極,其電位取決于周圍溶液的pH值;3.一個電流計,該電流計能在電阻極大的電路中測量出微小的電位差。由于采用最新的電極設計和固體電路技術,現(xiàn)在最hao的pH計|酸度計可分辨出0.005pH單位。參比電極的基本功能是維持一個恒定的電位,作為測量各種偏
逆轉(zhuǎn)錄PCR的實驗步驟2023/06/29
一、實驗器具與材料:1、移液槍:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸頭:1ml、200μl、20μl3、勻漿管:5ml4、吸頭臺:放置1ml吸頭的一個,放置20μl吸頭的一個5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl6、試劑瓶:2個60ml的棕色試劑瓶(廣口,帶蓋);1個125ml的白色試劑瓶(放無水乙醇)7、量筒:50ml、250ml、500ml8、容量瓶:250ml、500ml、1000ml9、試管架:5ml、1.5ml、20μl10、鹽水瓶:250ml、500ml各2個
生物素標記蛋白操作方法2023/06/29
下面的操作方法可以使約3~5分子的生物素與1分子的蛋白結合,對某些蛋白來說,生物素與蛋白的分子比可根據(jù)不同的生物素化要求進行調(diào)整。1.溶解2~10mg蛋白于1ml的BuphTm磷酸鹽緩沖液中,并計算溶解的毫摩爾數(shù)。如果蛋白含有不恰當?shù)木彌_液(如Tris或者甘氨酸),可以通過在PBS中透析或濃縮的方法除去。計算:蛋白質(zhì)量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白質(zhì)的毫摩爾數(shù)。2.在打開之前,平衡生物素至室溫。加2mgSulfo-NHS-Biotin于100ul超純水中,加入足夠量濃度的生物素,一般對于10
胎牛血清白蛋白提取操作步驟2023/06/28
胎牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種白蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應緩沖液中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性。是胎牛血清中的一種球蛋白,一般獲取胎牛血清白蛋白,常常運用的方法是加熱法。下面一起來看
牛血清白蛋白的各種分類與作用2023/06/28
牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等電點4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結合。牛血清蛋白溶液可以作為測量蛋白質(zhì)含量的標準曲線用。一般買回來的牛血清蛋白是細小片狀的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以鐵為基本原料。1、特純級牛血清蛋白用途:用作酶標、金標等診斷試劑的封閉劑,生化試驗等。
凝膠層析分離物質(zhì)的優(yōu)缺點分析2023/06/27
凝膠層析分離物質(zhì)的優(yōu)缺點1.凝膠層析操作簡便,所需設備簡單。有時只要有一根層析柱便可進行工作。分離介質(zhì)—凝膠wan全不需要像離子交換劑那樣復雜的再生過程便可重復使用。2.分離效果較好,重復性高。最tu出的是樣品回收率高,接近100%。3.分離條件緩和。凝膠骨架親水,分離過程又不涉及化學鍵的變化,所以對分離物的活性沒有不良影響。4.應用廣泛。適用于各種生化物質(zhì),如肽類、激素、蛋白質(zhì)、多糖、核酸的分離純化、脫鹽、濃縮以及分析測定等。分離的分子量范圍也很寬,如SephadexG類為102~105d;S
生物素標記抗體和蛋白使用方法2023/06/27
生物素,是一個分子量只有244.31Da的小分子,經(jīng)活化后可與蛋白、抗體等生物大分子結合,不僅可以很好地保持大分子的生物活性,而且與親和素結合使用時具有多級放大作用,使其廣泛應用于微量抗原、抗體定性、定量檢測及定位觀察研究。那么如何使用生物素標記抗體或蛋白呢?下面遠慕給大家分享一下。工具/原料1.10ul,50ul,200ul,1000ul可調(diào)高精度移液器2.恒溫箱(37℃)3.離心機(離心力可達到12,000×g)4.生物素標記試劑盒(Cata.No:EBLK0002,Elabscience)
DAB染色液的使用方法及注意事項2023/06/26
DAB染色液用于免疫組化染色,應用在Dako自動染色系統(tǒng)上。DAB染色液的使用方法1.DAB顯色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3,3-二氨基聯(lián)苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,顯色時加入5-10mL30%H2O2混勻后立即使用2.顯色準備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過氧化酶(HRP)標記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿整個固相膜表面(
辣根過氧化物酶的簡介和用途2023/06/26
辣根過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP),是臨床檢驗試劑中的常用酶。該產(chǎn)品不但廣泛用于多個生化檢測項目,也廣泛運用于免疫類(ELISA)試劑盒。過氧化物酶作為多個試劑盒顯色體系的關鍵成分,對試劑盒的質(zhì)量有重要影響。辣根過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)比活性高,穩(wěn)定,分子量小,純酶容易制備,所以最chang用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個同工酶組成,分子
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