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轉(zhuǎn)化細胞增殖生長方面實驗2018/03/08
測定轉(zhuǎn)化細胞增長數(shù)值常用zui簡便的方法。一般過程為1.接種21孔/24孔板細胞(如用培養(yǎng)瓶時則21瓶)。2.分7組,每組3孔(或瓶),培養(yǎng)一周(7天),期間逐日檢測一組,計數(shù)。3.把7天中的細胞數(shù)值繪成圖,即為細胞生長曲線。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1.懸液制備取待測生長狀態(tài)良好細胞,增長至接近匯合時,向培養(yǎng)瓶內(nèi)加1ml升0.25%胰蛋白酶液,37℃溫箱中消化,至細胞接近脫離瓶壁前吸出消化液、加新的培養(yǎng)液、輕吹打制備成細懸液、計數(shù);2.接種向每孔中接種等量細胞,置溫
ATCC細胞獲得無限表達所需是試劑2018/03/06
(1)ATCC細胞瞬時表達:通??梢允沟鞍自诩毎袝簳r表達數(shù)天到數(shù)周。瞬時表達常用于驗證cDNA是否能夠指導(dǎo)蛋白的合成,比較表達同一蛋白的不同載體的有效性,在進行建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系之前,通過瞬時表達來驗證重組表達載體的正確性是十分必要的。然而,瞬時表達難以按比例產(chǎn)生大量蛋白質(zhì)(1mg),此外,整個細胞群體中只有部分細胞暫時得到蛋白表達,不利于細胞表型的研究。(2)穩(wěn)定表達:通過利用共轉(zhuǎn)染的標記篩選系統(tǒng),如G418等,對DNA轉(zhuǎn)染后的哺乳動物細胞進行選擇,使質(zhì)粒DNA穩(wěn)定整合到宿主細胞染色體上,
干細胞在人體中有多種組織來源2018/03/01
近年來,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)成人干細胞在人體中有多種組織來源,其中包括胎盤組織。來自Celularity公司的科研人員認為,與其他組織來源的干細胞相比,胎盤干細胞更為重要,胎盤干細胞不僅免疫原性很低,同時還具有免疫調(diào)控作用;胎盤干細胞可在直系親屬間使用,對配型的要求低;此外,胎盤干細胞含量豐富,用于治療可能會更加便宜。羅伯特·哈里里是一名工程師、外科醫(yī)生和企業(yè)家,于1998年開始從事胎盤干細胞的研究工作。他向媒體表示,迄今為止,這家創(chuàng)業(yè)公司已經(jīng)進行了幾次臨床試驗,下一步是嘗試向FDA提交申請以擴大這種治療
ATCC細胞突觸形成的作用2018/02/27
ATCC細胞在大腦的免疫系統(tǒng)中起作用,而且免疫信號通過位于這些細胞表面上的受體與大腦進行溝通。美國加州大學(xué)舊金山分校精神病學(xué)助理教授AnnaMolofsky博士和實驗室醫(yī)學(xué)助理教授AriMolofsky博士正在研究在正常情形下,這兩個過程在大腦發(fā)育過程中如何發(fā)生,以便希望確定平衡的微妙變化如何導(dǎo)致神經(jīng)發(fā)育障礙。在一項新的研究中,由AnnaMolofsky和AriMolofsky領(lǐng)導(dǎo)的一個研究團隊證實一種被稱作白細胞介素33(IL-33)的免疫信號在允許大腦在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)發(fā)育期間維持*的
腫瘤細胞表面染色2018/02/24
收集各組腫瘤細胞,進行細胞計數(shù),加入適量WashBuffer液洗滌,1500rpm離心5min,去上清,加入50μlWashBuffer重懸。(可選)Livedead染色,每管加0.1μLZombieGreenTMDye(樣品多時使用時可先稀釋),震蕩混勻,室溫避光孵育10~15min。WashBuffer液洗滌,1500rpm離心5min,棄上清。封閉Fc受體:每管中加入1μg/106細胞Anti-MouseCD16/CD32抗體封閉熒光抗體Fc受體引起的非特異性染色。震蕩混勻,4℃孵育30m
如何選擇性消滅干細胞?2018/02/10
干細胞在的研究中,科學(xué)家們將研究重點放在一個備受關(guān)注的纖維化疾病上——自發(fā)免疫性硬皮癥(autoimmuneconditionscleroderma)。這種疾病的患者常常面臨皮膚增厚、纖維化至硬化、萎縮,而且這種退行性病變會進一步危害肺、心臟、腎臟等器官。疾病晚期,不少患者會因為肺部受損、窒息而死。他們專注于zui核心的挑戰(zhàn):如何“誘導(dǎo)”肌成纖維細胞自我凋亡?有意思的是,他們發(fā)現(xiàn),在肌成纖維細胞造成硬皮癥過程中,線粒體會表達一種引發(fā)凋亡程序的關(guān)鍵蛋白——BIM。但是,成纖維細胞并沒有凋亡?!斑@意
維持ATCC細胞恢復(fù)的策略2018/02/08
ATCC細胞是一類位于血管內(nèi)壁的特殊類型細胞,其通常會形成動脈、靜脈和毛細血管,長期以來內(nèi)皮細胞都被認為是血液的被動通道。人類機體的造血系統(tǒng)通常負責(zé)產(chǎn)生人類一生所需要的血液細胞,如今我們也知道,隨著年齡增長人類的造血系統(tǒng)功能也會隨之下降;所有的血細胞都來自于一種分級系統(tǒng),而其共同的祖先細胞就是造血干細胞,在一個人的一生中,這些造血干細胞會持續(xù)供應(yīng)人類機體所需要的所有類型細胞,包括不同類型的免疫細胞等。隨著機體衰老,血液干細胞也并不太會*地發(fā)揮自身的功能了,這就會導(dǎo)致65歲以上的人群機體抵御感染疾
促進干細胞生存有效途徑2018/02/06
干細胞自噬是真核生物中相對保守的一種亞細胞途徑,其分子機制非常復(fù)雜且高度保守。細胞自噬與細胞凋亡、細胞衰老一樣,是十分重要的生物學(xué)現(xiàn)象,參與生物的發(fā)育、生長等多種過程。自由基氧、線粒體損傷和細胞漿的Ca2+一等共同誘因可以導(dǎo)致細胞自噬、細胞凋亡和細胞衰老。在正常條件下,雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin,mTOR)途徑介導(dǎo)細胞自噬,這有助于細胞適應(yīng)壓力,促進細胞的生存。但是細胞的自噬、凋亡和衰老之間的關(guān)系較為復(fù)雜。例如阻斷細胞自噬可能加強細胞的凋亡,加快或延緩衰
Ⅱ型肺泡上皮細胞產(chǎn)品的運輸和保存2018/02/01
Ⅱ型肺泡上皮細胞詳述肺泡組織是機體暴露于外界環(huán)境的zui大表面,哺乳動物肺臟由40多種不同類型細胞組成Ⅱ肺泡上皮細胞,為小的,立方形細胞,胞體較小,核圓,占上皮細胞的60%左右,占所有肺細胞的15%左右,但僅覆蓋5%的肺泡表面。處于小內(nèi)皮和間質(zhì)細胞、大的巨噬細胞和Ⅰ型細胞之間。細胞特性1)組織來源于實驗動物的正常肺組織。2)細胞鑒定:肺表面活性蛋白A(SP-A)免疫熒光染色為陽性。3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。5)細胞生長方式:鋪路
干細胞能持續(xù)保持分裂功能2018/02/01
肌營養(yǎng)不良癥的干細胞治療發(fā)展,其實并不順利,擺在科學(xué)家們面前的一大難題是,雖然干細胞能夠分化出特定組織的新細胞,但是,干細胞一旦分化為肌纖維,就停止了分裂,這就引起再生組織不足,因此無法進行有效的移植。UBC生物醫(yī)學(xué)研究中心和生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院的遺傳學(xué)教授FabioRossi博士說:“干細胞雖然能分化成任意種類的細胞,但是一旦分化成特定細胞,就無法繼續(xù)分化成其他細胞了。我們希望干細胞能持續(xù)保持分裂功能而不進行分化,只有這樣他們才能繼續(xù)增殖,產(chǎn)生足夠的干細胞,使我們得到足夠的再生組織,從而進行有效移
轉(zhuǎn)化細胞早期分化中去抑制的基因2018/01/30
轉(zhuǎn)化細胞是一種高度未分化細胞。它具有發(fā)育的多能性,能分化出成體動物的所有組織和器官,包括生殖細胞。Oct4、Nanog、Sox2等多能性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子通過自調(diào)節(jié)或反饋調(diào)節(jié)等方式調(diào)控胚胎干細胞的自我更新和分化。2008年,Chen等用ChIP-Seq檢測了Nanog、Oct4、STAT3、Smad1和Sox2等13個序列特異性的轉(zhuǎn)錄因子與基因組DNA的結(jié)合情況。這些轉(zhuǎn)錄因子都是LIF和BMP途徑的重要調(diào)控分子,發(fā)現(xiàn)有些位點是幾個轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合共同起調(diào)節(jié)作用,如Nanog、Sox2、Oct4、Smad1
如何保護腫瘤細胞不被微生物污染2018/01/25
近年來,腫瘤細胞安全問題所引發(fā)的災(zāi)難性事件層出不窮,已經(jīng)成為了關(guān)系到國計民生的社會問題,對國家的經(jīng)濟發(fā)展、社會穩(wěn)定造成了極大的影響。加強食品安全工作、完善食品安全行業(yè)供應(yīng)鏈、提高技術(shù)保障手段已經(jīng)迫在眉睫。防止和減少食品被微生物污染,能夠有效的減少此類事件的發(fā)生。借此小編收集了防止和減少食品微生物污染的主要保藏方法如下:1、冷藏食品貯藏于低溫時可以大大延長食品的保質(zhì)期,還可以由于降低新鮮食品如水果、蔬菜中本身的酶活性,而保持食品的新鮮度。但各類食品對于冷藏的溫度要求不一樣。對于馬鈴薯、蘋果、大白菜
腫瘤細胞的三大定義2018/01/23
定義1:腫瘤細胞具有無限制自我更新能力、同時也可分化成特定組織的細胞,在細胞發(fā)育過程中處于較原始階段。定義2:在動物胚胎和成體組織中一直能進行自我更新、保持未分化狀態(tài)、具有分裂能力的未分化細胞。包括胚胎干細胞和成體干細胞兩大類。定義3:一類未分化的、具有無限分裂能力的細胞,能通過一次有絲分裂產(chǎn)生兩個細胞,一個保持未分化狀態(tài),另一個則進入分化途徑。干細胞(stemcells,SC)是一類具有自我復(fù)制能力(self-renewing)的多潛能細胞,在一定條件下,它可以分化成多種功能細胞。根據(jù)腫瘤細胞
ATCC細胞換液傳代時如何洗瓶?2018/01/18
對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的ATCC細胞,我們在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝*。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。小編今天先更新這么多,后續(xù)還會有新內(nèi)容更新,請繼續(xù)關(guān)注我們北納生物www.bnbio。。com。zui后再補充一點:傳代時P
結(jié)合水的比值與ATCC細胞的生命狀態(tài)之間的關(guān)系2018/01/16
在活A(yù)TCC細胞中,水是含量zui多的化合物1.存在形式:自由水(約95%)和結(jié)合水(約4.5%)2.自由水:在細胞中可自由流動功能:是細胞內(nèi)良好的溶劑;參與細胞的許多生物化學(xué)反應(yīng)為細胞提供液體環(huán)境;運輸營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物3.結(jié)合水:在細胞中通過氫鍵等與蛋白質(zhì)、糖類、核酸等物質(zhì)結(jié)合在一起。功能:是細胞結(jié)構(gòu)的重要組成成分4.自由水與結(jié)合水的比值與細胞的生命狀態(tài)自由水/結(jié)合水的值越高,細胞代謝越旺盛;值越低,抗逆性越強。5.不同種子的吸水性花生種子吸水性6.水與代謝的關(guān)系1.消耗水的代謝:光反應(yīng)有氧
干細胞擁有可視化系統(tǒng)2018/01/11
干細胞是生物的主要類群之一,屬于細菌域。細菌是所有生物中數(shù)量zui多的一類。據(jù)物理學(xué)家組織網(wǎng)日前報道,zui近,研究人員解析了科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的一種分子研究的新方法,為了解人們?nèi)绾伪患毦腥鹃_啟了大門。該小組的研究對象是一種常見細菌卡他莫拉菌,它會引發(fā)嬰兒中耳感染,也是心臟病發(fā)病的主要原因。他們數(shù)年來通過分子醫(yī)學(xué)方法,對莫拉克斯氏菌屬細胞表面的蛋白質(zhì)進行隔絕和研究,并zui終獲得其關(guān)鍵性蛋白UspA1的特性。研究人員通過一種新的原子力顯微鏡,即分子的橫向力顯微鏡(LMFM),很好地解決了這一顧慮。他們
腫瘤細胞突變有多種形式2018/01/09
腫瘤細胞突變有多種形式,比如在zui為常見類型的突變中,單個個體或細胞中的突變往往會發(fā)生在DNA序列的單一位點上;而另一種常見的突變則為拷貝數(shù)變異;研究者分析了來自大量腫瘤樣本中的拷貝數(shù)變異,研究者表示,你或許會認為腫瘤中的每一個細胞都是相同的,但實際上并不是這樣。我們同產(chǎn)會認為在單一腫瘤細胞中發(fā)生這許多改變,如果我們對癌癥進行治療,就需要準確診斷個體的癌癥類型,而且同時利用多種不同藥物來靶向作用不同癌癥亞型或許也可以有效抑制癌癥發(fā)展。當前探究拷貝數(shù)變異的強大的單細胞分析技術(shù)就是全基因組測序,在
腫瘤細胞的干法凈化技術(shù)2018/01/05
腫瘤細胞通常是指含有氣態(tài)氟化氫和四氟化硅的廢氣。目前對含氟廢氣的治理主要有吸收法(濕法)和吸附法(干法)。干法凈化技術(shù)俗稱吸附法,是以粉狀的吸附劑吸附廢氣中的氟化物。該法凈化效率高、可回收氟、工藝簡單、不存在水的二次污染及設(shè)備腐蝕問題等。但凈化設(shè)備的體積較大。1輸送床吸附法輸送床吸附法俗稱管道吸附法。其工藝流程見圖9.3。來自鋁電解槽的含HF煙氣通過管道進入輸送床后與加入的氧化鋁粉末相混合。在管道中的高速氣流帶動下,氧化鋁粉末高度分散。與HF充分接觸,在很短時間內(nèi)完成吸附過程,再經(jīng)袋式過濾器分離
干細胞的選擇技巧2018/01/03
干細胞選擇指示劑時,一般要求變色明顯(所以一般不選用石蕊),指示劑的變色范圍與恰好中和時的pH要吻合。①在酸堿中和滴定的實驗中,不用石蕊作指示劑,主要原因是:石蕊的“紅色→紫色”、“紫色→藍色”的顏色變化不夠明顯,不利于及時、準確地作出酸堿是否恰好*中和的判斷。②強酸強堿相互滴定,生成的鹽不水解,溶液顯中性,可選擇酚酞或甲基橙作指示劑。酚酞:酸滴定堿——顏色由紅剛好褪色;堿滴定酸——顏色由無色到淺紅色。甲基橙:酸滴定堿——顏色由黃色到橙色;堿滴定酸——顏色由紅色到橙色。③強酸弱堿相互滴定時,由于
干細胞或可改善對慢性疾病的管理2017/12/28
干細胞大數(shù)據(jù)就意味著大型的無社會組織及多樣化的數(shù)據(jù)庫,這些數(shù)據(jù)庫并不能利用常規(guī)的方法來進行利用和管理,而在醫(yī)療保健領(lǐng)域,大數(shù)據(jù)及其分析可以幫助研究者們發(fā)現(xiàn)一些未知的信息,從而使得我們可以對疾病進行預(yù)測,進而改善患者的生活質(zhì)量及花費。這項合作旨在尋找改善糖尿病及精神健康管理的方法,研究者希望可以利用來自患者個體健康的記錄、醫(yī)療記錄及健康設(shè)備的信息,同時收集健康數(shù)據(jù)的傳統(tǒng)來源,比如醫(yī)學(xué)記錄、理賠數(shù)據(jù)以及臨床研究,這項研究將會是新一代的工具,可以為病人的治療提供更好的見解、實時地反饋以及建議等,從而幫
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