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上海雅吉生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年
免疫組化常見問題的處理2020/12/17
當(dāng)免疫組化染色沒有出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果時(shí)，應(yīng)系統(tǒng)地查找原因，而每一次只能排除一種可能的原因。對(duì)照/標(biāo)本無染色①確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑，包括一抗、二抗、三抗及底物等。②確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入，是否孵育了足夠的時(shí)間。③對(duì)照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體，以及所用的檢測(cè)系統(tǒng)是否和一抗匹配，這一點(diǎn)是非常重要的。比如，如果一抗是兔來源的抗體，二抗一定要用抗兔的二抗來匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM（不是IgG）二抗。④檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。⑤檢查
免疫組化小貼士2020/12/17
1．固定：。好用4%的多聚甲醛固定液。對(duì)于冰凍切片，甲醛固定有時(shí)比冰凍丙酮好；但對(duì)于不同的組織和抗原，可選用不同的固定液。有時(shí)候商品化的抗體會(huì)有比較適合而推薦的固定液，請(qǐng)于購置前注意說明書。BouinS固定液：飽和苦味。酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其對(duì)組織的穿透力較強(qiáng)，固定較好，結(jié)構(gòu)完整，但因偏酸，對(duì)抗原有一定損害，且組織收縮明顯，不適于組織標(biāo)本的長(zhǎng)期保存。PLP液：即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛，適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織，對(duì)超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存較好。2．組織
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）酶聯(lián)免疫分析2020/12/16
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T30ng/L-1200ng/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）水平。用純化的人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP），再與HRP標(biāo)記的神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）抗體結(jié)合，形成抗
NADPH-細(xì)胞色素C還原酶（NCR）測(cè)試盒2020/12/15
NADPH-細(xì)胞色素C還原酶（NCR）活性測(cè)定試劑盒說明書微量法100管/96樣注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。測(cè)定意義：細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶，在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用，尤其是藥物和毒物的代謝。NCR作為P450酶系的重要一員，催化氧化型P450還原再生。測(cè)定原理：NCR催化NADPH還原氧化型細(xì)胞色素C，還原型細(xì)胞色素C在550nm處有特征吸收峰；通過測(cè)定550nm吸光度的增加速率，來計(jì)算NCR活性。自備儀器和用品：普通離心機(jī)，超速離心機(jī)、
IHC之石蠟切片16種常見問題全解析2020/12/14
樣本的制備是IHC實(shí)驗(yàn)成功的前提條件。樣本完成石蠟包埋后，需要成約3-4um的薄片。本文主要介紹了切片小技巧及過程中容易出現(xiàn)的16種問題切片小技巧②切片厚度3-4μm（淋巴結(jié)、扁桃體、鼻咽、扁桃體2-3μm；脂肪5-6μm）④切片動(dòng)作輕，用力均勻。⑥刀片鋒利，切片角度5°，切片平整無褶皺和收縮。⑧蠟塊表面有鈣點(diǎn)，應(yīng)20%HCL表面泡1-2h，水洗后切。切片光面朝下展片、撈片。?攤片水溫利于展平又不熔化，必要時(shí)用20%酒精攤片。?細(xì)小組織（穿刺、內(nèi)鏡小標(biāo)本）可以多貼幾個(gè)。?在烘烤切片前應(yīng)做好排水，
冷凍切片的方法及注意事項(xiàng)2020/12/14
作者：日期：2016-08-15一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備1、清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)及儀器2、開啟冷凍切片機(jī)并將冷凍切片機(jī)預(yù)降至所需溫度（-15~-20℃*）3、準(zhǔn)備好處理好的載玻片、刀片、膠水以及藥品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鮮組織，用干紗布或?yàn)V紙擦干后不需固定直接取材（24×24×2mm*）,以防形成冰晶造成切片中形成形狀不一的空泡,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)移位。注：取材中目的標(biāo)本既要明確也要確保其結(jié)構(gòu)的完整性，應(yīng)避免不必要的脂肪及壞死組織附著;要盡量剔除毛發(fā)、硬骨或鈣化物;保乳手術(shù)切緣由于脂肪組織較多,取材厚度.好不要
CCCCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的原理性的原理2020/12/11
一、CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8（簡(jiǎn)稱CCK-8）試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*（1-MethoxyPMS）的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazandye）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)
糜蛋白酶（Chymotrypsin）試劑盒2020/12/09
糜蛋白酶（Chymotrypsin）試劑盒說明書微量法100T/96S注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。測(cè)定意義：糜蛋白酶，又稱胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對(duì)膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。測(cè)定原理：糜蛋白酶催化ATEE水解，產(chǎn)物在237nm有特征光吸收；通過測(cè)定237nm光吸收增加速率，來計(jì)算糜蛋白酶
紅霉素-N-脫甲基酶（ERND）活性測(cè)定試劑盒2020/12/09
紅霉素-N-脫甲基酶（ERND）活性測(cè)定試劑盒說明書微量法100T/48S注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。測(cè)定意義：細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的酶系，在外源物質(zhì)代謝中，尤其是藥物和毒物的代謝，具有重要作用。ERND在P450酶系中相當(dāng)于CYP2B亞型，與藥物代謝的去甲基化密切相關(guān)。CYP2B具有催化底物形成非活性易于排泄的代謝產(chǎn)物而具有解毒作用，也可使某些藥物經(jīng)CYP2B代謝活化。測(cè)定原理：ERND催化紅霉素釋放甲醛，通過Nash比色測(cè)定甲醛含量，即可計(jì)算出E
凝血活酶時(shí)間（APTT）測(cè)定試劑盒2020/12/08
【產(chǎn)品名稱】通用名稱：活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）測(cè)定試劑盒（凝固法）英文名稱：ActivatedPartialThromboplastinTime(APTT)Assaykit(coagulation)凝血活酶時(shí)間（APTT）測(cè)定試劑盒【包裝規(guī)格】1）APTT（鞣花酸）①試劑1mL×10瓶/盒；CaCl2溶液15mL×1瓶;②試劑1.5mL×10瓶/盒；CaCl2溶液20mL×1瓶;③試劑2mL×10瓶/盒；CaCl2溶液25mL×1瓶；④試劑4mL×10瓶/盒；CaCl2溶液45mL×1瓶
植物葉綠素（chlorophyll）含量測(cè)試盒2020/12/08
植物葉綠素、類胡蘿卜素（chlorophyll）含量試劑盒說明書可見分光光度法產(chǎn)品內(nèi)容：提取液：液體500mL瓶，4℃保存（自備，無水乙醇：丙酮=1:2）。試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。測(cè)定意義植物葉綠素、類胡蘿卜素廣泛存在于綠色植物組織中，其含量與光合作用、營(yíng)養(yǎng)狀況密切相關(guān)，是反應(yīng)植物生長(zhǎng)狀況的重要指標(biāo)。測(cè)定原理根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A
微量元素檢測(cè)2020/12/08
1.2.1微量元素檢測(cè)相關(guān)知識(shí)簡(jiǎn)介：微量元素又稱痕量元素、稀有元素，微量元素的標(biāo)準(zhǔn)含量均占人體總重量的萬分之一以下。目前在人體內(nèi)以測(cè)定70多種微量元素，它們的總重量只有人體總重量的0.05%。按照1990年WHO組織專家委員會(huì)的定義，微量元素按照其生物學(xué)作用分為（1）必需微量元素，8種：碘、鋅、硒、鐵、銅、鉬、鉻和鈷（2）可能必需元素，5種：錳、硅、硼、釩、鎳（3）潛在毒性元素，7種：氟、鉛、鎘、汞、砷、鋁和錫。微量元素是維持人體正常新陳代謝和生命活動(dòng)的重要物質(zhì)，具有*的生理功能，在參與機(jī)體正常
一步式RT-PCR 試劑盒2020/12/07
產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品是高效cDNA合成和PCR擴(kuò)增的一步法RT-PCR試劑盒，用于以RNA為模板，通過特異引物合成cDNA之后，在DNA聚合酶的作用下通過PCR技術(shù)檢測(cè)目標(biāo)基因的含量。本產(chǎn)品特點(diǎn)如下：實(shí)現(xiàn)一管式完成RT-PCR反應(yīng)，避免樣品交叉污染。反應(yīng)產(chǎn)物加入LoadingBuffer后可以直接電泳檢測(cè)。本產(chǎn)品包含了cDNA合成以及PCR反應(yīng)所必須的酶和反應(yīng)體系，優(yōu)化的Buffer體系減少了反轉(zhuǎn)錄酶對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)的抑制，提高了反應(yīng)整體的敏感性。本試劑盒足夠50次20μL體系的RT-PCR，只能用于科研
鼠疫F1抗體（plague-F1Ab） ELISA檢測(cè)試劑盒2020/12/07
本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷鼠疫F1抗體（plague-F1Ab）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被鼠疫F1抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中鼠疫F1抗體（plague-F1Ab）的存在與否。樣品收集、處理
人白細(xì)胞介素6（IL-6）ELISA檢測(cè)試劑盒2020/12/07
本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷人（Human）白細(xì)胞介素6（IL-6）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被白細(xì)胞介素6（IL-6）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素6（IL-6）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣品收
SDS-PAGE電泳的基礎(chǔ)原理和實(shí)驗(yàn)步驟2020/12/04
概述十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis，簡(jiǎn)稱SDS-PAGE）是聚丙烯酰胺凝膠電泳中。常用的一種蛋白表達(dá)分析技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)的原理，是根據(jù)檢體中蛋白質(zhì)分子量大小的不同，使其在電泳膠中分離。在大腸桿菌表達(dá)純化外源蛋白的實(shí)驗(yàn)中，SDS-PAGE更是*的操作，其通常用于檢測(cè)蛋白的表達(dá)情況（表達(dá)量，表達(dá)分布），以及分析目的蛋白的純度等。SDS-PAGE作用機(jī)理蛋白中含有很多的氨基(+)和羧基(-)，不同
SDS-PAGE電泳的常見問題2020/12/04
1.關(guān)于凝膠的一些問題1.膠的凝結(jié)不好，例如有花紋特別是濃度高的膠在冬天溫度較低的情況下，在分離膠的下部有波浪樣的花紋，凝膠不均勻。解決方法：加大TEMED和過硫酸胺的量，使其凝結(jié)速度加快。同時(shí)洗干凈玻璃板，防止有殘留的膠干結(jié)在玻璃板上。2.膠不凝，解決方法：溫度較低時(shí)加大TEMED和過硫酸胺的量，過硫酸胺必須新鮮配制。如若還是不行重新配制一下緩沖溶液。3.膠易碎，例如濃度較高的膠在染色和脫色過程以及掃描過程中破裂。解決方法：首先在上述過程中一定要?jiǎng)幼鬏p緩，其次在室溫較高的情況下可以適當(dāng)減少TE
解析即用型免疫組化試劑盒優(yōu)點(diǎn)2020/12/03
解析即用型免疫組化試劑盒優(yōu)點(diǎn)?，即用型免疫組化試劑盒操作步驟簡(jiǎn)單方便快捷，可在我公司購買一抗及該試劑盒即可完成免疫組化實(shí)驗(yàn)，歡迎新老客戶右側(cè)咨詢我公司SP免疫組化檢測(cè)試劑盒(兔)即用型SP(Streptavidin-Peroxidase)免疫組化檢測(cè)試劑盒是利用LAB-SA第二代技術(shù)生產(chǎn)的免疫組化檢測(cè)試劑，大特點(diǎn)是高靈敏度，低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育時(shí)間短，適用于冷凍切片、石蠟切片及固定的細(xì)胞涂片?？捎糜跈z測(cè)兔來源的一抗SP試劑盒內(nèi)容：無色試劑：內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑試劑A：封閉用正常
雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒2020/12/01
雙縮脲法蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒說明書微量法100T/96S注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定，確保蛋白濃度在1～10mg/ml范圍內(nèi)。測(cè)定意義：樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外，可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。測(cè)定原理：強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物；紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān)，故可用來測(cè)定蛋白質(zhì)含量。該方法測(cè)定范圍為1~10mg蛋白質(zhì)，適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品，尤其是動(dòng)物材料。自備儀器和用品：離心
糖原合成酶（GCS）測(cè)試盒2020/12/01
糖原合成酶（Glycogensynthase，GCS）試劑盒說明書微量法100管/96樣正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：GCS（EC2.4.1.11）催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP，以α-1，4-糖苷鍵相連延長(zhǎng)糖鏈，是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶，是胰島素作用的主要靶酶，對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。測(cè)定原理：GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UDP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測(cè)定NADH下
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