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上海雅吉生物科技有限公司
初級會員 | 第8年
我猜，這種抗體你連聽都沒聽說過2021/01/08
二抗也稱第二抗體，能和抗體結(jié)合，即抗體的抗體，其主要作用是檢測抗體的存在，放大一抗的信號，用于靶標(biāo)抗原的間接檢測。二抗帶有可以被檢測出的標(biāo)記（如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)），可以和一抗結(jié)合，通過信號放大提高靈敏度，并為標(biāo)記和檢測提供了更大靈活性?？梢哉f生物學(xué)研究、醫(yī)藥研究和開發(fā)都離不開好的二抗產(chǎn)品。但令很多從事稀有物種研究的學(xué)者頭大的是——選擇一個物種對應(yīng)、質(zhì)量又好的二抗產(chǎn)品，真是太難了！猴、沙鼠、水貂、貓，要想生產(chǎn)這些罕見物種的二抗，并不是十分容易，因此鮮少有公司能提供全面的罕見物種靶
微球數(shù)量太少？這三點(diǎn)一定要注意2021/01/08
提及多因子的定量檢測，越來越多的小伙伴會一個想到Luminex技術(shù)。Luminex基于微球設(shè)計原理，可以在1張96孔板中定量檢測多達(dá)100種分析物，僅需少量樣本，節(jié)約時間、經(jīng)費(fèi)，可謂一舉多得。R&DSystems®擁有LuminexAssay以及LuminexHighPerformanceAssay兩個產(chǎn)品系列，均基于帶有顏色編碼的微球，這些微球表面包被了識別不同目標(biāo)分析物的特異性抗體。當(dāng)預(yù)包被的微球與待檢樣本孵育時，分析物被微球捕獲，經(jīng)由生物素標(biāo)記的特異性檢測抗體混合物識別，加入鏈霉親和素-P
抗體相關(guān)基本知識2021/01/07
抗體(antibody)是生物體在抗原物質(zhì)刺激下，由B細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白(Ig)。按抗體的來源，可將其分為天然抗體和人工制備的抗體，是通過對特定生物體免疫接種特定抗原物質(zhì)后而獲得。人工免疫動物制備的抗體應(yīng)用甚為廣泛，既可以用于科學(xué)研究，也可以用于疾病的預(yù)防、診斷和治療。一、抗體的基本結(jié)構(gòu)經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，抗體Ig由四條多肽鏈組成，各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu)，稱為Ig單體，是構(gòu)成抗體的基本單位。（一）
多聚半乳糖醛酸酶（PG）測試盒2021/01/06
中性木聚糖酶（NeutralXylanase，NEX）測定試劑盒說明書微量法100T/48S注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。測定意義：木聚糖酶(EC3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，NEX一般分離自適生長pH為6-8的微生物。測定原理：NEX在中性環(huán)
細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶（B-AI）測試盒2021/01/06
細(xì)胞壁不溶性化酶（cell-wallbindingacidinvertase,B-AI）試劑盒說明書分光光度法50管/24樣正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：蔗糖轉(zhuǎn)化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)適pH，Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）和中性轉(zhuǎn)化酶（NI）兩種類型。AI的適pH為3～5。AI分為可溶性AI(S-AI)和細(xì)胞壁不溶性AI（B-AI）兩種類型。B-AI存在于細(xì)胞間隙并結(jié)合在細(xì)胞壁上，主要參與
酵母菌的鑒定2021/01/05
酵母菌的鑒定主要根據(jù)形態(tài)特征、生長特性和形成子囊孢子和擲抱子的情況，另外還必需進(jìn)行必要的生化測試。本文介紹的對食品和乳制品中分離的常見酵母菌的鑒定，主要是以形態(tài)特征為依據(jù)的。在瓊脂培養(yǎng)基(如粗玉米粉瓊脂、酵母膏瓊脂〉中，25℃培養(yǎng)2-5d后的幼齡酵母菌菌落會出現(xiàn)圓丘狀，邊緣完整的特征性菌落，菌落為濕的奶油狀，具有光澤、輕度光澤或無光澤的光滑表面，菌落顏色通常為白色、奶油色、粉紅色或橙紅色。經(jīng)進(jìn)一步培養(yǎng)，有些菌落變皺、發(fā)干、易碎，類似于細(xì)菌菌落，但多數(shù)細(xì)菌不能在低pH或用于霉菌、酵母菌分離計數(shù)的選
細(xì)菌的生理、生化試驗簡介2021/01/05
微生物生化反應(yīng)是指用化學(xué)反應(yīng)來測定微生物的代謝產(chǎn)物，生化反應(yīng)常用來鑒別一些在形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的微生物。因此微生物生化反應(yīng)是微生物分類鑒定中的重要依據(jù)之一,微生物檢驗中常用的生化反應(yīng)介紹如下：一、糖酵解試驗不同微生物分解利用糖類的能力有很大差異，或能利用或不能利用，能利用者，或產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣。可用指示劑及發(fā)酵管檢驗。試驗方法：以無菌操作，用接種針或環(huán)移取純培養(yǎng)物少許，接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基管中，若為半固體培養(yǎng)基，則用接種針作穿刺接種。接種后，置36±1.0°C培養(yǎng)，每天觀察結(jié)果，檢視培養(yǎng)基顏色有
豬鏈球菌 2 型三重 PCR 檢測方法2021/01/04
GB/T19915.4—2005豬鏈球菌2型三重PCR檢測方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬鏈球菌2型莢膜基因（cps2）、溶菌酶釋放蛋白基因（mrp）和orf2這三個毒力基因的三重PCR檢測技術(shù)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于由豬鏈球菌2型致病基因和致病菌株的檢測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的。新版本。凡是不注日期的引用文件，其。新版本適用
細(xì)胞遷移的實(shí)驗2020/12/30
細(xì)胞遷移是指細(xì)胞在接收到內(nèi)源或外源遷移信號后而產(chǎn)生的移動。細(xì)胞遷移是通過胞體形變進(jìn)行的緩慢的定向移動，涉及細(xì)胞覓食、傷口*、胚胎發(fā)生、免疫反應(yīng)、感染和癌癥轉(zhuǎn)移等生理現(xiàn)象。因此通過對細(xì)胞遷移的研究，對阻止癌癥轉(zhuǎn)移、異體植皮等醫(yī)學(xué)應(yīng)用方面具有一定意義。細(xì)胞侵襲實(shí)驗則是研究腫瘤細(xì)胞對基質(zhì)膜消化后的遷移運(yùn)動，腫瘤細(xì)胞須經(jīng)。血管基底膜穿入深面間質(zhì)后才能侵襲組織和轉(zhuǎn)移至遠(yuǎn)處。腫瘤細(xì)胞侵襲遷移能力的改變通常采用Transwell小室進(jìn)行檢測。Transwell小室是一種膜濾器，也認(rèn)為是一種有通透性的支架(Pe
人（Human）嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A（CyPA） ELISA檢測試劑盒說明書2020/12/29
本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷人（Human）嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A（CyPA）ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A（CyPA）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A（CyPA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計
IHC實(shí)驗疑難解析大匯總2020/12/28
本周小編將帶來IHC系列培訓(xùn)的，后一講，IHC實(shí)驗中各種常見問題的原因分析和解決方案。希望通過本次課程，您可以了解到IHC實(shí)驗中出現(xiàn)異常情況時您可采取的措施。一、切片無染色I(xiàn)HC中可能遇到的一個主要問題是無染色。出現(xiàn)這一問題的原因主要有三個：蛋白表達(dá)量低/無表達(dá)樣本制備不良試劑/方案問題1、表達(dá)量低/無表達(dá)了解目標(biāo)蛋白表達(dá)的種屬特異性和組織特異性，有時候目標(biāo)蛋白在一些常見種屬(如：人)有表達(dá)，并不表示在其他種屬上也有表達(dá)。解決方案：在實(shí)驗前查詢文獻(xiàn)，確定您待檢測的目標(biāo)種屬和組織的表達(dá)量情況；；在
RCA滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒說明書2020/12/24
RCA滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒說明書滾環(huán)擴(kuò)增（rollingcircleamplification，RCA）是近幾年發(fā)展起來的種核酸恒溫擴(kuò)增方法。以環(huán)狀DNA為模板，通過個短的DNA引物（與部分環(huán)狀模板互補(bǔ)），在phi29DNA聚合酶催化下將dNTPs轉(zhuǎn)變成單鏈DNA，此單鏈DNA包含成百上千個重復(fù)的模板互補(bǔ)片段。這種方法不僅可以直接擴(kuò)增DNA和RNA，還可以實(shí)現(xiàn)對靶核酸的信號放大，靈敏度達(dá)到個拷貝的核酸分子，因此在核酸檢測中具有很大的應(yīng)用價值和潛力。因其高靈敏度、高特異性和可操作性，RCA技術(shù)在基礎(chǔ)研究
WB實(shí)驗小能手—樣本制備篇2020/12/24
蛋白質(zhì)印跡（WesternBlot,WB）又稱為免疫印跡（Immunoblot），是利用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）將樣品中分子量大小不同的蛋白分開，然后通過電轉(zhuǎn)移的方法將凝膠中的蛋白定量地遷移并幾乎原位復(fù)制、固定到固相膜上，再利用抗原、抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)，特殊的抗體標(biāo)記技術(shù)以及相應(yīng)的檢測方法，進(jìn)而對目的蛋白進(jìn)行定性、相對定量檢測的技術(shù)。此項技術(shù)誕生于上世紀(jì)七十年代，近半個世紀(jì)以來經(jīng)久不衰。WB實(shí)驗流程分為樣本采集，蛋白樣品制備，上樣，凝膠電泳，轉(zhuǎn)膜，封閉，一抗孵育，洗膜，二抗
脊髓損傷模型小鼠系統(tǒng)免疫反應(yīng)的動態(tài)變化2020/12/24
脊髓損傷（SCI）是一種難以治愈的神經(jīng)疾病，目前尚無突破性的治療方法。SCI通常表現(xiàn)為原發(fā)性和繼發(fā)性損傷。機(jī)械性損傷，如外傷，會直接引起原發(fā)損傷。多種病理變化，包括血管損傷、脫髓鞘、炎癥反應(yīng)、代謝紊亂和興奮性毒性會引起繼發(fā)性損傷。椎管內(nèi)炎癥和免疫反應(yīng)被認(rèn)為在各種繼發(fā)性損傷機(jī)制的演變、病理發(fā)展和協(xié)調(diào)中發(fā)揮核心作用，這些機(jī)制加重了臨床神經(jīng)功能缺損。SCI引發(fā)的椎管內(nèi)炎癥已經(jīng)得到了充分的研究，而SCI引發(fā)的炎癥反應(yīng)是一種無癥狀和非自限性的炎癥級聯(lián)反應(yīng)，由一系列不同類型的細(xì)胞協(xié)調(diào)，包括浸潤性免疫細(xì)胞、小
植物總酚試劑盒2020/12/23
植物總酚（TotalPhenols，TP）試劑盒說明書微量法100T/48S注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。測定意義：植物酚類物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。測定原理：在堿性條件下，酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，在760nm處有特征吸收峰，測760nm處的吸光值，即可得樣品總酚含量。自備實(shí)驗用品及儀器：天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量
葉綠素的理化性質(zhì)測定實(shí)驗2020/12/23
實(shí)驗方法原理葉綠素是一種二羧酸的酯，可與堿起皂化作用，產(chǎn)生的鹽能溶于水，可用此法將葉綠素與類胡蘿卜素分開。葉綠素與類胡蘿卜素都具有共軛雙鍵，在可見光區(qū)表現(xiàn)出一定的吸收光譜，可用分光鏡檢查或用分光光度計精，確測定。葉綠素吸收光量子后轉(zhuǎn)變成的激發(fā)態(tài)葉綠素分子很不穩(wěn)定，當(dāng)它回到基態(tài)時，可以發(fā)出紅光量子，因而產(chǎn)生熒光。葉綠素的化學(xué)性質(zhì)也很不穩(wěn)定，容易受強(qiáng)光的破壞，特別是當(dāng)葉綠素與蛋白質(zhì)分離后，破壞更快。葉綠素分子中的鎂可被H+所取代而成為褐色的去鎂葉綠素，后者遇到Cu2+可形成綠色的銅代葉綠素，這種葉綠
電泳技術(shù)簡介2020/12/21
電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質(zhì)、核苷酸等）在惰性支持介質(zhì)（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應(yīng)的電極方向按各自的速度進(jìn)行泳動，使組分分離成狹窄的區(qū)帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區(qū)帶圖譜或計算其百分含量的方法。電泳技術(shù)的基本原理和分類：在電場中，推動帶電質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動的力（F）等于質(zhì)點(diǎn)所帶凈電荷量（Q）與電場強(qiáng)度（E）的乘積。F＝QE質(zhì)點(diǎn)的前移同樣要受到阻力（F）的影響，對于一個球形質(zhì)點(diǎn)，服從Stoke定律，即：F′＝6πrην式中r為質(zhì)點(diǎn)半徑，η為介質(zhì)粘度，
PCR常見問題總匯2020/12/21
PCR產(chǎn)物的電泳檢測時間：一般為48h以內(nèi)，有些。好于當(dāng)日電泳檢測，大于48h后帶型不規(guī)則甚致消失。假陰性，不出現(xiàn)擴(kuò)增條帶。PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備，②引物的質(zhì)量與特異性，③酶的質(zhì)量及，④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)針對上述環(huán)節(jié)進(jìn)行分析研究。模板：①模板中含有雜蛋白質(zhì)，②模板中含有Taq酶抑制劑，③模板中蛋白質(zhì)沒有消化除凈，特別是染色體中的組蛋白，④在提取制備模板時丟失過多，或吸入酚。⑤模板核酸變性不*。在酶和引物質(zhì)量好時，不出現(xiàn)擴(kuò)增帶，極有可能是標(biāo)本的消化處理，模板核酸提取過程出
分子生物學(xué)實(shí)驗基礎(chǔ)知識2020/12/18
分子生物學(xué)是在生物化學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，以研究核酸和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能等生命本質(zhì)的學(xué)科，在核酸、蛋白質(zhì)分子水平研究發(fā)病、診斷、治療和預(yù)后的機(jī)制。其中基因工程（基因技術(shù)，基因重組）是目前分子生物學(xué)研究熱點(diǎn)，這些技術(shù)可以改造或擴(kuò)增基因和基因產(chǎn)物，使微量的研究對象達(dá)到分析水平，是研究基因調(diào)控和表達(dá)的方法，也是分子水平研究疾病發(fā)生機(jī)制、基因診斷和基因治療的方法。轉(zhuǎn)化（transformation）、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)位等是自然界基因重組存在的方式，也是人工基因重組常采用的手段?；蛑亟M的目的之一是基因克隆（g
色譜分析技術(shù)2020/12/18
高壓液相色譜Martin和Synge在1941年就提出高效相色譜的設(shè)想，然而直到六十年代后期，由于各種技術(shù)的發(fā)展，高效液相色譜才付諸實(shí)現(xiàn)。這種色譜技術(shù)曾被稱為高速液相色譜（HighSpeedLiquidChromatography），高壓液相色譜（HighParss-ureLipuidChromatography），目前使用多的名稱是高效液相色譜（HighPe-rformanceLiauidChromatography，HPLC）。高效液相色譜已經(jīng)廣泛地應(yīng)用，成為一項*的技術(shù)。它的主要優(yōu)點(diǎn)是⑴分
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