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深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年
大鼠胰腺移植模型制作2023/04/11
原理成功的胰腺移植能為糖尿病患者或試驗(yàn)對(duì)象提供具有正常功能的胰腺組織,能生理性調(diào)節(jié)胰島素的分泌,維持正常血糖,阻止甚至逆轉(zhuǎn)糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生、進(jìn)展。目前建立的模型多是供胰的靜脈回流采用供體門靜脈與受體下腔靜脈端側(cè)吻合的體循環(huán)回流方式。材料與儀器供、受者大鼠鏈脲霉素10%的四氧嘧啶葡萄糖生理鹽水1%的戊吧比妥鈉乙-醚25UL肝素溶液無(wú)菌水顯微外科手術(shù)器械包手術(shù)顯微鏡眼科剪手術(shù)器械步驟一、供、受者大鼠的選擇根據(jù)不同的研究目的選擇不同的動(dòng)物品系,在同種移植模型中,一般采用兩種純系健康大鼠,如Lewis
免疫組織化染色2023/04/10
材料與儀器新鮮組織二甲苯酒精H2O2抗原修復(fù)液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES恒溫?fù)u床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機(jī)載玻片步驟一.石蠟切片免疫組化染色實(shí)驗(yàn)步驟:1.石蠟切片脫蠟至水:(石蠟切片染色前應(yīng)置60℃1小時(shí))。(1)二甲苯I、II,各10分鐘。(2)梯度酒精:100%,2分鐘®95%,2分鐘®80%,2分鐘®70%2分鐘。(3)蒸餾水洗:5分鐘,2次(置于搖床)。2.過(guò)氧化氫封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶:3%H2O2,室溫10分鐘
小鼠灌胃具體操作2023/04/07
小鼠灌胃方法比較簡(jiǎn)單,需要關(guān)注的只有兩點(diǎn):一是要保持小鼠的頭部和頸部成一直線,方便灌胃針頭進(jìn)入,二是動(dòng)作要輕柔,從口角進(jìn)入,防止損失食道。做的多了自然就熟練了。具體操作過(guò)程如下:1.準(zhǔn)備灌胃針頭。一般可以從市場(chǎng)上面買到,實(shí)在沒(méi)有的話,可以用12號(hào)的針頭,剪去針尖,用砂紙將頭端磨平,也可以用。但是買的灌胃針頭的頭端用錫或者適宜的方法處理了針頭的銳口,自己用砂紙不可能將所有的銳口都磨掉,用這樣的針頭灌胃,損失小鼠食道的可能性比較大。2.抓住小鼠,使其頭、頸和身體呈一直線。抓小鼠的動(dòng)作很簡(jiǎn)單,左手的小
MAPK/ERK信號(hào)通路圖及簡(jiǎn)介2023/04/07
MAPK,絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinases,MAPKs)是細(xì)胞內(nèi)的一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。研究證實(shí),MAPKs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路存在于大多數(shù)細(xì)胞內(nèi),在將細(xì)胞外刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞及其核內(nèi),并引起細(xì)胞生物學(xué)反應(yīng)(如細(xì)胞增殖、分化、轉(zhuǎn)化及凋亡等)的過(guò)程中具有至關(guān)重要的作用。研究表明,MAPKs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在細(xì)胞內(nèi)具有生物進(jìn)化的高度保守性,在低等原核細(xì)胞和高等哺乳類細(xì)胞內(nèi),目前均已發(fā)現(xiàn)存在著多條并行的MAPKs信號(hào)通路,不同的細(xì)胞外刺激可使用不同的MAPK
怎么處理植物組織培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)的各種污染2023/04/07
1.培養(yǎng)基的配制注意事項(xiàng)植物組織培養(yǎng)經(jīng)常用到MS培養(yǎng)基,包含十幾種化合物。因?yàn)橛行┗衔锵嘤鰰?huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生沉淀,影響培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分,準(zhǔn)備MS培養(yǎng)基需要配制多種高倍母液。且配制母液時(shí),尤其涉及大量元素的母液時(shí),一定要等一種成分溶解之后,再緩慢的添加另一種成分,切記「一鍋煮」,即不能將各種化合物一齊添加進(jìn)去??蛇x用MS培養(yǎng)基基鹽在自行加入蔗糖和瓊脂配制MS培養(yǎng)基,既經(jīng)濟(jì),更高效。2.滅菌后培養(yǎng)基不凝膠或者凝膠偏軟植物凝膠、瓊脂都對(duì)酸性條件敏感,pH值低于5很難成膠或凝膠偏軟,切記高壓滅菌前調(diào)節(jié)
新生大鼠心臟細(xì)胞的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)2023/04/07
材料與儀器SpragueDawley幼鼠胰酶液乙醇攪拌臺(tái)燒杯步驟組織消化和分離細(xì)胞1.在細(xì)胞操作間內(nèi),放一個(gè)加熱攪拌臺(tái),上放一個(gè)裝有100ml滅菌水的容量600ml的燒杯,加熱至37℃。2.準(zhǔn)備胰酶液。用水浴或溫箱使胰酶液溫度保持在37℃。3.做一個(gè)冰臺(tái):將一只平皿裝滿冰后倒置即可,70%乙醇擦拭平皿后放進(jìn)操作臺(tái)。取3個(gè)60mm的一次性組織培養(yǎng)用平皿,加入5ml鹽水A,標(biāo)記上1,2,3放進(jìn)操作臺(tái)的冰臺(tái)上。4.取一只干凈加蓋的燒杯,內(nèi)放一塊Metofane飽和的紗布,把0~1日齡的SpragueD
神經(jīng)組織染色實(shí)驗(yàn)-神經(jīng)尼氏體染色2023/04/06
原理神經(jīng)元細(xì)胞核周含有尼氏小體,在一定條件影響下或神經(jīng)元受到損傷時(shí),尼氏小體可減少或消失。常用olszwski法能夠較好地顯示尼氏小體。材料與儀器石蠟組織切片焦油紫乙酸鈉蒸餾水冰醋酸二甲苯乙醇樹膠步驟焦油紫染色液:焦油紫1g,乙酸鈉2.2g,蒸餾水97ml,冰醋酸3ml。1.石蠟組織切片6~8μm,常規(guī)脫蠟至水。2.蒸餾水洗1min。3.焦油紫染色液浸染3h。4.直接用95%乙醇液迅速分化,鏡下觀察至尼氏小體呈紫色,其他組織無(wú)色為止。5.無(wú)水乙醇迅速脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。注意事項(xiàng)1.焦
血液運(yùn)輸管道——血管的生理機(jī)制2023/03/17
19世紀(jì)法國(guó)名醫(yī)卡薩尼斯說(shuō)過(guò)一句話:“人與動(dòng)脈同壽”,也有人形象的把血管比作“生命的蠟燭”,這些都說(shuō)明了人類的壽命與血管的健康有極其密切的關(guān)系。隨著飲食結(jié)構(gòu)和生活方式的改變及社會(huì)的老齡化,動(dòng)脈硬化導(dǎo)致的血管閉塞性疾病的發(fā)病率日趨增多,嚴(yán)重威脅人類的生命健康,已成為人類的第一殺手.人體血液的功能主要有以下幾點(diǎn):1.運(yùn)輸功能機(jī)體所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和機(jī)體在代謝過(guò)程中所產(chǎn)生的各種廢物都是依靠血液的流動(dòng)來(lái)運(yùn)輸?shù)摹?.調(diào)節(jié)功能機(jī)體要維持內(nèi)外環(huán)境的穩(wěn)定性,都要通過(guò)血液的傳遞來(lái)調(diào)節(jié)。3.防御功能血液中的某種成分
H1人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題2023/02/24
疑難解答?是否還需要往H1細(xì)胞專用培養(yǎng)基中補(bǔ)充或添加成分?不需要。H1細(xì)胞培養(yǎng)基中各個(gè)成分的質(zhì)量和濃度都經(jīng)過(guò)了優(yōu)化實(shí)驗(yàn),支持人ESC/iPSC的長(zhǎng)期培養(yǎng),無(wú)需再自行添加。?培養(yǎng)基中有沉淀狀物質(zhì)是否是質(zhì)量問(wèn)題?添加劑在解凍過(guò)程中,若有少量沉淀析出,屬于正?,F(xiàn)象,不影響使用,請(qǐng)充分混勻后與基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合。但添加劑不能在37℃解凍,否則會(huì)析出大量沉淀,影響培養(yǎng)基的效價(jià)。如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)大量沉淀,請(qǐng)不要使用。?是否能在37℃反復(fù)水浴H1細(xì)胞專用培養(yǎng)基?不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉(zhuǎn)換會(huì)導(dǎo)致H1細(xì)胞專用
H1人胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)2023/02/24
H1人胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)1.試劑和材料H1細(xì)胞專用培養(yǎng)基試劑成分規(guī)格數(shù)量?jī)?chǔ)存條件H1細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基500mL1瓶2-8℃H1細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑20mL1支-20℃所需的其它試劑和材料產(chǎn)品規(guī)格貨號(hào)Y276321mgH1Med-iCell-CA005Matrigel5mLH1Med-iCell-CA004H1細(xì)胞消化液500mLH1Med-iCell-CA003ES細(xì)胞專用凍存液100mLiCell-0700-T另需細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶/板,15mL離心管和移液管等細(xì)胞培養(yǎng)耗材2.培養(yǎng)流程2.1試劑的制備2.
成功轉(zhuǎn)染脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADMSCs)(IF6.684)文章分享2023/02/24
zetalifeAdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADMSCs)(IF6.684)文章分享zetalife轉(zhuǎn)染脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADMSCs)(IF6.684)文章分享編輯一、轉(zhuǎn)染犬/狗脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADMSCs)siRNA基因沉默簡(jiǎn)述熒光素標(biāo)記的siRNA(小干擾RNA)每個(gè)基因設(shè)計(jì)有三個(gè)siRNA,使用美國(guó)ZetaLife公司AdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑(ZetaLife,MenloPark,CA,UnitedStates)用siRNA轉(zhuǎn)染犬/狗脂肪間充質(zhì)
植物原生質(zhì)體的制備2023/02/21
原理去掉植物細(xì)胞壁的方法可以是機(jī)械的人工操作,也可以利用酶解法。較早利用機(jī)械法制備原生質(zhì)體的首-推Klercker(1892),直到1960年英國(guó)科學(xué)家Cocking才第一次用酶法大量制備原生質(zhì)體。本實(shí)驗(yàn)以植物的葉肉組織為材料,利用纖維素酶和果膠酶來(lái)消化細(xì)胞壁,分離細(xì)胞。材料與儀器油菜或菠菜或煙草氯化鈣蒸餾水2蔗糖酶解液顯微鏡離心機(jī)離心管剪刀鑷子吸管培養(yǎng)皿載玻片蓋玻片步驟1、取材根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜅l件選取不同的材料2、分離原生質(zhì)體(1)撕葉下表皮(2)酶解將撕去下表皮的葉片剪成小塊,放在盛有5mL酶
液泡的分離2023/01/30
材料與儀器紫洋蔥紫蘿卜葉蔗糖溶液小鑷子步驟一、材料與設(shè)備紫洋蔥、紫蘿卜葉、0.5M蔗糖溶液、小鑷子二、實(shí)驗(yàn)步驟撕取紫色洋蔥或蘿卜葉片表皮,置于載玻片上,稍滴加清水后蓋上蓋玻片,于顯微鏡下觀察制片中的細(xì)胞,若細(xì)胞其中有一個(gè)完整無(wú)缺的、含花青素的玫瑰紫色液泡,則用濾紙條吸引液體的方法連續(xù)滴加0.5M蔗糖溶液,使細(xì)胞發(fā)生強(qiáng)烈的質(zhì)壁分離,隨后用鋒利刀片在細(xì)胞縱軸垂直的面上截?cái)?,在顯微鏡下選擇已剖開(kāi)但原生質(zhì)未受損傷的細(xì)胞處,再滴加少許蔗溏液,用小鑷子輕輕壓蓋玻片,可見(jiàn)原生質(zhì)破裂或脫離,而含有花青素的液泡被
光合強(qiáng)度的測(cè)定2023/01/30
原理改良半葉法是將植物對(duì)稱葉片的一部分遮光或取下置于暗處,另一部分則留在光下進(jìn)行光合作用,過(guò)一定時(shí)間后,在這兩部分葉片的對(duì)應(yīng)部位取同等面積,分別烘干稱重,因?yàn)閷?duì)稱葉片的兩對(duì)應(yīng)部位的等面積的干重原來(lái)相等,光照后葉片重量超過(guò)暗中的葉重、超過(guò)部分即為光合作用產(chǎn)物的重量,并通過(guò)一定的計(jì)算可得到光合作用強(qiáng)度。材料與儀器步驟二、儀器藥品剪刀分析天平稱量皿烘箱刀片金屬模板紗布錫紙三氯-乙酸三、實(shí)驗(yàn)步驟1.選擇測(cè)定樣品在田間選擇有代表性的植株葉片(如葉片在植株上的部位、葉齡、受光條件等)20片,用小紙牌編號(hào)。2
根系活力的測(cè)定2023/01/30
原理根據(jù)植物礦質(zhì)吸收的理論,認(rèn)為植物對(duì)溶質(zhì)的最初吸收具有吸附的特性,并假定這時(shí)在根系表面均勻地復(fù)蓋了一層吸附物質(zhì)的單分子層。因此能根據(jù)根系的某種物質(zhì)的吸附量來(lái)測(cè)定根的吸收面積。常用甲烯藍(lán)作為被吸附物質(zhì),它的被吸附量可以根據(jù)溶液濃度的變化用比色法準(zhǔn)確地測(cè)出。已知1毫克甲烯藍(lán)成單分子層時(shí)占用1.1平方米的面積。據(jù)此即可求出根系的總吸收面積。當(dāng)根系在甲烯藍(lán)溶液中已達(dá)到吸附飽和而仍留在溶液中時(shí),根系的活躍部分能把原來(lái)的物質(zhì)吸收到細(xì)胞中去,因而繼續(xù)吸附甲烯藍(lán)。而后根據(jù)吸附量求出活躍吸收面積,可作為根系活力
淀粉酶活性的測(cè)定2023/01/30
原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐熱,在高溫下易鈍化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發(fā)生鈍化,通常提取液同時(shí)有兩種淀粉酶存在,測(cè)定時(shí),可根據(jù)它們的特性分別加以處理,鈍化其中之一,即可測(cè)出另一酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15分鐘以鈍化β-淀粉酶,便可測(cè)定α-淀粉酶的活性?;蛘邔⑻崛∫河胮H3.6之醋酸在0℃加以處理,鈍化α-淀粉酶的活性,以測(cè)出β-淀粉酶的活性。淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖,可用3,5-二硝基水楊酸試劑測(cè)定。由于麥芽糖能將后者還原生成3-氨基-
還原糖和總糖的測(cè)定2023/01/30
原理各種單糖和麥芽糖是還原糖,蔗糖和淀粉是非還原糖。利用溶解度不同,可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來(lái),再用酸水解法使沒(méi)有還原性的雙糖和多糖徹-底水解成有還原性的單糖。在堿性條件下,還原糖將3,5-二硝基水楊酸還原為3-氨基-5-硝基水楊酸(棕紅色物質(zhì)),還原糖則被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物,在一定范圍內(nèi),還原糖的量與棕紅色物質(zhì)深淺的程度呈一定的比例關(guān)系,在540nm波長(zhǎng)下測(cè)定棕紅色物質(zhì)的消光值,查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算,便可分別求出樣品中還原糖和總糖的含量。多糖水解時(shí),在單糖殘基上加了一分子水,
酶的激活和抑制實(shí)驗(yàn)2023/01/29
原理酶的活力常受某些物質(zhì)的影響,有些物質(zhì)能使酶的活力增加,稱為激活劑;有些物質(zhì)能使酶的活性降低,稱為抑制劑。值得注意的是激活劑和抑制劑不是絕對(duì)的,有些物質(zhì)在低濃度時(shí)為某種酶的激活劑,而在高濃度時(shí)則為該酶的抑制劑。例如,氯化納達(dá)到1/3飽和度時(shí)就可抑制唾液淀粉酶的活力。材料與儀器步驟1.儀器:(1)試管:3支;(2)試管架;(3)漏斗;(4)燒杯;(5)刻度吸管:1毫升×4,5毫升×1;(6)恒溫水??;(7)10毫升×1四、操作步驟:取3支試管,按下表操作以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎點(diǎn)擊安培
種子與幼苗的觀察2023/01/29
材料與儀器蠶豆菜豆豌豆花生蓖麻或油桐種子玉米小麥水稻果實(shí);小麥水稻穎果切片;大豆菜豆花生豌豆蓖麻小麥水稻玉米的幼苗I-KI溶液1%番紅染液顯微鏡解剖鏡培養(yǎng)皿刀片鑷子解剖針載玻片蓋玻片擦鏡紙紗布步驟一、種子的結(jié)構(gòu)與類型種子是種子植物的生殖器官,萌發(fā)后形成幼苗。1.菜豆、蠶豆、蓖麻等種子的形態(tài)結(jié)構(gòu)可選用菜豆、蠶豆、大豆等種子作材料,于實(shí)驗(yàn)前2-3d將種子浸泡于清水中,讓其充分吸脹與軟化,以利于種子的解剖觀察。(1)菜豆種子的形態(tài)結(jié)構(gòu)(圖1、2):取一粒以浸泡脹的菜豆種子??梢?jiàn)種子呈腎型,種子外表有一
植物細(xì)胞分裂和植物分生組織2023/01/29
原理1.了解植物細(xì)胞分裂的三種方式;認(rèn)識(shí)分生組織在植物體上的位置及其類型。2.掌握植物細(xì)胞有絲分裂和減數(shù)分裂各時(shí)期的特征;掌握分生組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。材料與儀器洋蔥根尖鴨跖草大蒜苗永-久制片油菜莖尖新鮮莖段胡桃刺槐枝條小麥幼莖冰醋酸醋酸洋紅龍膽紫醋酸碘化鉀番紅水顯微鏡水杯剪刀培養(yǎng)皿燒杯指形管滴管載玻片蓋玻片吸水紙酒精燈刀片鑷子解剖針紗布毛筆步驟一、植物細(xì)胞分裂植物細(xì)胞在進(jìn)行生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,不斷地進(jìn)行細(xì)胞分裂,增加細(xì)胞的數(shù)目。植物細(xì)胞分裂的方式有有絲分裂、無(wú)絲分裂、減數(shù)分裂三種,其中最-普-遍、最常見(jiàn)
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