国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

葉綠體的分離與熒光觀察2023/01/29

原理組織勻漿后懸浮在等滲介質中進行差速離心，是分離細胞器的常用方法。一個顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀、密度、離心力及介質黏度等。同一離心場中，同一時間內，密度和大小不同的顆粒沉降速率不同。依次增加離心力和離心時間，就能使非均一的懸浮液中的顆粒按其大小、密度先后分批沉降在離心管底部，從而可分批收集各種亞細胞成分。材料與儀器新鮮菠菜氯化鈉離心機組織搗碎機顯微鏡天平離心管紗布燒杯量筒滴管載玻片、蓋玻片步驟一、實驗步驟1.選取新鮮的嫩菠菜葉，洗凈擦干后去除葉梗及粗脈，稱30g于150m

砷鉬酸比色法2023/01/16

原理還原糖是具有羰基（C=O）的糖，能將其它物質還原而其本身被氧化。（1）還原糖在堿性條件及有酒石酸鉀鈉存在下加熱，可以定量地還原二價銅離子為一價銅離子，產(chǎn)生磚紅色的氧化亞銅沉淀，其本身被氧化。具體反應如下：（2）氧化亞銅在酸性條件下，可將鉬酸銨還原，還原型的鉬酸銨再與砷-酸氫二鈉起作用，生成一種藍色復合砷鉬藍，其顏色深淺在一定范圍內與還原糖的含量（即被還原的Cu2O量）成正比，用標準葡萄糖與砷鉬酸作用，比色后做標準，就可測得樣品還原糖含量。材料與儀器植物材料銅試劑砷鉬酸試劑標準葡萄糖原液分光光

分光光度法測定葉綠素含量2023/01/16

原理葉綠素廣泛存在于果蔬等綠色植物組織中，并在植物細胞中與蛋白質結合成葉綠體。當植物細胞死亡后，葉綠素即游離出來，游離葉綠素很不穩(wěn)定，對光、熱較敏感；在酸性條件下葉綠素生成綠褐色的脫鎂葉綠素，在稀堿液中可水解成鮮綠色的葉綠酸鹽以及葉綠醇和甲醇。高等植物中葉綠素有兩種：葉綠素a和b，兩者均易溶于乙醇、乙-醚、丙酮和氯仿。葉綠素的含量測定方法有多種，其中主要有：1.原子吸收光譜法：通過測定鎂元素的含量，進而間接計算葉綠素的含量。2.分光光度法：利用分光光度計測定葉綠素提取液在最大吸收波長下的吸光值，

植物細胞的活體染色與死活鑒定2023/01/16

原理活體染色是利用某種對植物無害的染料溶液對活細胞進行染色的技術。中性紅是常用的活體染料之一，它是一種弱堿性pH指示劑，變色范圍在pH6.4-8.0之間（由紅變黃）。在中性或微堿性環(huán)境中，植物的活細胞能大量吸收中性紅并向液泡中排泌，由于液泡在一般情況下呈酸性反應。因此，進入液泡的中性紅便解離出大量陽離子而呈現(xiàn)櫻桃紅色，在這種情況下，原生質和細胞壁一般不著色；死細胞由于原生質變性凝固，胞液不能維持在液泡內。因此，用中性紅染色后，不產(chǎn)生液泡著色現(xiàn)象。相反，中性紅的陽離子，卻與帶有一定負電荷的原生質及

葉綠體被膜完整性的測定2023/01/16

原理由于玻璃氰-化-鉀不能透過被膜，故完整葉綠體在等滲介質中不能進行玻璃氰-化-鉀光還原的Hill反應。而失去完整被膜的葉綠體，鐵氰-化-鉀可以進入類囊體進行Hill反應。根據(jù)這一原理，比較脹破與未脹破的葉綠體Hill反應速率，就可計算葉綠體被膜的完整度。材料與儀器植物材料鐵氰-化-鉀NH4Cl氧電極測氧全套裝置燒杯微量進樣器洗耳球步驟1.取0.1ml葉綠體提取液加到0.9ml的蒸餾水中并攪拌1min，使葉綠體被膜脹破，加1ml測定介質Ⅰ懸浮備用。2.取0.1ml未脹破葉綠體提取液加入反應杯中，

細胞傷口愈合2023/01/16

原理在單層培養(yǎng)細胞間制作劃痕以產(chǎn)生愈傷區(qū)域，然后監(jiān)控該傷口周圍細胞的向劃痕遷移的現(xiàn)象，即傷口愈合。改變細胞遷移和/或生長的因素可以增加或降低傷口愈合率。該方法可以定量，適用于自動化系統(tǒng)高通量篩選。材料與儀器人MDA-MB-231細胞DMEM培養(yǎng)基胎牛血清PBS戊二醛乙醇結晶紫24孔培養(yǎng)板槍頭細胞培養(yǎng)儀步驟1.細胞在含有10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中生長。2.細胞以一定密度接種到24孔細胞培養(yǎng)板中，生長24小時后，單層細胞融合度應達到70-80%。3.不要更換培養(yǎng)基。用新的1ml槍頭輕輕的在單層培

一氧化氮合酶免疫組化顯示實驗2023/01/13

簡介目前免疫組化多選用SABC法。一抗是特異性的針對檢測蛋白的單克隆或多克隆抗體（本實驗為兔抗大鼠iNOS）。二抗是生物素標記的針對一抗的抗體（本實驗為羊抗兔IgG）。三抗是針對生物素的鏈霉親和素-過氧化物酶復合物（streptavidinbiotincomplex，SABC）。這樣就可以通過逐級放大的方式，以過氧化物酶標記要檢測的蛋白（iNOS）。顯色液為二氨基聯(lián)苯胺（DAB）和雙氧水（H2O2）。顯色原理：過氧化物酶將H2O2分解，產(chǎn)生新態(tài)氧，使DAB氧化，生成棕黃色顆粒產(chǎn)物，可根據(jù)顏色反應

一氧化氮合酶組化顯示法2023/01/13

簡介細胞中的左旋精氨酸和氧在一氧化氮合酶（nitxicoxidesynthase，NOS）的作用下生成一氧化氮和瓜氨酸。還原型輔酶II（煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，NADPH）是一氧化氮合酶的輔酶，可以將孵育液中的底物脫氫，然后將氫傳遞給硝基四氮唑藍（NBT），使后者還原成藍黑色沉淀。原理一氧化氮合酶組化顯示實驗的基本原理是細胞中的左旋精氨酸和氧在一氧化氮合酶（nitxicoxidesynthase，NOS）的作用下生成一氧化氮和瓜氨酸。還原型輔酶II（煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，NADPH）是一氧

Brachet反應顯示細胞中DNA和RNA2023/01/13

簡介Brachet反應顯示細胞中DNA和RNA是利用了DNA和RNA這種結構上的差異，采用不同的染料同時顯示兩者在細胞中的分布情況。原理Brachet反應顯示細胞中DNA和RNA的基本原理是利用了DNA和RNA這種結構上的差異，采用不同的染料同時顯示兩者在細胞中的分布情況。甲基綠、派洛寧（methylgreen，pyronin）為帶有正電荷的堿性染料（結構式見圖3-2），可與帶有負電荷的核酸分子結合，兩種染料的作用具有選擇性，甲基綠帶有2個正電荷，易與雙鏈的DNA分子結合，使其顯示藍綠色；派洛寧

Feulgen反應顯示細胞中DNA2023/01/13

簡介Feulgen反應由Feulgen在1924年發(fā)明，是一種傳統(tǒng)的、也是最為經(jīng)典的通過化學染色來特異性顯示細胞中DNA的方法。原理Feulgen反應顯示細胞中DNA的基本原理是首先采用稀酸作用于DNA，使其脫去嘌呤堿，暴露出游離醛基，該醛基與Schiff試劑反應生成紫紅色產(chǎn)物，細胞中存在有DNA的部位即呈現(xiàn)紫紅色陽性反應。如圖3-1中所示，堿性品紅是紅色物質，能與產(chǎn)生SO2的試劑作用形成無色產(chǎn)物，即Schiff試劑，它可以與DNA水解釋放出的醛基結合而氧化為紫紅色化合物。用途Feulgen反應

細胞吞噬活動觀察實驗2023/01/13

簡介高等動物體內存在著具有防御功能的吞噬細胞系，它是由單核細胞和粒細胞等白細胞構成，是機體內免疫系統(tǒng)的重要組成部分。在白細胞中，以粒細胞和單核細胞的吞噬活動較強，故被稱為吞噬細胞。原理細胞吞噬活動觀察實驗的基本原理是單核細胞由血液進入組織后逐漸演變成巨噬細胞。巨噬細胞主要靠吞噬作用處理異物；當機體受到細菌等病原體或其他異物入侵時，巨噬細胞首先在趨化因子的作用下向異物移動，然后伸出偽足包裹異物，將異物吞入胞漿內形成吞噬泡，隨后溶酶體與吞噬泡融合并消化異物。材料與儀器器材：載玻片、蓋玻片、解剖剪、鑷

人胚胎干細胞傳代培養(yǎng)2023/01/12

簡介胚胎干細胞是具有一種具有自我更新和全能分化能力的細胞，能發(fā)育分化出成體所有的組織和器官，是體外研究發(fā)育調控機制理想的模型，也是用于人類疾病的干細胞治療和器官組織移植理-想的種子細胞。建立新的人類胚胎干細胞系仍然有很大的倫理學爭議，目前對人胚胎干細胞的研究主要就是基于已經(jīng)建立的人胚胎干細胞系的研究。原理人胚胎干細胞傳代培養(yǎng)的原理是人胚胎干細胞快速生長和擴增，而細胞培養(yǎng)箱恰恰能提供培養(yǎng)所需的環(huán)境。用途胚胎干細胞常用于發(fā)育分化出成體所有的組織和器官，是體外研究發(fā)育調控機制理想的模型，也是用于人類疾

細胞運動觀察2023/01/12

簡介纖毛與鞭毛是單細胞或多細胞生物細胞表面伸出的特化結構，其內部是由微管組成的軸（軸中央由2條微管組成，外圍由9組二聯(lián)微管環(huán)繞），軸的基部與基體相連，周圍被細胞膜所包繞。直徑為0.15～0.3μm，屬于細胞的運動器官。其運動一般認為是由二聯(lián)微管間的滑動所引起，鞭毛運動方式為波浪式、纖毛運動為波動式。原理細胞運動觀察實驗的基本原理是纖毛與鞭毛是單細胞或多細胞生物細胞表面伸出的特化結構，其內部是由微管組成的軸（軸中央由2條微管組成，外圍由9組二聯(lián)微管環(huán)繞），軸的基部與基體相連，周圍被細胞膜所包繞。直

PEG 介導的脾細胞與骨髓瘤細胞的融合2023/01/12

簡介細胞融合的方法有生物法、化學法和物理法?；瘜W法常用的是化學誘導劑聚乙二醇（polyethyleneglycol，PEG）結合高pH、高鈣離子法。該法操作方便，目前已成為人工誘導細胞融合的主要手段。原理PEG介導的細胞融合的基本原理是利用PEG使細胞相互接觸部位的膜結構發(fā)生重排，加之膜脂雙層的相互親和以及彼此間表面張力的作用，引起相鄰質膜在修復時相互合并在一起，導致細胞之間發(fā)生融合。PEG介導的細胞融合率受下述因素影響。①PEG的分子量與濃度：分子量及其濃度與融合率成正比；但分子量越大、濃度越

PEG 介導的雞血細胞融合2023/01/12

簡介細胞融合的方法有生物法、化學法和物理法?；瘜W法常用的是化學誘導劑聚乙二醇（polyethyleneglycol，PEG）結合高pH、高鈣離子法。該法操作方便，目前已成為人工誘導細胞融合的主要手段。原理PEG介導的細胞融合的基本原理是利用PEG使細胞相互接觸部位的膜結構發(fā)生重排，加之膜脂雙層的相互親和以及彼此間表面張力的作用，引起相鄰質膜在修復時相互合并在一起，導致細胞之間發(fā)生融合。PEG介導的細胞融合率受下述因素影響。①PEG的分子量與濃度：分子量及其濃度與融合率成正比；但分子量越大、濃度越

細胞中液泡系活體染色2023/01/12

簡介細胞中液泡系活體染色實驗是利用中性紅（neutrolred）是液泡系的專一性活體染色劑的特性，在細胞處于生活狀態(tài)時，只將液泡系染成紅色，細胞質和細胞核不被染色。原理細胞中液泡系活體染色實驗的基本原理是動物細胞內由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系，包括高爾基復合體、溶酶體、內質網(wǎng)、轉運泡、吞噬泡等。軟骨細胞內含有較多的粗面內質網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體，能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等，因而液泡系發(fā)達。中性紅（neutrolred）是液泡系的專一性活體染色劑，在細胞處于生活狀態(tài)時，只將液泡系染成紅色

細胞復蘇2023/01/11

簡介細胞復蘇是將凍存在液氮中的細胞解凍之后重新培養(yǎng)，細胞恢復生長的過程。材料與儀器器材：37℃水浴箱、離心機、無菌試管以及培養(yǎng)瓶。試劑：①含20％血清RPMI1640培養(yǎng)液；步驟細胞復蘇的基本過程可分為如下幾步：A從液氮中取出細胞安瓿或凍存管，置37℃水浴中迅速融化，一旦冰塊消失即將凍存管從水浴中取出。B用70％乙醇擦洗凍存管外部以減少污染機會。C吸取凍存管內容物緩慢加入含4-5ml培養(yǎng)液的T-25細胞培養(yǎng)瓶中，置5％CO2、37℃細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)，次日換液。也可通過離心去除細胞保護劑，再進行細胞

混合淋巴細胞增殖2023/01/11

簡介混合淋巴細胞增殖實驗也稱混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLC）或稱混合淋巴細胞反應（MLR），常用于器-官-移-植前的組織配型，以測定受體和供體主要組織相容性抗原（HLA抗原）相容的程度。材料與儀器器材：細胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、吸管等、CO2細胞培養(yǎng)箱、超凈臺。試劑：①10％FCS-RPMI1640培養(yǎng)基;②細胞DCs細胞、反應細胞、外周血單個核細胞。③3H-TdR工作液步驟混合淋巴細胞增殖實驗的基本過程可分為如下幾步：（一）刺激細胞（DCs）的制備A.取健康志愿者肝素抗凝的外周血，淋巴細胞分離液分離單個核

小鼠胚胎成纖維細胞（MEF）原代培養(yǎng)2023/01/11

原理將小鼠的胚胎成纖維細胞（MEF）從機體中取出，經(jīng)胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置MEF生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖。材料與儀器孕鼠PBSEDTA胰酶MEF生長培養(yǎng)基FBS高糖DMEM眼科直剪眼科直鑷眼科彎鑷玻璃平皿3尼龍濾網(wǎng)離心管手術刀片步驟一、實驗材料準備1.動物孕期14至16天的孕鼠(小鼠)。2.試劑無Ca2+和Mg2+的PBS(D-PBS)、0.05%胰酶、0.53mmol/LEDTA溶液、MEF生長培養(yǎng)基(高糖DMEM加10%FBS)。3.器械眼科直

Nunc細胞工廠2023/01/11

原理用培養(yǎng)液制備細胞懸液，將懸液注入單元的各小室內。使長邊朝下，放置。將單元旋轉90度，放平后用CO2充氣。然后封閉，進行培養(yǎng)。材料與儀器單層細胞0.25%天然胰蛋白酶D-PBSA生長培養(yǎng)液Nunc細胞工廠硅酮管和連接器血細胞計數(shù)板或電子細胞計數(shù)器和計數(shù)用液體步驟1.用胰蛋白酶消化后，將細胞懸浮，計數(shù)細胞，用2L培養(yǎng)液將懸液稀釋至細胞密度為2x104個/ml。2.使小室長邊朝下，放置，將培養(yǎng)液供應管與Luer連接管相接，再通過供應管與底孔連通。3.經(jīng)供應管加入細胞和培養(yǎng)液。所有培養(yǎng)小室內的液體將